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UCHL5和Usp14活性抑制劑(b-AP15)

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更新時(shí)間:2022-05-07 13:47:12瀏覽次數(shù):439

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
貨號(hào) GOY-01X10676 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研 英文名稱 b-AP15
UCHL5和Usp14活性抑制劑(b-AP15)公司*的產(chǎn)品:CPSA(Human complex edprostate specific antigen) ELISA Kit 人復(fù)合前列腺特異性抗原4-(三氟)芐溴 98%
HSV II -Ab(Human Herpes simplexvirus II antibody) ELISA Kit 人單純皰疹?、蛐涂贵w頻那 97%
Human

詳細(xì)介紹

公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;

②生物膜與細(xì)胞器的研究;

③細(xì)胞骨架體系的研究;

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;

⑧細(xì)胞工程.

產(chǎn)品屬性:

中文名稱:UCHL5和Usp14活性抑制劑(b-AP15)

英文名稱:b-AP15

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

發(fā)貨周期:1~3天

商品介紹:

b-AP15特異性抑制去泛素化酶(deubiquitinating)UCHL5和Usp14活性。

注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

CAS號(hào):1009817-63-3

別名:NSC 687852

純度:98.03%

分子量:419.39

儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

意外片球菌線粒體導(dǎo)肽水解β抗體Anti-ADAM10 Antibody抵抗(Resistin)

匍匐曲霉原變種富含脯蛋白15抗體Anti-ADAM19 Antibody低氧誘導(dǎo)因子3α(HIF-3α)

香菇維生K依賴的蛋白C輕鏈抗體Anti-ADAM15 Antibody低氧誘導(dǎo)因子2(HIF-2)

雪白根霉Anti-ADAM2 Antibody低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)

柯達(dá)酵母屬一種腫瘤抑制基因抗體(C端)Anti-ADAM2 Antibody低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6(LRP-6)

紫杉木齒菌血小板活化因子受體抗體Anti-ADAM28 Antibody低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5(LRP-5)

pet-21a蛋白磷γ1抗體Anti-ADAM8 Antibody低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白4(LRP-4)

立枯絲核菌核苷還原M2B抗體Anti-ADAMTS1 Antibody低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1(LRP-1)

溶血葡萄球菌磷二酯4A抗體Anti-ADAMTS1 Antibody低密度脂蛋白受體(LDLR)

釀酒酵母絲束蛋白T Plastin抗體Anti-ADAM9 Antibody低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)

鏈格孢屬神經(jīng)叢蛋白A2抗體Anti-ADAMTS2 Antibody低密度脂蛋白(LDL)

ATCC 35030網(wǎng)蛋白抗體Anti-ADAMTS2 Antibody低分子質(zhì)量蛋白7/β型蛋白體9(LMP7/PSMB9)

釀酒酵母前列腺腫瘤高表達(dá)蛋白1抗體Anti-ADAMTS13 Antibody低分子肝(LMWH)

球黑孢菌磷化腫瘤抑制基因P53抗體Anti-ADAMTS4 Antibody登革熱抗體IgM(DF-Ab IgM)

盤(pán)長(zhǎng)孢狀盤(pán)孢嘌呤ATP受體抗體Anti-ADAR Antibody登革熱抗體(DF-Ab)

沙漠類(lèi)芽胞桿菌磷化絲裂原活化蛋白激p38抗體Anti-ADH1A Antibody刀豆A(ConA)

盤(pán)長(zhǎng)孢狀刺盤(pán)孢Glomerella│cingulata (Stoneman) Spauld. & H. Schrenk 質(zhì)量規(guī)格:98%,美國(guó)進(jìn)口

麥芽糖假絲酵母Candida│maltosa 質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)分

谷棒桿菌Ⅰ型Corynebacterium│glutamicum Ⅰ 質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)分
UCHL5和Usp14活性抑制劑(b-AP15)金針菇(毛柄、冬菇) 含90ml磷酸鹽緩沖液均質(zhì)袋血清鐵Elisa

枯草芽孢桿 改良CCDA瓊脂平板(9cm)血清總補(bǔ)體Elisa

黃曲霉 甲基烯酸四氫糠基酯血栓A2Elisa

孢小克銀漢霉輪生變種 改良CCDA瓊脂平板(9cm)血栓B2Elisa

糙孢曲霉 BCYE-CYS瓊脂平板(9cm)血栓調(diào)節(jié)蛋白Elisa

假絲酵母屬 甘露卵黃多粘瓊脂平板(9cm)血小板活化因子Elisa

淡紫擬青霉 2-甲基-6-乙基苯(MEA)血小板膜糖蛋白Ⅱb;ⅢaElisa

伯頓絲孢畢赤酵母 改良Skirrow氏瓊脂平板(9cm)血小板衍生生長(zhǎng)因子Elisa

彩色豆馬勃 TSA培養(yǎng)基平板(9cm)血小板衍生生長(zhǎng)因子ABElisa

土曲霉 含青霉TSA培養(yǎng)基平板(7cm)氧化低密度脂蛋白Elisa

枯草芽孢桿 2,6-二異基苯(DIPA)Elisa

柱形胞鏈霉 NA平板(加青霉)(9cm)一氧化氮Elisa

多形布勒擔(dān)子酵母 我妻氏血瓊脂平板(9cm)一氧化氮合成Elisa

多噬伯克霍爾德氏 慶大霉瓊脂平板(9cm)胰島Elisa

米根霉 玫瑰紅鈉瓊脂平板(9cm)胰島樣生長(zhǎng)因子2Elisa

 


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