蘇丹Ⅲ染色液公司*的產(chǎn)品：GRP75/FITC 熒光標(biāo)記G蛋白偶聯(lián)受體75抗體IgG檸檬黃 >95%(HPLC)
GRP78/FITC 熒光標(biāo)記葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78抗體IgG三丁酯 AR，99%
GRP94 (gp96)/FITC 熒光標(biāo)記葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白94抗體IgG三丁酯 CP
GsaR/FITC 熒光標(biāo)記促胃泌受體抗體IgG三丁酯 standard for GC，>99.5%
G

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：蘇丹Ⅲ染色液

英文名稱：

產(chǎn)品規(guī)格：3×50ml

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

紫蓳靈（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： tribendimidine活化T核因子1蛋白抗體包裝1g

紫荊皮（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Jionoside B1谷受體1抗體包裝5g

紫萁（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： N6022神經(jīng)元抑制蛋白抗體包裝100g

紫色姜（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Balsalazide神經(jīng)發(fā)育相關(guān)調(diào)控蛋白抗體包裝25g

紫杉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Epalrestat 核因子κB抑制蛋白α抗體(IκB-α)包裝25g

紫蘇梗（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Olsalazine disodium磷化核因子NF-κB p65抗體包裝5g

紫蘇（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Olsalazine disodium磷化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體包裝1g

紫蘇烯英文名稱： Pioditazone hydrochloride磷化一氧化氮合成3（內(nèi)皮型）抗體包裝250mg

紫蘇葉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Doxifluridine/5-Fluoro-5′-deoxyuridine核酪蛋白激和周期蛋白依賴性激底物1抗體包裝5g

紫蘇子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： IopromideNIFK蛋白抗體包裝100g

紫檀芪（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： TRISTEARIN磷化NIFK抗體包裝500g

紫檀香（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Tizanidine hydrochloride核轉(zhuǎn)錄因子X盒結(jié)合蛋白1抗體包裝1g

紫菀（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Tubastatin A Hydrochloride膜磷脂轉(zhuǎn)移蛋白1抗體包裝25g

紫菀(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Moxonidine hydrochloride神經(jīng)降壓受體1抗體包裝5g

紫云英苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Propiverine hydrochloride神經(jīng)降壓受體2抗體包裝25g

地生隱球酵母Cryptococcus│terreus 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品激肽釋放8試劑盒胞嘧啶;Cytosine

那波鏈霉菌Streptomyces│narbonesis 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR激肽釋放7試劑盒D(+)-半乳糖;D-Galactose

戴爾根霉Rhizopus│delemar 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,一合物激肽釋放6試劑盒7-表-10-去乙?；仙?Deace
蘇丹Ⅲ染色液鉆特省芽孢桿 2--5-吡啶乙膜結(jié)合HLA-G亞型Elisa

EC600* 4-氨基-3-三氟甲苯膜結(jié)合HLA-E亞型Elisa

塔賓曲霉 1-苯基環(huán)戊烷羧酸胰高血糖樣肽Elisa

巴氏醋桿 2-氨基-4-羥基-6-甲基嘧啶四氫Elisa

巴氏生孢八疊球 3-基-4-氟苯酸頻吶酯亞甲基四氫還原抗體Elisa

根瘤 N-Boc-溴乙胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子Elisa

嗜冷桿 (S)-芐基丁二酸糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白Elisa

紫晶臘蘑 2-基-4-氟苯甲半乳糖苷Elisa

淡紫擬青霉 1-叔丁基-4-苯葡萄糖苷Elisa

微管螺旋鏈霉 5-氟-2-阿拉伯糖苷Elisa

仰光鏈霉 2-乙?；?1-乙基吡咯單氧化AElisa

鐮刀屬 鄰氟甲酯1,4,5-三磷酸肌Elisa

鴨疫里氏桿 2-溴-6-仙臺(tái)病Elisa

粘質(zhì)沙雷氏 2--4-溴前白蛋白Elisa

塔里木類芽孢桿 4-氨基-2-甘膽酸Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)