產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Aurora B和C抑制劑(GSK1070916)
英文名稱:GSK-1070916
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
GSK1070916是可逆的ATP競爭性Aurora B和C抑制劑,IC50分別為3.5nM和6.5nM。而對于Aurora A-TPX2復(fù)合物的IC50則為490nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:942918-07-2 別名:GSK-1070916A 純度:99.55% 分子量:507.63 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
裂褶菌PE標(biāo)記的兔抗豚鼠IgGAnti-TPMT Antibody二氫葉還原(DHFR)
鞘孢囊菌PE-Cy3標(biāo)記的兔抗豚鼠IgGAnti-TPP1 Antibody二氫乳清脫氫(DHODH)
克勞氏芽孢桿菌PE-CY5標(biāo)記的兔抗豚鼠IgGAnti-TPR Antibody二氫嘧啶脫氫(DPYD)
弗氏鏈霉菌APC標(biāo)記的兔抗豚鼠IgGAnti-TPX2 Antibody二氫嘧啶樣蛋白3(DPYSL3)
桔青霉Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗豚鼠IgGAnti-TPSAB1 Antibody二氫嘧啶(DPYS)
Methylobacterium plataniAlexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗豚鼠IgGAnti-TRADD Antibody二氫硫辛轉(zhuǎn)乙酰基(DLAT)
大腸埃希氏桿菌堿性磷(AP)標(biāo)記的兔抗豚鼠IgGAnti-TPSAB1 Antibody二氫硫辛脫氫(DLD)
PseudosalinisphaeraFITC標(biāo)記的兔抗豚鼠IgGAnti-TRAC Antibody二氫硫辛琥珀酰轉(zhuǎn)移(DLST)
竹喙球菌Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗豚鼠IgGAnti-TRAF1 Antibody二氫二脫氫2(DDH2)
腐皮鐮孢Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗豚鼠IgGAnti-TRAF2 Antibody二氫二脫氫(DHDH)
小單孢菌PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗豚鼠IgGAnti-TRAF1 Antibody二羥基激2(DAK)
茄類鐮刀菌PE-Cy7標(biāo)記的兔抗豚鼠IgGAnti-TRAF2 Antibody二磷甘油變位(BPGM)
塊鱗灰青鵝膏菌羅丹明標(biāo)記的兔抗豚鼠IgGAnti-TRAF2 Antibody二甲基精二水解2(DDAH2)
禾谷絲核菌Cy5.5標(biāo)記的兔抗豚鼠IgMAnti-TRAF4 Antibody二甲基精二水解1(DDAH1)
黑曲霉Cy7標(biāo)記的兔抗豚鼠IgMAnti-TRAF5 Antibody二甲基甘脫氫(DMGDH)
白僵菌PE標(biāo)記的兔抗豚鼠IgMAnti-TRAF3 Antibody二級淋巴組織趨化因子(SLC)
piwi樣2蛋白抗體海洋鹽單胞菌人體子宮癌組織提取物
豬瘟抗體Georgeniamuralis人體皮膚癌組織提取物
RNA聚合1和轉(zhuǎn)錄釋放因子抗體善變副球菌人體宮頸癌組織提取物
染色質(zhì)組裝因子1P55抗體耐鹽芽孢桿菌人體膠質(zhì)瘤組織提取物
Aurora B和C抑制劑(GSK1070916)普通變形桿 次皂甙元CP4
Sphingopyxis litoris 丹參酸B 鎂鹽
香菇5 Levatin
釀酒酵母 beta-澳洲茄邊堿
巴克紅曲霉 鳳仙萜四苷F
無花果沙雷氏 Croverin
淡紫擬青霉 Crovatin
木德氏霉 丹參B
果生鏈核盤 伏波酯-12-惕各酸酯-13-異丁酸酯
Escherichia 伏波酯-12-惕各酸酯-13-異丁酸酯
蘇云金芽胞桿阿萊亞種 酚葡萄糖酸苷
變灰青霉 異丹參酮IIA
葡萄座腔 異丹參酮I
聚貪噬 異隱丹參酮
安洛小皮傘(鬼毛針) 異綠原酸C(4,5)
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)