商品介紹:
用途: 專(zhuān)門(mén)用于脂肪/脂滴染色 注意事項(xiàng): 主要由油紅O異丙醇飽和液組成,染色后脂滴呈橘紅色。 儲(chǔ)存條件:4℃,12個(gè)月 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):油紅O染色液(培養(yǎng)細(xì)胞專(zhuān)用)
英文名稱(chēng):
產(chǎn)品規(guī)格:4×20ml|4×50ml
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
端羥基外消旋聚乳(重均分子量150-190萬(wàn))英文名稱(chēng): Candesartan cilexetilNOC2家族樣蛋白抗體包裝5g
端羥基外消旋聚乳(重均分子量16-28萬(wàn))英文名稱(chēng): Tamsulosin hydrochloride 硝基酪抗體包裝25mg
端羥基外消旋聚乳(重均分子量190-240萬(wàn))英文名稱(chēng): N-(3-Chloro-ortho-tolyl) anthranilic acid核蛋白p8抗體包裝1g
端羥基外消旋聚乳(重均分子量28-42萬(wàn))英文名稱(chēng): Mecobalamin神經(jīng)內(nèi)分泌特異性蛋白2抗體包裝5g
端羥基外消旋聚乳(重均分子量3-6萬(wàn))英文名稱(chēng): Vincetoxicoside B還原型輔Ⅱ氧化5/煙酰腺嘌呤二核苷磷抗體包裝2g
端羥基外消旋聚乳(重均分子量42-57萬(wàn))英文名稱(chēng): Isosorbide 5-mononitrate核干因子抗體(鳥(niǎo)嘌呤核苷結(jié)合蛋白3)包裝1g
端羥基外消旋聚乳(重均分子量57-73萬(wàn))英文名稱(chēng): Isosorbide 5-mononitrate尼曼匹克C1前體蛋白抗體包裝5g
端羥基外消旋聚乳(重均分子量6-9.5萬(wàn))英文名稱(chēng): Isosorbide 2-nitrate去腎上腺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白/神經(jīng)遞質(zhì)去腎上腺轉(zhuǎn)運(yùn)體抗體包裝100ml
端羥基外消旋聚乳(重均分子量73-109萬(wàn))英文名稱(chēng): XX核孔復(fù)合體蛋白88抗體包裝25ml
端羥基外消旋聚乳(重均分子量9.5-16萬(wàn))英文名稱(chēng): Enalaprilat核仁蛋白8抗體包裝100g
端羥基右旋聚乳(重均分子量0.3-1.5萬(wàn))英文名稱(chēng): Bisoprolol fumarateNCK銜接蛋白2抗體包裝25g
端羥基右旋聚乳(重均分子量1.5-3萬(wàn))英文名稱(chēng): Amlodipine maleate腎小球裂孔膜蛋白PDCN抗體包裝5g
端羥基右旋聚乳(重均分子量102-137萬(wàn))英文名稱(chēng): Amlodipine maleate豆蔻?;D(zhuǎn)移1抗體包裝100ml
端羥基右旋聚乳(重均分子量137-170萬(wàn))英文名稱(chēng): Diflunisal利鈉肽受體A抗體包裝25ml
端羥基右旋聚乳(重均分子量17-26萬(wàn))英文名稱(chēng): Ganoderol B神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白3抗體包裝100g
假單胞菌Pseudomonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品激肽釋放1試劑盒L-;L-Phenylalani
: AS3.4254資源名稱(chēng): 球毛殼霉 質(zhì)量規(guī)格:>99%,用于植物培養(yǎng)激敏感性脂肪試劑盒扁塑藤;pristimerin
棒狀桿菌屬corynebacterium│ 質(zhì)量規(guī)格:>99%激動(dòng)異構(gòu)/分裂MB試劑盒蝙蝠葛新諾林堿;Dauricinolin
油紅O染色液(培養(yǎng)細(xì)胞專(zhuān)用)加利福尼亞擬威爾酵母 3,4-二羥基-5-甲氧基苯甲瓜氨酸Elisa
竹生炭角 2,2-二(4-羥基苯基)丁烷前胰島原Elisa
雪腐微座孢 2-氨基-5-氟三氟甲苯血鈣Elisa
發(fā)酵乳桿 5-溴-2-氟三氟甲苯血磷Elisa
毛地黃殼針孢 1-萘乙α2巨球蛋白Elisa
彎孢 5-氨基-2-溴三氟甲苯鳶尾Elisa
匍匐曲霉原變種 5-溴-7-甲基二氫-2,3-二酮系統(tǒng)性組織蛋白bElisa
金橙黃微小桿 2-氟三氟甲苯β2糖蛋白1Elisa
芽孢桿 5-溴-3-羧酸甲酯β2糖蛋白1IgG抗體Elisa
短波單胞屬 1,3-金剛烷二甲酸胃腸癌標(biāo)志物CA199Elisa
青春雙歧桿 2,4-二氨基苯甲硫酸鹽胰腺癌標(biāo)志物-CA242Elisa
匍枝根霉原變種 4--2-三氟甲基芐腫瘤標(biāo)志物Elisa
枯草芽孢桿 2,4,6-三異基苯磺?;罗D(zhuǎn)硫mu5Elisa
藤黃淺藤黃鏈霉 氨基酮鹽酸鹽還原Elisa
雜色曲霉 N-(2-)鄰苯二甲酰亞血糖Elisa