procaspase-3激活劑(PAC-1)公司正在出售的產(chǎn)品：sm Actinin- Alpha(Mouse skeletal muscle Actinin- Alpha) ELISA Kit 小鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α硫羥 ACS,99.0%
MYS(Mouse Myosin) ELISA Kit 小鼠肌球蛋白六烷 Standard for GC, ≥99.5% (GC)
MHC I /H-2

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

大腸桿菌Cy7標(biāo)記的小鼠抗兔IgMAnti-TAF12 Antibody甘轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(GLYT2)

產(chǎn)黃青霉PE標(biāo)記的小鼠抗兔IgMAnti-TAGLN Antibody甘轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLYT1)

佛雷德里克斯堡假單胞菌APC標(biāo)記的小鼠抗兔IgMAnti-Talin 1/TLN1 Antibody甘脫氫(GLDC)

鞘盒菌屬Alexa Fluor 350標(biāo)記的小鼠抗兔IgMAnti-TAL1 Antibody甘脒基轉(zhuǎn)移(GATM)

黑木耳Cy3標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgGAnti-TANK Antibody蓋膜蛋白β(TECTβ)

Pseudomonas extremaustralisCy5標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgGAnti-TAP2 Antibody蓋膜蛋白α(TECTα)

淺白隱球酵母Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgGAnti-TAP1 Antibody(PB0868)鈣周期結(jié)合蛋白(CACYBP)

釀酒酵母Cy7標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgGAnti-TAT Antibody鈣粘蛋白EGFLAG七經(jīng)G-型受體2(CELSR2)

彩色豆馬勃PE標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgGAnti-TAZ Antibody鈣營(yíng)養(yǎng)蛋白1(CALN1)

乙型溶血性鏈球菌PE-Cy3標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgGAnti-TBC1D4 Antibody鈣網(wǎng)蛋白3(CALR3)

蘇云金芽孢桿菌PE-CY5標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgGAnti-TAZ Antibody鈣同線蛋白3(CLSTN3)

溶桿菌APC標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgGAnti-TBK1 Antibody鈣同線蛋白2(CLSTN2)

赭綠青霉Alexa Fluor 350標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgGAnti-TBP Antibody鈣同線蛋白1(CLSTN1)

花臉蘑Alexa Fluor 488標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgGAnti-TBP Antibody鈣調(diào)(RGN)

釀酒酵母Alexa Fluor 555標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgGAnti-TBP-1/PSMC3 Antibody鈣調(diào)寧蛋白2(CNN2)

哈茨木霉Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgGAnti-TBX5 Antibody鈣調(diào)寧蛋白1(CNN1)

細(xì)胞質(zhì)磷1抗體考克氏菌屬人小腸粘膜組織提取物

磷烯羧激抗體鞘菌屬人食管組織提取物

多聚合α抗體赤霉菌屬人結(jié)腸組織提取物

多聚合g抗體輪層炭菌屬（斜面）人小腸組織提取物
procaspase-3激活劑(PAC-1)巨大芽胞桿 訶子鞣質(zhì)

黃曲霉 訶子寧

棕黑腐質(zhì)霉 訶子次酸,訶子裂酸

亞黃絲蓋傘 靈芝酸C6甲酯

炭疽芽胞桿 靈芝酸H甲酯

青霉屬 靈芝酸C6

檸檬色游動(dòng)球 甘草黃酮C

聚生殼 (+)-表松脂酚

病研所芽孢桿 (-)-松脂

美麗鹽單胞 黃芩苷甲酯

新瀉節(jié)桿 千層紙A-7-0-β-D-葡萄糖酸苷甲酯

黑曲霉 (E)-3'-羥基-4'-甲氧基肉桂酸甲酯

毛栓孔 去芹-桔梗皂苷D3

Pseudomonas extremaustralis 酚-3-O-(6''-O-順-香豆?；?葡萄糖苷

枯草芽胞桿 疏展香茶菜寧E