詳細介紹
產(chǎn)品名稱:III型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)
英文名稱:Type III collagenase (enzyme buffer containing 100mL)
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號:GOY-X0543
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公司向您推薦細胞的詳細說明:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
III型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) | Type III collagenase (enzyme buffer containing 100mL) | 5×105cells/瓶 |
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
主要功能:
(1)血管平滑肌細胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
(2)表達鈣通道及ICAM-1和VCAM-1,參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
(3)與血管疾病的進展和穩(wěn)定有關(guān)。
III型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)生理變化:
(1)主動脈硬化。
(2)主動脈瘤
(3)主動脈鈣化。
144506-19-496T和肽素(CPP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
22212-26-696TBiopyrrin蛋白(BPn)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
83218-34-296T線粒體肌激酶1B(CKMT1B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
58139-23-496T普列克底物蛋白同源物樣域家族A成員2(PHLDA2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
18887-19-996T基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP12)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
80952-72-396T肌原纖蛋白2(FBN2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
7554-90-796T粘蛋白17(MUC17)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
560-66-796T性別決定區(qū)Y框蛋白1(SOX1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
3-Bromo-1-butyne
(1S,2S,3R,5S)-(+)-2,3-蒎烷醇
(1S,2S,3R,5S)-(+)-2,3-蒎烷醇
(1S,2S,3R,5S)-(+)-2,3-蒎烷醇
(1S,2S,3R,5S)-(+)-2,3-蒎烷醇
2-巰基-1,3,4-噻唑(MTD)
2-巰基-1,3,4-噻唑(MTD)
鄰苯乙
鄰苯乙
鄰苯乙
基本特性:
(1)組織來源于正常大鼠大動脈組織。
(2)鑒定:肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
(3)原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
(4)每凍存管細胞數(shù):>5×105 cells/1ml。
(5)肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗證。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取