Akt廣譜抑制劑(Afuresertib)公司*的產(chǎn)品：Eotaxin human 人噬性粒趨化因子苯 ACS
Eotaxin-2 human 人噬性粒趨化因子-23-酰 95%
EPO human 人促紅生成對二苯 99%
EPO Receipter human 人促紅生成受體環(huán)己烷 99%
Fas/Apo-1 human 人凋亡相關(guān)因子環(huán)己烷 99.8%, Standard f

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：Akt廣譜抑制劑(Afuresertib)

英文名稱：Afuresertib

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

孤島鹽單胞菌二甲基化組蛋白H3K4抗體Human SCN4B ELISA Kit類人猿

海南小短桿菌二甲基化組蛋白H3K9抗體Human SDCCAG10 ELISA Kit類人猿免疫球蛋白G4(IgG4)免疫試劑盒

梾木生殼針孢基化組蛋白H3抗體Human SEC23IP ELISA Kit類人猿巨噬集落激因子(M-CSF)免疫試劑盒

植物乳桿菌植物亞種乙酰化組蛋白H3抗體Human VTCN1(V-set domain-containing T-cell activation inhibitor 1) ELISA Kit類人猿降鈣基因相關(guān)肽(CGRP)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌乙?；M蛋白H3抗體Human SEC24C ELISA Kit類人猿降鈣(CT)免疫試劑盒

燼灰紅鏈霉菌果糖發(fā)酵亞種磷化肝核因子4α抗體Human SEC24A ELISA Kit類人猿黃體生成(LH)免疫試劑盒

賴芽胞桿菌屬高遷移率核小體結(jié)合蛋白1Human SEC31A ELISA Kit類人猿骨鈣/骨谷蛋白(OT/BGP)免疫試劑盒

根瘤菌磷化組蛋白H3抗體Human SDR39U1 ELISA Kit蝌蚪

木蹄層孔菌組織相容性復(fù)合體α抗體Human SEC5/EXOC2 ELISA Kit蝌蚪睪(T)免疫試劑盒

黑木耳肝生長因子激活抑制蛋白2抗體Human SEC61alpha ELISA Kit蝌蚪雌二(E2)免疫試劑盒

植物乳桿菌HOMER2抗體Human SDR42E1 ELISA Kit蝌蚪γ基丁(GABA)免疫試劑盒

蟲類神食酵母瘤病調(diào)控因子1抗體（鋅指蛋白395）Human SDCCAG8 ELISA Kit鯨

桔橙小單孢菌人類狀瘤病18 E6單克抗體Human SCN4B ELISA Kit鯨孕激/孕(PROG)免疫試劑盒

白鵝膏菌（不可訂購）異質(zhì)核糖核蛋白F抗體Human SDCCAG10 ELISA Kit鯨狀腺原(T3)免疫試劑盒

沃氏富鹽菌異質(zhì)核糖核蛋白K抗體Human SCNM1 ELISA Kit鯨皮質(zhì)(Cortisol)免疫試劑盒

相思根瘤菌異質(zhì)核糖核蛋白L抗體Human SCNN1A ELISA Kit鯨甲狀腺(T4)免疫試劑盒

: N144資源名稱: 大腸埃希氏菌 質(zhì)量規(guī)格：1.0 M in toluene常春藤皂苷元

黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品D-松

鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品可可堿
Akt廣譜抑制劑(Afuresertib)根霉 化鐠補(bǔ)體蛋白4Elisa

嗜熱鏈球 氫氧化鉍過氧化Elisa

土地芽孢桿 5-氟脫氧胞苷乙型腦炎病抗體Elisa

解脂假絲酵母解脂變種 酸桂酯骨成型蛋白2Elisa

假單胞屬 4-硝基對三聯(lián)苯骨成型蛋白7Elisa

枯草芽孢桿 桂酸苯乙酯骨膜蛋白Elisa

植物乳桿 4-(嘧啶硫代)乙酸布魯氏桿Elisa

運(yùn)動(dòng)節(jié)桿 二芐膽囊收縮Elisa

哈茨木霉 Fmoc-N-甲基-D-亮氨酸游離羥脯氨酸Elisa

釀酒酵母 Fmoc-N-甲基-L-亮氨酸基質(zhì)金屬蛋白1Elisa

克勞氏芽孢桿 Fmoc-N-甲基-D-纈氨酸基質(zhì)金屬蛋白2Elisa

韓國假單胞 Maprotiline HCl基質(zhì)金屬蛋白3Elisa

Enterobacter cloacae subsp. dissolvens 2-羥基-D-谷氨酸 二鈉鹽基質(zhì)金屬蛋白8Elisa

大腸埃希 鳥嘌呤硫酸鹽基質(zhì)金屬蛋白9Elisa

球毛殼霉 L-亮氨酰-L-亮氨酰-L-亮氨酸基質(zhì)金屬蛋白1Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)