mTOR抑制劑(Torin 2)公司*的產(chǎn)品：SDA(Human salivary duct autoantibody) ELISA Kit 人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng) BR
MSA(Human mitotic spindle apparatus antibody) ELISA Kit 人抗紡錘體抗體胰化大豆瓊脂 BR
AKA(Human keratin antibody

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱(chēng)：mTOR抑制劑(Torin 2)

英文名稱(chēng)：Torin 2

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

金針菇（毛柄金錢(qián)菌、冬菇）N-乙?；D(zhuǎn)移2抗體Human APOH(Beta-2-glycoprotein 1) ELISA Kit睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CNTF)

宇佐美曲霉富含亮重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體Human FST(Follistatin) ELISA Kit結(jié)核菌(Tuberculin)

熱栗色鏈霉菌孤兒核受體TAK1抗體Human AKT1(RAC-alpha serine/threonine-protein kinase) ELISA Kit結(jié)核菌桿抗體IgM(TB-Ab IgM)

玉米黑粉菌骨巢蛋白抗體Human COL15A1(Collagen alpha-1 XV) ELISA Kit結(jié)核菌桿抗體IgG(TB-Ab IgG)

峨眉山鏈霉菌軸突生長(zhǎng)誘向因子5抗體Human SERPINE1(Plasminogen activator inhibitor 1) ELISA Kit結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)

球孢白僵菌磷化p-IκB-α抗體Human PDGFC(Plaet-derived growth factor C) ELISA Kit結(jié)合珠蛋白(HPT)

枯草芽孢桿菌G21蛋白質(zhì)抗體Human INHA(Inhibin alpha chain) ELISA Kit結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)

暗黃紫鏈霉菌醌氧化還原抗體Human FGF2(Heparin-binding growth factor 2) ELISA Kit結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)

枯草芽孢桿菌神經(jīng)肽Y1受體抗體Human KitLG(Kit ligand) ELISA Kit結(jié)蛋白(Des)

淺紫灰鏈霉菌產(chǎn)色變種谷受體1抗體Human TIE1(Tyrosine-protein kinase receptor Tie-1) ELISA Kit結(jié)腸癌抗原(CCA)

佛羅里達(dá)側(cè)耳谷受體調(diào)節(jié)蛋白2抗體Human TNFSF10(Tumor Necrosis Factor Related Apoptosis Inducing Ligand) ELISA Kit窖蛋白(Cav-1)

溶血 水解1抗體Human CGA(Chromogranin A) ELISA Kit角化生長(zhǎng)因子(KGF)

雅致小克銀漢霉神經(jīng)生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)蛋白抗體Human FTH1(Ferritin heavy chain) ELISA Kit角化內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)

馬爾他布魯氏菌核孔蛋白50抗體Human FTL(Ferritin light chain) ELISA Kit膠轉(zhuǎn)蛋白(TAGLN)

鴨疫里氏桿菌軸索過(guò)度生長(zhǎng)抑制因子-A抗體Human AMH(Muellerian-inhibiting factor) ELISA Kit膠質(zhì)纖維性蛋白(GFAP)

乳糖細(xì)黃鏈霉菌一氧化氮合成-1抗體（神經(jīng)型）Human RORC(Nuclear receptor ROR-gamma) ELISA Kit膠質(zhì)源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)

嗜熱嗜脂肪地芽孢桿菌Geobacillus│stearothermophilus 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)7-15 units/mg,來(lái)源于地衣芽孢桿菌黃楊堿

牛鏈球菌Streptococcus│bovis 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR丁香酚

喜溫硫桿狀菌Acidithiobacillus│caldus 質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品黃芪皂苷III
mTOR抑制劑(Torin 2)麥芽糖假絲酵母 酵母提取物瓊脂乳酸脫氫Elisa

根瘤 鹽生化鑒定管超氧化物歧化Elisa

地衣芽孢桿 cary-blair運(yùn)送培養(yǎng)基（液體）副結(jié)核分支桿Elisa

枯草芽孢桿 溶營(yíng)養(yǎng)肉湯魏氏梭Elisa

古巴栓孔 硫酸錳營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基堿性磷酸Elisa

中溫富鹽 動(dòng)力培養(yǎng)基γ谷氨酰轉(zhuǎn)肽Elisa

油梨苗枯萎 動(dòng)力培養(yǎng)基球蛋白G1Elisa

大腸埃希氏 胰蛋白胨大豆肉湯TSB（1kg）C多肽Elisa

枯草芽孢桿 麥康凱瓊脂培養(yǎng)基二二甲吡啶酚Elisa

節(jié)桿 甘露瓊脂培養(yǎng)基粒巨噬集落激因子Elisa

佛羅里達(dá)側(cè)耳、蠔菇 三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基（TSI）胸腺基質(zhì)生成Elisa

短雙歧桿 麥康凱液體培養(yǎng)基蛋白激AElisa

盤(pán)多毛孢 葡萄糖發(fā)酵管(軍團(tuán))蛋白激CElisa

麥芽糖假絲酵母 乳糖發(fā)酵管（軍團(tuán)）二?；视虴lisa

黃曲霉 實(shí)驗(yàn)用對(duì)照生化管1,4,5-三磷酸肌Elisa