微管(tubulin)抑制劑(MMAD)公司正在出售的產(chǎn)品：DHAV/FITC 鴨型肝炎A病抗體IgG2,6-二氧苯 98%
DIO2/FITC 熒光標(biāo)記脫2抗體IgG2，5-二羥苯酯 98%
DISC1(CT)/FITC 熒光標(biāo)記DISC1 C端抗體IgG5-氧水楊 98%
DISC1(NT)/FITC 熒光標(biāo)記DISC1 N端抗體IgG6-氧水楊 98%
DJ-1/FITC 熒光標(biāo)記

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

腐皮鐮孢菌小鼠CD19分子Anti-MEGF9 Antibody人血栓B2(TXB2)

果生鏈核盤菌人糖基化依賴的黏附分子Anti-MED27 Antibody人血栓B2(TXB2)

泡盛曲霉大鼠成纖維生長因子10Anti-MED26 Antibody人皮質(zhì)/腎上腺(CORT)

長裙竹蓀兔子纖溶原Anti-MEGF9 Antibody人皮質(zhì)/腎上腺(CORT)

阿班假絲酵母白蛋白(夾心法一步法)Anti-MEGF8 Antibody人前列腺E2(PGE2)

匍枝根霉(黑根霉)抗－HAV IgM(夾心法 一步法)　Anti-MELK Antibody人前列腺E2(PGE2)

靈芝(紅芝, 赤芝)抗－HAV （總）競(jìng)爭(zhēng)法一步法Anti-MEOX2 Antibody人雙氫睪(DHT)

離生青霉抗抗體 IgG(間接法二步法)　Anti-MET Antibody人雙氫睪(DHT)

日本色鹽桿菌抗抗體 IgM(間接法二步法)Anti-Mevalonate Kinase Antibody人促生長激釋放激(GHRH)

侵染鏈格孢大鼠分泌型磷脂A2Anti-MFAP5 Antibody人促生長激釋放激(GHRH)

谷棒桿菌兔骨形成蛋白Anti-MIA Antibody人雌激(E)

季也蒙假絲酵母人干擾調(diào)節(jié)因子Anti-MGST3 Antibody人雌激(E)

乳明串珠菌鯉魚卵黃蛋白原Anti-MGST2 Antibody人孕激/孕(PROG)

尼氏芽孢桿菌小鼠CD3分子Anti-MIA2 Antibody人孕激/孕(PROG)

樹舌4-1魚類促性腺激釋放激Anti-MIA Antibody人超敏游離雌三(uE3)

產(chǎn)二鏈霉菌兔骨保護(hù)Anti-MID1 Antibody人超敏游離雌三(uE3)

神經(jīng)元突觸膜結(jié)合蛋白2抗體凝結(jié)芽胞桿菌人絨癌細(xì)胞

神經(jīng)元突觸膜胞外分泌調(diào)節(jié)蛋白3抗體矢野鞘菌小鼠睪丸畸胎瘤細(xì)胞

神經(jīng)元突觸膜胞外分泌調(diào)節(jié)蛋白4抗體球形芽孢桿菌人甲狀腺癌細(xì)胞C643（干細(xì)胞庫保藏）

環(huán)指蛋白39抗體嗜麥芽糖寡養(yǎng)單胞菌人甲狀腺癌細(xì)胞CAL-62（干細(xì)胞庫保藏）
微管(tubulin)抑制劑(MMAD)細(xì)孢毛霉 5,7,4'-Tri-O-methylaromadendrin

暗孢小克銀漢霉 5,6,7,8-四甲氧基

淺灰白鏈霉 4β-Carboxy-19-nortotarol

桑葉盤孢 4-Oxobedfordiaic acid

木蘭假絲酵母 4'-O-Methyltaxifolin

傳染性支氣管炎病 4-O-沒食子酰巖白菜

異常漢遜酵母 4,9-Dihydroxy-alpha-lapachone

香菇 4',7-Di-O-methylnaringenin

根瘤屬 4-(3,4-二甲氧基苯基)-T-3-烯-1-

金黃1號(hào)(金針菇) 3β-Hydroxyurs-11-en-28,13-olide

白干皮孔 3-Isomangostin hydrate

土生叢毛單胞 3-Prenyl-2,4,6-trihydroxybenzoph

腸炎沙門氏 3-O-Methylducheside A

需鈉弧 3-O-Caffeoyloleanolic acid

罕見沃特斯氏 3''-O-甲基香豌豆苷元