商品介紹:
Nilotinib(AMN-107)是Bcr-Abl抑制劑,IC50低于30nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):923288-90-8 別名:AMN107 純度:99.91% 分子量:583.99 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Bcr-Abl抑制劑(Nilotinib)
英文名稱:Nilotinib monohydrochloride monohydrate
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|25mg|50mg|100mg|200mg|500mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
皺膜假絲酵母高遷移率族蛋白A1抗原Anti-COL5A2 Antibody人表皮生長(zhǎng)因子(EGF)
泰安羧用桿菌高遷移率族蛋白A2抗原Anti-COL5A3 Antibody人表皮生長(zhǎng)因子(EGF)
長(zhǎng)雙歧桿菌血紅氧合-1/熱休克蛋白-32抗原Anti-COL6A3 Antibody人堿性成纖維生長(zhǎng)因子(bFGF)
玫瑰色熱微菌血紅氧合-1/熱休克蛋白-32抗原Anti-COL6A2 Antibody人堿性成纖維生長(zhǎng)因子(bFGF)
球毛殼血紅氧合-2抗原Anti-COL9A1 Antibody人巨噬炎性蛋白5(MIP-5)
Roseivivax isoporae異染色質(zhì)蛋白1(磷化多肽)Anti-COL9A3 Antibody人巨噬炎性蛋白5(MIP-5)
蠟蚧菌異染色質(zhì)蛋白1(磷化多肽)Anti-COP1 Antibody人可溶性E選擇(sE-selectin)
乳乳球菌乳亞種人類狀瘤病18E6Anti-Collagen XII alpha1 Antibody人可溶性E選擇(sE-selectin)
貝倫格葡萄座腔菌人類狀瘤病16抗原Anti-COLQ Antibody人可溶性間粘附分子1(sICAM-1)
三葉草根瘤菌結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白抗原Anti-COPS6 Antibody人可溶性間粘附分子1(sICAM-1)
堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌原癌基因H-ras抗原Anti-COPZ1 Antibody人間粘附分子2(ICAM-2/CD102)
破傷風(fēng)梭菌熱休克轉(zhuǎn)錄因子2抗原Anti-COQ8B Antibody人間粘附分子2(ICAM-2/CD102)
纖細(xì)芽孢桿菌HRAS樣抑制因子3抗原Anti-COQ8A Antibody人間粘附分子3(ICAM-3/CD50)
桃色歐文氏菌熱休克蛋白-47抗原Anti-COQ8B Antibody人間粘附分子3(ICAM-3/CD50)
大腸埃希菌熱休克蛋白90α抗體Anti-CORO1A Antibody人結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)
葡萄穗霉熱休克蛋白HSP105抗原Anti-COX10 Antibody人結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)
G蛋白偶聯(lián)受體p2y6抗體乙型溶血性鏈球菌大鼠脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元瘤細(xì)胞
前列腺特異性G蛋白偶聯(lián)受體/嗅覺(jué)受體51E2抗體奇異變形桿菌小鼠子宮頸癌細(xì)胞
過(guò)氧化物體生成蛋白5相關(guān)蛋白抗體鼠傷寒沙門(mén)氏菌小鼠睪丸畸胎瘤細(xì)胞
突觸富含脯膜蛋白7抗體金黃色葡萄球菌人睪丸精原細(xì)胞瘤細(xì)胞
Bcr-Abl抑制劑(Nilotinib)越南芽孢桿 丹參酮IIB
小孢根霉華變種 Syzalterin
海洋南海所 Stilbostemin B
寡雄腐霉 Schleicheol 1
乳酸乳球乳亞種 Sanggenol P
鏈霉 全草含茜草萜酸
串珠鐮孢* 葉含乙酰癭花香茶菜 A
大腸埃希氏桿 Robtein
扣囊復(fù)膜孢酵母 Pedicin
黑曲霉 Paeoniflorigenone
金針菇B 諾多星
黃絮鱗鵝膏 Neolitsine
酮丁梭 Mulberrofuran H
球毛殼 馬尾松樹(shù)脂
枯草芽孢桿 Marmin acetonide