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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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—— 銷售熱線 ——
15026555973 |
| 參考價 | 面議 |
更新時間：2022-04-21 13:38:47瀏覽次數(shù)：269
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 500T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X9717 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 公司產(chǎn)品僅供科研 |
商品介紹：
熒光染料PKH26 是一種可對活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的新型染料，可以標(biāo)記活體細(xì)胞，通過與膜結(jié)構(gòu)的脂質(zhì)分子結(jié)合而標(biāo)記細(xì)胞。對細(xì)胞毒性較小，熒光背景低，脂溶性高，能夠輕易穿透細(xì)胞膜，有著強(qiáng)而穩(wěn)定的紅色熒光。 在細(xì)胞分裂增殖過程中，PKH26的熒光強(qiáng)度會隨著細(xì)胞的分裂而逐級遞減，標(biāo)記熒光可平均分配至兩個子代細(xì)胞中，因此其熒光強(qiáng)度是親代細(xì)胞的一半，根據(jù)這一特性，它可被用于檢測細(xì)胞增殖，細(xì)胞周期的估算及細(xì)胞分裂等方面。PKH26標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均一，并且分裂后的子代細(xì)胞的熒光分配也更均一。在細(xì)胞分裂增殖過程中，PKH26標(biāo)記熒光可平均分配至兩個子代細(xì)胞中，熒光強(qiáng)度變?yōu)橛H代細(xì)胞的一半，通過流式細(xì)胞儀根據(jù)熒光強(qiáng)度的不同，可檢測出未分裂細(xì)胞，分裂一次(1/2的熒光強(qiáng)度)，二次(1/4的熒光強(qiáng)度)，三次(1/8的熒光強(qiáng)度)，以及更多分裂次數(shù)的細(xì)胞。PKH26可檢測分裂次數(shù)多達(dá)六次甚至更多。經(jīng)PKH26標(biāo)記的細(xì)胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究，且具有不會使鄰近細(xì)胞染色的功能。 PKH26標(biāo)記的細(xì)胞用于體內(nèi)觀察可以長達(dá)數(shù)周之久，它常被用來做活體細(xì)胞檢測實(shí)驗和用熒光電鏡觀察細(xì)胞長期活動的實(shí)驗。PKH26 毒性較小，不影響細(xì)胞的增殖能力。此方法操作簡單，且不用放射性同位素，不存在安全隱患?？梢愿焖伲鼫?zhǔn)確和更安全地得到想要的實(shí)驗數(shù)據(jù)。 PKH26標(biāo)記細(xì)胞后通常用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測。 PKH26標(biāo)記細(xì)胞呈紅色熒光，熒光波長：λex=551 nm,λem=567 nm。 儲存條件：-20℃避光保存。 有效期：一年。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
500T | 1～3天 |
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
阿扎那韋（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Moxifloxacin Hydrochloride7號染色體開放閱讀框25抗體包裝1g
阿扎那韋硫鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Moxifloxacin HydrochlorideCOG1蛋白抗體包裝25g
艾地醌(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Salmeterol xinafoate過敏C3受體/補(bǔ)體C3受體抗體包裝5g
愛普列特（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： NaproxenCD3抗體包裝1g
安倍生坦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： NaproxenCP2相關(guān)轉(zhuǎn)錄抑制因子1抗體包裝5g
安乃(標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Prednisone電壓依賴型N型鈣通道α1B抗體包裝1g
（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Prednisone煙堿型乙酰受體A2(神經(jīng)型)抗體包裝5g
蝶啶（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Doxycycline monohydrate/Doxycycline baseC型凝集結(jié)構(gòu)域家族1成員A抗體包裝25g
砜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Zoledronic acid hydrateγ干擾誘導(dǎo)單核因子抗體包裝5g
芐西林/芐青霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Zoledronic acid hydrate血小板因子4抗體包裝1g
芐西林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Pamidronate Disodium血小板趨化因子7蛋白抗體包裝250mg
丁三（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Pamidronate Disodium干擾誘導(dǎo)T趨化因子抗體包裝5g
芬鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Gentamicin sulfate B-淋巴趨化因子抗體包裝100g
基比林（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Gentamicin sulfate 凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體包裝25g
基己（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Cefuroxime Sodium 凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白14抗體包裝5g
黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%,BR血管生長試劑盒α-香附;α-Cyperone
ATCC15173＝CCUG407＝CIP7715＝DSM30026＝ICPB4221＝IFO15125＝JCM5490＝LMG1231＝NCTC8582＝AS1.1800資源名稱: 木糖氧化產(chǎn)堿菌反硝化亞種 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%，標(biāo)準(zhǔn)品血管內(nèi)皮抑抗體試劑盒異烏藥內(nèi)酯;linderalactone
南方鹽單胞菌Halomonas│meridiana 質(zhì)量規(guī)格：含量>99.0%血管內(nèi)皮粘附分子1試劑盒新藤黃;neogambogic aci
PKH26細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒霍氏腸桿 L-天冬氨酸-4-芐酯糖脂抗體Elisa
尖孢鐮刀 五氯吡啶胞裂蛋白9Elisa
釀酒酵母 5-溴-2-氯牛痘病IgMElisa
哈茨木霉 衣康酸酐唾液睪酮Elisa
綠色木霉 4-甲氧基-2-氧代-1,2-二氫-3-基吡啶D-絲氨酸Elisa
球孢白僵 1,10-二氯癸烷趨化因子20Elisa
金灰青霉 2-氯-5-羥甲基吡啶趨化因子28Elisa
毛木耳 2,3,4-三羥基苯甲空泡相關(guān)蛋白A抗體Elisa
金龜子綠僵 5-氯-2-羥基-3-硝基吡啶腦膜炎奈瑟氏Elisa
死亡谷芽孢桿 2',3'-O-異叉肌苷髓過氧化物Elisa
傳染性法氏囊病病 鄰氯三氯甲苯卡介苗抗體Elisa
慢生根瘤 草酸鈮(V)酪氨酸Elisa
堅強(qiáng)芽孢桿 2-乙氧基苯酸過氧化氫Elisa
雞傷寒沙門氏 3-氯-2-氟苯β氨基己糖苷AElisa
嗜果刀孢 4-溴-2-氟類缺陷病Elisa
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