GSK-3α/β抑制劑(CHIR-99021)公司*的產(chǎn)品：Phospho-TBK1/NAK (Ser172) /FITC 熒光標(biāo)記NF-κB活化激抗體IgGL-胱氨二酯 97%
T7 tag/FITC 熒光標(biāo)記T7 tag標(biāo)簽抗體IgG2-Chlorotrityl Chloride Resin 0.8-1.5mmol/g, 100~200 mesh
T7 tag/HRP 辣根過氧化

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：GSK-3α/β抑制劑(CHIR-99021)

英文名稱：CHIR-99021

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

白僵菌21號染色體開放閱讀框62抗體Human VACM-1(Cullin 5) ELISA Kit人血管緊張1-7(Ang1-7)免疫試劑盒

傳染性喉氣管炎病磷化胞漿型磷脂A2抗體Human TSC2(Tuberous Sclerosis Protein 2) ELISA Kit人血管活性腸肽(VIP)免疫試劑盒

釀酒酵母9號染色體開放閱讀框46抗體Human Rbx2(RNF7) ELISA Kit人血管動(dòng)蛋白(AMOT)免疫試劑盒

矩圓黑盤孢20號染色體開放閱讀框103抗體Human CD72(B-cell differentiation antigen) ELISA Kit人旋毛蟲抗體(Trichinella Ab)免疫試劑盒

硬水黃桿菌9號染色體開放閱讀框86抗體Human anti 21-OH Ab(anti 21-hydroxylase antibody) ELISA Kit人溴脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)免疫試劑盒

中型艾美耳球蟲鈣粘附分子18抗體Human Asprosin ELISA Kit人雄烯二(ASD)免疫試劑盒

平菇CD276抗體Human 8-iso-PGF2α(8-isoprostane) ELISA Kit人雄烯二免疫試劑盒

粘質(zhì)沙雷氏菌21號染色體開放閱讀框25抗體Human anti-EPO antibody(anti-Erythropoietin antibody) ELISA Kit人雄激受體(AR)免疫試劑盒

球孢白僵菌22號染色體開放閱讀框36抗體Human fFN(fetal Fibronectin) ELISA Kit人胸腺依賴性抗原(TD-Ag)免疫試劑盒

假蜜環(huán)菌（亮菌）補(bǔ)體組分1q子成分樣蛋白1抗體Human LIPE(Hormone-sensitive lipase) ELISA Kit人胸腺五肽(TP-5)免疫試劑盒

1B2A3 CD44抗體Human 2, 5-OAS(2, 5-oligoadenylate synthetase) ELISA Kit人胸腺肽β4(Thymosin β4)免疫試劑盒

黃薄芝9號染色體開放閱讀框114抗體Human MDA(Malonyldehyde) ELISA Kit人胸腺肽α1(Thymosin α1)免疫試劑盒

大腸桿菌CD8β鏈（CD8-β）抗體Human IL-12RB1(Interleukin-12 receptor subunit beta-1 78) ELISA Kit人胸腺嘧啶核苷磷化(TP)免疫試劑盒

銅綠假單胞菌(綠膿桿菌)6號染色體開放閱讀框1抗體Human NPTN(Neuroplastin) ELISA Kit人胸腺基質(zhì)淋巴生成(TSLP)免疫試劑盒

考克氏菌γ晶狀體蛋白S/γS-crystallin抗體Human AP12(Apelin 12) ELISA Kit人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)免疫試劑盒

解脂假絲酵母解脂變種9號染色體開放閱讀框72抗體Human HGS(Hepatocyte growth factor-regulated tyrosine kinase substRate) ELISA Kit人胸腺非依賴性抗原(TI-Ag)免疫試劑盒

勞地毛霉Mucor│lausannensis 質(zhì)量規(guī)格：>98%，BREB病衣殼抗原試劑盒4-磺?；蔓}鹽

小孢矛束霉Doratomyces│microsporus 質(zhì)量規(guī)格：>98%，進(jìn)分EB病衣殼抗原試劑盒茴香腦

#膠質(zhì)芽孢桿菌Bacillus│mucilaginosus Avakyan et al 1998 質(zhì)量規(guī)格：>98%(HPLC),BREB病核抗原3A抗體試劑盒高熊果酚苷
GSK-3α/β抑制劑(CHIR-99021)多主葡萄殼 噻吩-3-甲酸乙酯血小板反應(yīng)蛋白2Elisa

耐鹽枝孢 2-甲硫基-4-羥基嘧啶血小板活化因子Elisa

肉桂色鏈霉 2,4,5-三嘧啶血小板膜糖蛋白Ⅱb;ⅢaElisa

土壤彎孢 (±)-降煙堿血小板內(nèi)皮粘附分子1Elisa

維多利亞隱球酵母 碳酸鈷 水合物血小板生成Elisa

假單胞 1,5-二甲基-1H-吡唑-3-甲酸乙酯血小板生成受體Elisa

阪崎腸桿 1,3-二甲基-1H-吡唑-5-甲酸乙酯血小板衍化生長因子BElisa

多分枝毛霉 L-乳酸鈣血小板衍化生長因子BBElisa

角形小孔 抗壞血酸鈣血小板衍生生長因子受體αElisa

枯草芽孢桿 乙酸鎘 二水合物血小板衍生生長因子受體βElisa

海仙屬 2,4-二氧代-4-噻吩-2-基丁酸甲酯血幼Elisa

蟹味菇（白） 4--2-氟苯甲循環(huán)復(fù)合物Elisa

異常威克漢姆酵母 5-溴-2-苯煙堿型乙酰受體Elisa

烏魯木齊奇異球 2-溴-5-氟苯甲還原型輔ⅠElisa

圖畫大洋芽孢桿 5--2-氟苯甲延胡索酸Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)