HCV NS3/4a蛋白酶抑制劑（MK-5172）公司*的產(chǎn)品：Anti-IL-31/FITC 熒光素標(biāo)記白細(xì)胞介素31抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-TGF- Beta1/RBITC 紅色熒光素羅丹明標(biāo)記TGF-β1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Anne

產(chǎn)品屬性：

中文名稱(chēng)：HCV NS3/4a蛋白酶抑制劑（MK-5172）

英文名稱(chēng)：MK-5172 hydrate

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|1mg|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

馬尿泡（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： ALLYL-BETA-D-GALACTOPYRANOSIDEMyc基因相關(guān)X因子抗體包裝25mg

馬錢(qián)苷；馬錢(qián)子苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： 2-Aminocyclohexanol  凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1抗體包裝1g

馬錢(qián)苷(標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Y27632NFKB激活蛋白1抗體包裝250mg

馬錢(qián)子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Ganoderic acid A磷化Myc基因相關(guān)X因子抗體包裝25g

螞蟻(棕褐蟻)（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Daurisoline亞基四氫葉還原MTHFR抗體包裝5g

買(mǎi)麻藤(小葉買(mǎi)麻藤）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： 1-(Bromomethyl)naphthaleneMEK1/MAPKK1抗體(N-端)包裝1g

麥冬（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： (R)-(-)-1,1'-Binaphthyl-2,2'-diyl hydrogenphosphate褪黑受體1B抗體包裝1g

麥冬苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基（1→2）-β-...英文名稱(chēng)： 2,6-Dichloropurine多藥耐藥相關(guān)蛋白4抗體包裝5g

麥冬內(nèi)酯A英文名稱(chēng)： 2,4-Dichloroquinazoline多藥耐藥相關(guān)蛋白5抗體包裝1g

麥冬皂苷D英文名稱(chēng)： 9-(Chloromethyl)anthracene線粒體內(nèi)膜蛋白抗體包裝1g

麥冬皂苷D(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： Ethyl ferulate基質(zhì)金屬蛋白-8/膠原2抗體包裝1g

麥冬皂苷D（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： CAPS基質(zhì)金屬蛋白11抗體包裝250mg

麥角甾；麥角固(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： Crotonoside基質(zhì)金屬蛋白-12抗體包裝25g

麥芽（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Brazilin基質(zhì)金屬蛋白-15抗體包裝5g

滿(mǎn)山白（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Sarsasapogenin基質(zhì)金屬蛋白-16抗體包裝100g

涅斯特連科氏菌Nesterenkonia│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%抗可提取核抗原抗體試劑盒1,5-O-二咖啡?？鼘?Cynari

高氏鏈霉菌Streptomyces│goshikiensis 質(zhì)量規(guī)格：>98%抗可溶性肝抗原抗體試劑盒1，8-二羥基蒽醌;1,8-Dihydr

大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：BS抗菌肽LL-37 ELISA Kit二氫丹參Ⅰ;Dihydrotanshi
HCV NS3/4a蛋白酶抑制劑（MK-5172）整合相關(guān)蛋白CD47舒尼替尼 Clotrimazole

磷化角蛋白8抗體順鉑 Colchlcine

鈣結(jié)合蛋白D28K抗體司莫司汀 Colchlcine

磷化接頭蛋白CrkL抗體他克莫司 Colistin Sulphate

磷化接頭蛋白CrkL抗體他米巴羅汀 Colistin Sulphate

促上腺皮質(zhì)釋放激受體1抗體坦度替尼;MLN518 Eflornithine HCl

磷化絲切蛋白抗體坦西莫司， 西羅莫司脂化物 Cromolyn sodium

皮層肌動(dòng)蛋白抗體替拉替尼 Cromolyn sodium

促上腺皮質(zhì)釋放激受體2抗體替莫唑 Cyclosporine A 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)