公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:廣譜JNK抑制劑(SP600125)
英文名稱:SP600125
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
英文名稱:SP600125 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg SP600125是一種廣譜JNK抑制劑,作用于JNK1,JNK2和JNK3,IC50分別為40nM,40nM和90nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):129-56-6 純度:98.69% 分子量:220.23 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
巨大芽胞桿菌血小板活化因子CTR9抗體Human USP18(Ubiquitin Specific Peptidase18) ELISA Kit人游離甲狀腺(FT4)免疫試劑盒
炭彎曲嗜菌前列環(huán)合成抗體Human HDAC(Histone deacetylase) ELISA Kit人游離睪(F-TESTO)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌軟骨寡聚基質(zhì)蛋白抗體Human NAG(Neutral alpha-glucosidase) ELISA Kit人游離蛋白S(FP-S)免疫試劑盒
根瘤菌T淋巴CD1A抗體Human SSC5D(Soluble scavenger receptor cysteine-rich domain-containing protein SSC5D) ELISA Kit人游離雌三(FE3)免疫試劑盒
副豬嗜血桿菌磷化周期B1抗體Human DEFB105(Beta-defensin 105) ELISA Kit人游離β絨毛膜促性腺激(f-βhCG)免疫試劑盒
水黏結(jié)桿菌胞漿型磷脂A2抗體Human Foxj1(Forkhead box protein J1) ELISA Kit人幽門螺旋菌抗體(IgA)免疫試劑盒
灰略紅鏈霉菌膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白抗體Human IS(serum indoxyl sulfate) ELISA Kit人幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)免疫試劑盒
細(xì)鏈格孢緊密連接蛋白6抗體Human HOXB7(Homeobox protein Hox-B7) ELISA Kit人幽門螺旋桿菌IgM(Hp-IgM)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌磷化緊密連接蛋白6抗體Human HSPBAP1(HSPB1-associated protein 1) ELISA Kit人硬骨(SOST)免疫試劑盒
藤倉(cāng)赤霉著絲粒蛋白T抗體Human IL-17RA(Interleukin 17 receptor A) ELISA Kit人印度猬因子(IHH) 免疫試劑盒
嗜麥芽黃單胞菌染色體相關(guān)蛋白2抗體Human HDAC6(Histone deacetylase 6) ELISA Kit人隱熱蛋白(NLRP3/C1orf7/CIAS1/NALP3/PYPAF1)免疫試劑盒
羅倫隱球酵母著絲粒蛋白P抗體Human ABCA13(ATP Binding Cassette Transporter A13) ELISA Kit人2,3-雙加氧(IDO)免疫試劑盒
大腸桿菌分裂周期相關(guān)蛋白5抗體Human USP18(Ubiquitin Specific Peptidase18) ELISA Kit人(INDO)自身抗體免疫試劑盒
黑曲霉染色體相關(guān)蛋白2抗體Human CD19(Cluster of Differentiation 19)人音猬因子N端(Shh-N)免疫試劑盒
無(wú)氧芽孢桿菌周期調(diào)控因子10抗體Human HDAC(Histone deacetylase) ELISA Kit人音猬因子(SHH)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌中心體蛋白97kDa抗體Human NAG(Neutral alpha-glucosidase) ELISA Kit人抑制β-B(Inhbb)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRIgγ3鏈C區(qū)試劑盒7-O-基白楊
芽孢桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRICOS配體試劑盒巨大戟
多殺性巴氏桿菌Pasteurella│multocida 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRICE蛋白激活因子試劑盒25-氧基-原人參三
廣譜JNK抑制劑(SP600125)蛾微桿 BOC-D-4-氨酸嗜酸性粒陽(yáng)離子蛋白Elisa
假土曲霉 D-葡萄糖二酸-1,4-內(nèi)酯 一水受體TNFRSF結(jié)合絲氨酸蘇氨酸激1Elisa
里亞氏須腹 雙(頻哪合)二受體酪氨酸激Elisa
美澳型核果褐腐病 2-氨基-5-氟苯受體相互作用蛋白1Elisa
釀酒酵母 3-氨基-5-羥基吡唑瘦Elisa
淡紫擬青霉 N-(2-羧苯基)甘氨酸瘦受體Elisa
球形芽孢桿 2-硝基肉桂酸雙氫睪酮Elisa
哈茨木霉 2-水通道蛋白1Elisa
鐮刀屬 3,5-雙(三氟甲基)苯酸水通道蛋白2Elisa
枯草芽孢桿 奎寧鹽酸鹽二水合物水通道蛋白3Elisa
蠟狀芽孢桿 4-喹啉水通道蛋白4Elisa
露濕擬漆斑 2-乙苯水通道蛋白5Elisa
黃多孔 2,4-二溴死亡受體5Elisa
龜裂鏈霉龜裂亞種 2,5-二溴四氫生物蝶呤Elisa
少根根霉戴爾變種 8-溴-2-甲基喹啉松弛肽;松弛Elisa