公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:泛Ras抑制劑(泛RAS-IN-1)
英文名稱:泛RAS-IN-1
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
泛RAS-IN-1是一種泛Ras抑制劑,破壞Ras蛋白及其作用子的相互作用。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1835283-94-7 純度:98.0% 分子量:717.65 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
平臍蠕孢菌血管緊張1轉(zhuǎn)換抑制劑(抗原)Anti-AJUBA Antibody半乳糖凝集7B(GAL7B)
球形阜孢ACINUS 多肽抗原Anti-AK5 Antibody半乳糖凝集7(GAL7)
谷棒桿菌小鼠IgAAnti-AKAP11 Antibody半乳糖激2(GALK2)
匍枝根霉原變種(可訂購(gòu))促腎上腺皮質(zhì)激(7-23)(抗原)Anti-AK6 Antibody半乳糖激1(GALK1)
枯草芽孢桿菌肌動(dòng)蛋白(抗原)Anti-AKAP1 Antibody半乳糖苷β(GLβ)
枯草芽孢桿菌人血清白蛋白標(biāo)記生物Anti-AKAP14 Antibody半乳糖苷α(GLα)
棕褐橙鏈霉菌粒-巨噬集落激因子3抗原Anti-AKAP17A Antibody半乳糖變旋(GALM)
銀色鏈霉菌肺表面活性蛋白B抗原Anti-AKAP13 Antibody半乳糖-3-O-磺基轉(zhuǎn)移4(GAL3ST4)
韓國(guó)游動(dòng)微菌陽(yáng)離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1Anti-AKAP5 Antibody半乳糖-3-O-磺基轉(zhuǎn)移3(GAL3ST3)
克里布所島津氏菌基質(zhì)金屬蛋白-9(抗原)Anti-AKIP1 Antibody半乳糖-3-O-磺基轉(zhuǎn)移2(GAL3ST2)
黑曲霉晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體(抗原)Anti-AKIP1 Antibody半乳糖-3-O-磺基轉(zhuǎn)移1(GAL3ST1)
地芽孢桿菌屬14-3-3 蛋白(多肽抗原)Anti-AKR1C8P Antibody半乳凝8(GAL8)
棉毛狀嗜熱霉植物14-3-3蛋白抗原Anti-AKR1C8P Antibody半乳凝4(GAL4)
栗色針孔菌FRA-1多肽蛋白Anti-AKR1E2 Antibody半乳凝2(GAL2)
毛柄金錢菌(金針菇)調(diào)亡誘導(dǎo)因子(多肽片斷抗原)Anti-AKT1 Antibody半乳凝14(GAL14)
抗輻射不動(dòng)桿菌腺苷激-1Anti-ALB Antibody半乳凝12(GAL12)
孕激受體βMPRβ抗體Pseudozymaantarctica大鼠內(nèi)臟脂肪組織提取物
前列腺F2a受體抗體PGF2αR新生隱球菌大鼠胎兒表皮組織提取物
神經(jīng)叢蛋白B3抗體東方伊薩酵母大鼠皮下脂肪組織提取物
絲/蘇蛋白激PCTK2抗體季也蒙念珠菌大鼠表皮組織提取物
泛Ras抑制劑(泛RAS-IN-1)釀酒酵母 Borapetoside F
賴氨酸芽胞桿屬 Borapetoside E
紫色團(tuán)胞鏈霉 雷醌內(nèi)酯酮
蘋果鏈格孢 Triptohypol F
假單胞 Teuclatriol
楊氏檸檬酸桿 Tetrahydroxysqualene
冷域黃桿 紫杉 B
肉桂鏈霉 圓葉腫柄菊 F
毛頭鬼傘 豆甾烷-3,6-二
貝倫格勒座腔梨?;?/span> 豆甾-4, 22 -二烯– 3 - 酮
球黑孢 Stigmasta-4,22,25-trien-3-one
斜臥青霉 繡線菊內(nèi)醋 B
糞產(chǎn)堿糞亞種 Songoroside A
克魯維酵母 Sideroxylonal A
亮白曲霉 Shizukanolide C