商品介紹:
英文名稱:ETC-159 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg ETC-159是有效的PORCN抑制劑。抑制β-catenin報(bào)告基因活性的IC50值為2.9nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1638250-96-0 別名:ETC-1922159 純度:98.39% 分子式:C??H??N?O? 分子量:391.38 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
PORCN抑制劑(ETC-159) | ETC-159 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
血紅擬革蓋菌肝生長(zhǎng)因子激活物抑制劑抗體Human SERPINI2 ELISA Kit倉(cāng)鼠甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)免疫試劑盒
高溫金針菇HA tag標(biāo)簽單克抗體Human BIRC2(Baculoviral IAP repeat-containing protein 2) ELISA Kit倉(cāng)鼠低密度脂蛋白(VLDL)免疫試劑盒
紡織品 纖維含量(棉與莫代爾纖維)血紅抗體Human SETD1B ELISA Kit倉(cāng)鼠基質(zhì)金屬蛋白9/明膠B(MMP-9/Gelatinase B) 免疫試劑盒
黃曲霉戊型肝炎病抗體Human SERPINB8 ELISA Kit倉(cāng)鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)免疫試劑盒
釀酒酵母神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1抗體Human SERPINB9 ELISA Kit倉(cāng)鼠核因子κB(NF-κB)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌神經(jīng)膠質(zhì)生長(zhǎng)因子/神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白β抗體Human SERPIND1(Serpin family D member 1) ELISA Kit倉(cāng)鼠過(guò)氧化物3(GPX3)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌組三聚體核苷結(jié)合蛋白1抗體Human BIRC2(Baculoviral IAP repeat-containing protein 2) ELISA Kit倉(cāng)鼠促卵泡(FSH)免疫試劑盒
發(fā)酵乳桿菌(現(xiàn)貨)組蛋白去乙酰化3抗體Human SERPINI2 ELISA Kit倉(cāng)鼠二(MDA)免疫試劑盒
單核增生利斯特菌高度發(fā)散同源異型盒蛋白抗體Human SERINC1 ELISA Kit倉(cāng)鼠白介8(IL-8/CXCL8)免疫試劑盒
宇佐美曲霉腺病六鄰體蛋白抗體Human SERINC2 ELISA Kit倉(cāng)鼠白介6(IL-6)免疫試劑盒
龜裂鏈霉菌高密度脂蛋白結(jié)合蛋白抗體Human SERF2 ELISA Kit倉(cāng)鼠白介3(IL-3)免疫試劑盒
多源中間根瘤菌轉(zhuǎn)錄因子HNF-3α抗體Human SENP1 ELISA Kit倉(cāng)鼠白介2(IL-2)免疫試劑盒
釀酒酵母熱休克蛋白β7抗體Human GAL(Galanin peptides) ELISA Kit倉(cāng)鼠白介1β(IL-1β)免疫試劑盒
微球菌E3連接抑制受體2抗體Human SENP3 ELISA Kit倉(cāng)鼠白介1α(IL-1α)免疫試劑盒
芽孢桿菌透明質(zhì)及粘蛋白3抗體Human SENP5 ELISA Kit倉(cāng)鼠γ干擾(IFNG)免疫試劑盒
臭曲霉22號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框28抗體Human CFP(Properdin) ELISA Kit倉(cāng)鼠N端前腦鈉(NT-proBNP)免疫試劑盒
膠孢Glomerella│cingulata (Stoneman) Spauld. & H. Schrenk 質(zhì)量規(guī)格:0.99異鼠李-3-O-新橙皮苷
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.6%亥茅酚苷
: 43948資源名稱: 分枝桿菌 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品5-羥色
PORCN抑制劑(ETC-159)松杉靈芝 3-十二烷基噻吩5羥基乙酸Elisa
葡萄座腔 十四烷基基硫酸氫銨5羥色Elisa
釀酒酵母 硫酸銠溶液低氧誘導(dǎo)因子-2αElisa
爪哇鏈霉 過(guò)酸鈉四水合物葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2Elisa
矩圓黑盤孢 2-溴化茚游離脂肪酸Elisa
sto128(大球蓋菇) 2-氨基-3-吡啶β羥丁酸Elisa
灰藍(lán)毛霉 二氫乙錠熱休克蛋白27Elisa
污水溶桿 異辛乳酸脫氫Elisa
深紅酵母 BOC-D-谷氨酸5-叔丁酯血管性血友病因子Elisa
煙曲霉 喹吖啶酮?jiǎng)偣鲅獰酙gG抗體Elisa
黑曲霉 桃肺炎支原體抗體Elisa
腸沙門氏腸亞種嬰兒血清型 偶氮二羰基二嗎啉絲狀支原體抗體Elisa
黑曲霉 甲酸肉桂酯降鈣Elisa
根瘤屬 (R)-(-)-1-甲基-3-羥基吡咯烷甲狀旁腺Elisa
克魯斯假絲酵母 (S)-(+)-1-甲基-3-羥基吡咯烷維生DElisa