公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:ALK4/ALK5抑制劑
英文名稱:EW-7197
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
英文名稱:EW-7197 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg EW-7197是一個(gè)強(qiáng)的,有選擇性的TGF-β receptor ALK4/ALK5抑制劑,IC50值分別是13nM和11nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1352608-82-2 純度:99.12% 分子式:C??H??FN? 分子量:399.42 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
茄鐮孢14號(hào)染色體開放閱讀框94抗體Human SEPHS1 ELISA Kit倉鼠E選擇(SELE)免疫試劑盒
交鏈孢屬四磷鳥苷水解抗體Human BGN(Biglycan) ELISA Kit駱駝
假絲酵母屬人類免疫缺陷病2型/2型艾滋病病gp36抗體Human SERAC1 ELISA Kit駱駝轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)免疫試劑盒
大豆慢生根瘤菌激上調(diào)神經(jīng)腫瘤相關(guān)激抗體Human SERINC2 ELISA Kit駱駝脂蛋白磷脂A2(Lp-PL-A2)免疫試劑盒
雙孢蘑菇β基己糖苷A抗體Human SERINC1 ELISA Kit駱駝天門冬基轉(zhuǎn)移(AST)免疫試劑盒
空腸彎曲桿菌肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白HECW1抗體Human SERF2 ELISA Kit駱駝過氧化氫免疫試劑盒
煙色毛霉3-羥甲雙加氧抗體Human SEMA3C ELISA Kit駱駝過氧化物(GSH-PX)免疫試劑盒
Gillisia limnaea舞蹈癥相關(guān)蛋白40/凝血因子8相關(guān)蛋白/第八因子相關(guān)蛋白抗體Human SELK ELISA Kit駱駝基轉(zhuǎn)移(ALT)免疫試劑盒
大腸埃希菌舞蹈癥相關(guān)相互作用蛋白1/雌激相關(guān)受體樣蛋白1抗體Human SEMA4B ELISA Kit駱駝β內(nèi)啡肽(β-EP)免疫試劑盒
柳巴克利酵母舞蹈癥蛋白相互作用蛋白13抗體Human SEMA3D ELISA Kit裸鼠
德爾布有孢酵母神經(jīng)性舞蹈病蛋白抗體Human SEC5/EXOC2 ELISA Kit裸鼠克拉拉蛋白(CC16)免疫試劑盒
綠針假單胞菌舞蹈癥相關(guān)蛋白1抗體Human SEMA4A ELISA Kit裸鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)免疫試劑盒
黃多孔菌亨廷頓(舞蹈癥)相互作用蛋白1抗體Human SEC61alpha ELISA Kit裸鼠環(huán)加氧2(COX-2)免疫試劑盒
糞腸球菌葡萄糖氧化1抗體Human SDSL ELISA Kit驢
阿孫鏈霉菌轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子HOXD9抗體Human SEC11A ELISA Kit驢孕激/孕(PROG)免疫試劑盒
同絲毛殼羥基酰水解樣蛋白抗體Human SEC13 ELISA Kit驢透明質(zhì)(HA)免疫試劑盒
節(jié)葡萄孢霉屬Gonatobotrys│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品化矢車菊
紅曲霉Monascus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:0.99矢車菊-3-O-葡萄糖苷
大腸埃希氏菌DH5a/pET30a/sigH M.SmegmatisEscherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品左旋肉堿
ALK4/ALK5抑制劑枯草芽胞桿枯草亞種 5-溴-2-羥基煙酸白介1Elisa
櫟小皮傘 咖啡酸苯乙酯白介12Elisa
大腸埃希氏桿 位辛內(nèi)酯皮質(zhì)酮;腎上腺酮Elisa
枯草芽孢桿 硫酸亞鈰(III)八水合物白蛋白Elisa
鍋孢霉 3-(1-萘氨基)磺酸鈉尿氮Elisa
栗酒裂殖酵母 1-羥基四苯基環(huán)戊二烯基(四苯基-2,4-環(huán)戊二烯基-1-酮)-μ-羥基四羰基二釕(II)促腎上腺皮質(zhì)Elisa
耐輻射奇球 化四丁基銨肌酸激Elisa
白僵 比索洛爾富馬酸鹽血管緊張ⅡElisa
釀酒酵母 2-(1-金剛烷基)-4-溴苯甲固酮Elisa
臭曲霉 5--4-氟-2-總蛋白Elisa
冠突曲霉 4-溴-2,6-二氟苯甲血糖Elisa
冷桿 4-溴-2,6-二氟乳酸脫氫Elisa
聚生殼 N-芴甲氧羰基-D-谷氨酸 gamma-叔丁酯成纖維生長因子5Elisa
海洋桿 2-羥基-4-三氟甲基嘧啶小反芻獸疫病抗體Elisa
膜醭畢赤酵母 4-乙酸總抗氧化能力Elisa