產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Bcl-xL/Bcl-2/Bcl-w抑制劑
英文名稱:ABT-737
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
英文名稱:ABT-737 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg ABT-737是一種類似BH3的Bcl-xL,Bcl-2和Bcl-w的抑制劑,EC50值分別為78.7nM,30.3nM和197.8nM;ABT-737對Mcl-1,Bcl-B或Bfl-1沒有抑制作用。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:852808-04-9 純度:98.38% 分子量:813.43 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
擬枝孢鐮孢DNA聚合γ/DNA pol γ抗體Human TEFM (Transcription elongation factor, mitochondrial) ELISA KIT人板層相關(guān)多肽2亞型α(TMPO)免疫試劑盒
污黑腐皮殼DNA聚合ι/DNA pol ι抗體Human TP53RK (TP53-regulating kinase) ELISA KIT人瘢痕性天皰瘡抗體(CP)免疫試劑盒
黃硬皮馬勃DNA聚合κ/DNA pol κ抗體Human TANK (TRAF family member-associated NF-kappa-B activator) ELISA KIT人百日咳病抗體(IgM)免疫試劑盒
粘帚霉屬DNA聚合λ/DNA pol λ抗體Human TSKS (Testis-specific serine kinase substrate) ELISA KIT人百日咳病抗體(IgA)免疫試劑盒
雙孢蘑菇DNA聚合μ/DNA pol μ抗體Human TOPORS (E3 ubiquitin-protein ligase Topors) ELISA KIT人白血病抑制因子受體(LIFR)免疫試劑盒
費氏中華根瘤菌周期蛋白3抗體Human ADA(Adenosine deaminase) ELISA Kit人白酯(LE)免疫試劑盒
匿名曲霉DNAJC9蛋白抗體Human ELOVL1(Elongation of very long chain fatty acids protein 1) ELISA Kit人白免疫球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)免疫試劑盒
干草寒冷桿菌DNA甲基轉(zhuǎn)移2抗體Human TBCK (TBC domain-containing protein kinase-like protein) ELISA KIT人白抗原DR(HLA-DR)免疫試劑盒
豬丹絲菌DNA甲基轉(zhuǎn)移3L抗體Human TBKBP1 (TANK-binding kinase 1-binding protein 1) ELISA KIT人白活化黏附因子(ALCAM)免疫試劑盒
卵孢木霉二肽基肽10抗體Human PERP (p53 apoptosis effector related to PMP-22) ELISA KIT人白調(diào)節(jié)(LR)免疫試劑盒
蠟狀芽孢桿菌二肽基肽3抗體Human TSKS (Testis-specific serine kinase substrate) ELISA KIT人白色念珠菌(C.albicans)免疫試劑盒
聚生殼菌DNA復(fù)制相關(guān)元件結(jié)合因子抗體Human TP53RK (TP53-regulating kinase) ELISA KIT人白三烯E4(LTE4)免疫試劑盒
伊平屋橋大洋芽孢桿菌B淋巴轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白DRIL1抗體Human TRAPPC12 (Trafficking protein particle complex subunit 12) ELISA KIT人白三烯D4(LTD4)免疫試劑盒
頂青霉轉(zhuǎn)錄共激活因子130抗體Human TANK (TRAF family member-associated NF-kappa-B activator) ELISA KIT人白三烯C4(LTC4)免疫試劑盒
耐久腸球菌核糖核3/Drosha抗體Human TOX (Thymocyte selection-associated high mobility group box protein TOX) ELISA KIT人白三烯B4(LTB4)免疫試劑盒
豇豆慢生根瘤菌脫氧胸苷激DTYMK抗體Human TRHR (Thyrotropin-releasing hormone receptor) ELISA KIT人白介增強子結(jié)合因子2(ILF2/NF45/PRO3063)免疫試劑盒
毛木耳Auricularia│polytricha 質(zhì)量規(guī)格:三價鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液1000μg/ml羅漢果苷VI
ATCC15491資源名稱: 大腸埃希氏菌 質(zhì)量規(guī)格:500mg/L,溶劑:羅漢果苷IV
馬克斯克魯維酵母Kluyveromyces│marxianus 質(zhì)量規(guī)格:100µg/mL,基體:羅漢果苷III
Bcl-xL/Bcl-2/Bcl-w抑制劑乳桿屬 三(3,5-二叔丁基-4-羥芐基)異脲酸酯α平滑肌肌動蛋白抗體Elisa
絨毛青霉 二甲基十八烷基[3-氧基硅基]化銨番茄紅Elisa
柄桿 5-噻吩-2-磺酰尿Elisa
尖孢鐮刀 BOC-L-絲氨酸甲酯三磷酸腺苷受體Elisa
生癌腸桿 矢車菊半乳糖苷肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移IIElisa
大腸桿 2,4-二-6,7-二甲氧基喹唑啉CD133分子Elisa
白僵 (±)-哌-2-羧酸B瘤-XElisa
土曲霉金色變種 1-芐基哌B瘤-WElisa
地衣芽孢桿 替洛隆雄酮Elisa
嗜鹽動性球 2-溴乙基基溴化銨可溶性補體受體Elisa
三葉草根瘤 4-羥基-8-甲氧基喹啉-3-羧酸乙酯雄甾酮Elisa
木賊鐮孢 1,3-二甲基-5-吡唑酮雌三Elisa
麥根腐平臍蠕孢 2-甲氧基-4-氨基甲酯卵清蛋白Elisa
平菇(南京1號) L-氨基琥珀酸脫氫Elisa
青霉 1-(4,4'-二氟苯甲基)哌轉(zhuǎn)化生長因子β受體1Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)