商品介紹:
英文名稱:UNC1999 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg UNC1999是一種有效的SAM-競爭性的選擇性EZH2和EZH1抑制劑,IC50分別為<10nM和45±3nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1431612-23-5 純度:98.01% 分子量:569.74 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:EZH2和EZH1抑制劑(UNC1999)
英文名稱:UNC1999
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
沉積物鹽坑微菌磷化神經(jīng)生長相關(guān)蛋白43抗體Human TSTA3(GDP-L-fucose synthase) ELISA Kit大鼠腺病(ADV)抗體(IgG)免疫試劑盒
Brenneria salicis 糖原合激-3β抗體Human TTC1 ELISA Kit大鼠?;囸I(AG)免疫試劑盒
生活飲用水 總硬度、化物 抗粘附多肽抗體Human TSPAN31 ELISA Kit大鼠纖維蛋白原γ鏈(Fgg)免疫試劑盒
凍膠假絲酵母腦膠質(zhì)瘤發(fā)病機(jī)制相關(guān)蛋白1抗體Human TTBK2 ELISA Kit大鼠纖維蛋白原β鏈(Fgb/Ab1-181/Ab1-216/Ac1-581)免疫試劑盒
產(chǎn)朊假絲酵母神經(jīng)膜糖蛋白M6aHuman TSPAN33 ELISA Kit大鼠纖維蛋白原α鏈(Fga)免疫試劑盒
尖鐮孢 葫蘆?;?/span>G蛋白偶聯(lián)受體101抗體Human TSPAN5 ELISA Kit大鼠纖維蛋白原(Fb)免疫試劑盒
南方鹽單胞菌胰高血糖樣肽-1受體/GLP-1受體抗體Human TST ELISA Kit大鼠纖溶抑制因子/凝血激活的纖溶抑制物(TAFI)免疫試劑盒
灰樹花-1糖磷脂酰肌抗體Human TSPAN33 ELISA Kit大鼠纖溶原激活物抑制因子(PAI)免疫試劑盒
膠孢磷化gp130抗體Human TSPAN31 ELISA Kit大鼠纖溶原(Plg)免疫試劑盒
球孢白僵菌S轉(zhuǎn)移ζ1抗體Human TSPYL4 ELISA Kit大鼠纖溶抗纖溶復(fù)合物(PAP)免疫試劑盒
解淀粉芽胞桿菌植物亞種甘-N-酰基轉(zhuǎn)移抗體Human TSPAN5 ELISA Kit大鼠纖連蛋白(FN)免疫試劑盒
淺囊狀栓菌甘-N-?;D(zhuǎn)移樣1抗體Human TSN ELISA Kit大鼠周期D3(Cyclin-D3)免疫試劑盒
平菇 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G3PP抗體Human TSNAXIP1 ELISA Kit大鼠周期D2(Cyclin-D2)免疫試劑盒
魯氏接合酵母磷化葡萄糖合成1抗體Human TSNAX ELISA Kit大鼠周期D1(Cyclin-D1)免疫試劑盒
珊瑚球菌糖原蛋白1Human TSP50 ELISA Kit大鼠因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3(SOCS-3)免疫試劑盒
皺皮菌(可訂)生長因子受體結(jié)合蛋白2相關(guān)接頭蛋白抗體Human TSPAN1 ELISA Kit大鼠因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子1(SOCS-1)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格:60-80目,氣相、液相色譜柱D-四氫藥根堿
大腸桿菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:80-100目,氣相、液相色譜柱原阿片堿
杜鵑尾孢菌Cercospora│rhododendri Ferraris 質(zhì)量規(guī)格:2mm-3mm,干燥劑用去芹菜糖桔梗皂苷D
EZH2和EZH1抑制劑(UNC1999)球孢白僵 D-α-環(huán)己基甘氨酸磷酸化胰島受體Elisa
呂氏泰勒蟲(寧縣株) L-(+)-環(huán)己基甘氨酸酪氨酸羥化Elisa
枯草芽孢桿 十六酪氨酸脫羧Elisa
蘋果鏈格孢 N-BOC-啉-7-羧酸胰島受體底物Elisa
大腸桿 N-乙基芐胰島受體底物磷酸化Elisa
萎蔫短小桿 重氧水, 氧18水雌Elisa
毛柄(金針菇) Fmoc-3-(3-吡啶基)-D-氨酸色P450氧化還原Elisa
聚生殼 Fmoc-D-4-苯氨酸色P450Elisa
短密青霉 磷酸鈥水合物色P450氧化還原Elisa
擬熱帶假絲酵母 Diacetato[(S)-(-)-2,2'-bis(diphenylphosphino)-5,5'胰島Elisa
圍小叢殼 乙二四甲叉膦酸S-腺苷甲硫氨酸Elisa
尖孢枝孢 癸烷基硫酸鈉溶Elisa
涎沫假絲酵母 二氨二亞硝酸鉑溶液, Pt w/w (鉑濃度)蘭尼定受體Elisa
鏈單孢 三(乙酰酮酸)釕(III)A型羧酸酯Elisa
類芽胞桿 乙酰酮銠(III) Premion肝糖原Elisa