商品介紹:
CI-994(Tacedinaline)是組蛋白脫乙酰酶(HDAC)的抑制劑,抑制重組HDAC1,2and3的IC50值分別為0.9,0.9,1.2μM. 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):112522-64-2 別名:Acetyldinaline;Tacedinaline;PD 123654;Goe 5549 純度:99.08% 分子量:269.3 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:HDAC抑制劑(CI-994)
英文名稱:CI-994
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
細(xì)枝孢磷化中心粒蛋白Nudel抗體Human CASP3(Caspase-3) ELISA Kit晶體蛋白β(Cryβ)
嗜中溫寒冷桿菌類固脫氫樣蛋白NSDHL抗體Human CYCS(Cytochrome c) ELISA Kit晶體蛋白α(Cryα)
弓形蟲(chóng)(NT株)磷化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體Human APOA1(Apolipoprotein A-I) ELISA Kit緊密連接蛋白1(ZO1)
運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌磷化1型神經(jīng)纖維瘤抗體Human NOS1/nNOS(Nitric oxide synthase, brain) ELISA Kit金屬肽含血小板反應(yīng)蛋白1(ADAMTS1)
短短芽孢桿菌磷化谷受體2B抗體Human APOC1(Apolipoprotein C-I) ELISA Kit金屬硫蛋白2(MT-2)
根瘤菌磷化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體Human PDGFB(Plaet-derived growth factor subunit B) ELISA Kit金屬硫蛋白2(MT2)
漢遜德巴利酵母磷化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體Human APCS(Serum amyloid P-component) ELISA Kit金屬硫蛋白(MT)
根瘤菌磷化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體Human CASP1(Caspase-1) ELISA Kit金葡菌腸(SE)
銀灰口蘑磷化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體Human CDH5(Cadherin-5) ELISA Kit解整合樣金屬蛋白9(ADAM9)
亮白曲霉磷化IKB α抗體Human IFNW1(Interferon omega-1) ELISA Kit解整合樣金屬蛋白8(ADAM8)
磷化IKB alpha抗體Human DLK-1(Protein delta homolog 1) ELISA Kit解整合樣金屬蛋白33(ADAM33)
毛頭鬼傘(雞腿菇)磷化核因子活化T胞漿蛋白2抗體Human SOST(Sclerostin) ELISA Kit解整合樣金屬蛋白19(ADAM19)
枯草芽孢桿菌還原型輔Ⅱ氧化5/煙酰腺嘌呤二核苷磷抗體Human PYY(Peptide YY) ELISA Kit解整合樣金屬蛋白15(ADAM15)
楊葉點(diǎn)霉增殖相關(guān)蛋白NANOS2抗體Human ANGPTL3(Angiopoietin-related protein 3) ELISA Kit解整合樣金屬蛋白12(ADAM12)
枯草芽孢桿菌核因子/k基因結(jié)合核因子 p52/p100抗體Human ACO1(Aconitase 1) ELISA Kit解整合樣金屬蛋白10(ADAM10)
露濕漆斑菌磷化核因子/k基因結(jié)合核因子p100抗體Human AOC3(Membrane primary amine oxidase) ELISA Kit解脲脲原體抗體(UU-Ab)
南方鹽單胞菌Halomonas│meridiana 質(zhì)量規(guī)格:1500USP u/mg,豬源絡(luò)塞維
出芽短梗霉=出芽茁霉(黑酵母)Aspergillus│pullulans 質(zhì)量規(guī)格:95%,美國(guó)進(jìn)口原裝絡(luò)塞琳
粘質(zhì)沙雷菌Serratia│marcescens 質(zhì)量規(guī)格:>45 U/mg,進(jìn)分紅景天苷
HDAC抑制劑(CI-994)扣囊復(fù)膜孢酵母 麥芽浸粉膽囊收縮Elisa
皺曲毛殼 4-乙酰氨基環(huán)己酮胰高血糖樣肽1Elisa
食木薯乳桿 3-氨基-4-甲酰基吡唑半硫酸鹽乙酰CoA羧化Elisa
柱狀田頭菇(茶樹(shù)菇、楊樹(shù)菇) 1,2-亞甲二氧基苯脂蛋白脂Elisa
尖孢鐮孢 含225ml堿性蛋白胨水均質(zhì)袋胃泌Elisa
費(fèi)比恩畢赤酵母 1,10-菲啰啉-5,6-二酮胰島生長(zhǎng)因子Elisa
解脂亞羅酵母 堿性蛋白胨水管(10ml)胰高血糖樣肽Elisa
釀酒酵母 哥倫比亞CNA血瓊脂狀腺原氨酸Elisa
巴氏微桿 (S)-1-(4-基)乙α半乳糖基抗原Elisa
暗色環(huán)紋炭團(tuán) 含225ml蒸餾水均質(zhì)袋α半乳糖抗原Elisa
origami 2(DE3) 7-氮雜α-乳白蛋白Elisa
印度洋兩面神 [雙(三氟乙酰氧基)]苯還原型Elisa
金色鏈霉 3,5-雙(三氟甲基)苯甲氧化型Elisa
地衣形芽孢桿 羥基(甲苯磺酰氧代)苯促甲狀腺Elisa
茄鏈格孢 胰蛋白胨超氧化物歧化Elisa