商品介紹:
SB525334是高活性ALK5選擇性抑制劑,IC50為14.3nM,對(duì)ALK4的抑制性較低,而對(duì)ALK2,3和6則無抑制性。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):356559-20-1 純度:99.18% 分子量:343.42 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:高活性ALK5抑制劑(SB525334)
英文名稱:SB 525334
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
核盤菌HER2受體單克抗體Human SCNN1G ELISA Kit鯨睪(T)免疫試劑盒
巨獸芽孢桿菌癌分化因子P45抗體 HeregulinβHuman SCO1 ELISA Kit鯨雌二(E2)免疫試劑盒
尖孢鐮孢肝脂抗體Human SCP2 ELISA Kit甲型流感
硝基還原假單胞菌磷化組蛋白去乙?;?/span>1抗體Human SCO2 ELISA Kit甲型流感H7N7 HA 免疫試劑盒
浙江芽孢桿菌解旋樣轉(zhuǎn)錄因子抗體Human SCNN1G ELISA Kit甲型流感H5N1(Avian Flu)HA 免疫試劑盒
紫芝(紫靈芝,中華靈芝)三羥基基合成2抗體Human SCO2 ELISA Kit甲型流感H3N2 HA 免疫試劑盒
黃曲霉人類白抗原A抗體Human SCO1 ELISA Kit海獅
淡紫擬青霉羥類固脫氫17β2抗體Human SCLY ELISA Kit海獅孕激/孕(PROG)免疫試劑盒
猴頭菌羥類固脫氫17β-HSD抗體Human SCT(Secretin) ELISA Kit海獅狀腺原(T3)免疫試劑盒
冬蟲夏草人肝單克抗體/肝特異性抗原抗體Human SCMH1 ELISA Kit海獅皮質(zhì)(Cortisol)免疫試劑盒
粉擬青霉小鼠抗聚組單克抗體Human SCML1 ELISA Kit海獅甲狀腺(T4)免疫試劑盒
相思根瘤菌鐵調(diào)節(jié)蛋白/鐵調(diào)抗體Human SCML2 ELISA Kit海獅睪(T)免疫試劑盒
大豆慢生根瘤菌熱休克蛋白J1抗體Human SCML4 ELISA Kit海獅雌二(E2)免疫試劑盒
密旋鏈霉菌發(fā)狀分裂相關(guān)增強(qiáng)子-5抗體Human SCN10A ELISA Kit鮭魚
黃桿菌磷化熱休克蛋白90α抗體Human SCML1 ELISA Kit鮭魚促胰液/胰泌(SCT)免疫試劑盒
賴芽胞桿菌屬磷化組蛋白H2AX抗體Human SCML4 ELISA Kit鮭魚補(bǔ)體蛋白4(C4)免疫試劑盒
: GIM資源名稱: 淡紫青霉 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品10-羥基
銅綠假單胞菌Pseudomonas│aeruginosa 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=2%鷹嘴豆芽A
: F119,60033資源名稱: 變形桿菌 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=2%荷葉堿
高活性ALK5抑制劑(SB525334)甘肅姜成林氏 2-氟-5-溴苯甲基質(zhì)金屬蛋白2Elisa
桿狀毛霉 化鋇,二水基質(zhì)金屬蛋白3Elisa
米曲霉 4-甲氧基-2-羧酸基質(zhì)金屬蛋白8Elisa
酸桿 5-氟-2'-脫氧尿苷-5'-單磷酸鹽基質(zhì)金屬蛋白9Elisa
鼠傷寒沙門氏 Fmoc-3,5-二-L-酪氨酸D-乳酸脫氫Elisa
釀酒酵母 二苯基對(duì)甲苯基膦L-乳酸脫氫Elisa
矮棒曲霉 N,N'-二對(duì)甲苯基聯(lián)苯透明質(zhì)酸Elisa
發(fā)酵畢赤酵母 1-芐氧羰基-4-甲酸催產(chǎn)Elisa
釀酒酵母 甲基三苯基化膦促生長釋放Elisa
棘孢曲霉 1,3 -雙(二環(huán)己膦基)烷去甲腎上腺Elisa
墨西哥畢赤酵母 氨基胍硝酸鹽乙酰Elisa
枯草芽孢桿 5-溴-2-甲氧基吡啶-3-甲一氧化氮Elisa
暗黑鏈霉 1-Boc-3-羥基吡咯烷多巴Elisa
雙孢蘑菇 N-苯基甘氨酸γ氨基丁酸Elisa
光滑青霉 2-(三氟甲氧基)苯磺酰脂肪Elisa