商品介紹:
R788鈉鹽水合物(Fostamatinib)是R406的原藥,為Syk抑制劑,IC50為41nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):914295-16-2 別名:Fostamatinib disodium hexahydrate 純度:98.87% 分子量:732.51 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
Atopobium vaginae 磷化腎上腺能受體β2/β2-AR抗體Human LAYN ELISA Kit豬鈣/鈣調(diào)依賴性蛋白激2β(CAMK2B/CAM2/CAMKB)免疫試劑盒
釀酒酵母載脂蛋白D抗體Human LBR ELISA Kit豬鈣/鈣調(diào)依賴性蛋白激2α(CAMK2A/CAMKA/KIAA0968)免疫試劑盒
黃青霉敏感離子通道1抗體Human LAYN ELISA Kit豬脯羥化(PHD)免疫試劑盒
齒孢青霉雙鏈RNA腺苷脫基抗體(C端)Human LCA5 ELISA Kit豬分泌型免疫球蛋白A(sIgA)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗體Human LCE1A ELISA Kit豬肺炎支原體抗體(MP-Ab)免疫試劑盒
釀酒酵母腺苷環(huán)化1抗體Human LAX1 ELISA Kit豬肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)免疫試劑盒
玫瑰小雙孢菌玫瑰亞種腺瘤樣息肉抗體Human LCE1A ELISA Kit豬肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)免疫試劑盒
彩色豆馬勃溶血磷脂?;D(zhuǎn)移抗體Human LCK ELISA Kit豬肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)免疫試劑盒
新疆薄層菌錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體Human LCA5 ELISA Kit豬二氧化(DAO)免疫試劑盒
異常海桿狀菌磷化間變型淋巴瘤激抗體Human LBR ELISA Kit豬兒茶酚(CA)免疫試劑盒
異常畢赤酵母酰基脫氫很長(zhǎng)鏈抗體Human LCE1B ELISA Kit豬多肽YY(PYY)免疫試劑盒
海膽橙色小單孢菌信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)銜接結(jié)合蛋白抗體Human LARS ELISA Kit豬多巴(DA)免疫試劑盒
運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌錨蛋白重復(fù)序列-因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族3抗體Human LARS2 ELISA Kit豬端粒(TE)免疫試劑盒
CCTCC AB 2012479有絲分裂激B抗體Human LARS ELISA Kit豬凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)免疫試劑盒
熱帶假絲酵母磷化Ack1抗體Human LAS1L ELISA Kit豬淀粉樣前體蛋白(βAPP)免疫試劑盒
牛邊緣無(wú)漿體(鎮(zhèn)原株)磷化Ack1抗體Human LARS2 ELISA Kit豬低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)免疫試劑盒
曲霉Aspergillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR補(bǔ)體1q試劑盒乙?;邹继J
簡(jiǎn)單芽孢桿菌Bacillus│simplex 質(zhì)量規(guī)格:BR玻連蛋白試劑盒茵芋苷
樹(shù)舌5-1Ganoderma│applanatum (Pers.) Pat. 質(zhì)量規(guī)格:>98% (HPLC),BC波形蛋白試劑盒亞油酯
Syk抑制劑(R788 disodium hexahydrate)柯諾辛(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lup-20(29)-en-28-oic acid, 3-[β-D-glucopyranosyl(1→4)[a-L-rhamnopyranosyl) (1→2)-a -L-arabinopyranosyl]oxy], (3β,4a)-)層粘連蛋白受體1抗體(C端)包裝100g
柯伊利-7-O-葡萄糖苷,野決明苷英文名稱: Hederagenin 3-O-α-L-rhamnopyranosyl(1→2)-(β-D-glucopyranosyl(1→4))-α-L-arabinopyranoside層粘連蛋白受體1抗體(N端)包裝25g
科羅索(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: GDC-0994磷化增強(qiáng)因子-1抗體包裝1g
榼藤子仁(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Nitrilotriacetic acid層粘連相關(guān)多肽蛋白1抗體包裝25g
(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ganoderic acid I淺表層粘膜蛋白多糖抗體包裝5g
客西茄堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cussosaponin C調(diào)控胚胎干分化蛋白Lhx2抗體包裝1g
苦菜子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hederacoside CLRRC2蛋白抗體包裝5g
苦參(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hederacolchiside E神經(jīng)突觸蛋白NGL3抗體包裝100ml
苦參I英文名稱: V致盲基因LCA5樣蛋白抗體包裝25ml
(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: V致盲基因LCA5蛋白抗體包裝1g
苦參英文名稱: V轉(zhuǎn)錄因子LHX6抗體包裝25g
苦參新A英文名稱: D-Fructose-6-phosphate disodiuM salt磷化腫瘤抑制基因LATS1/LATS2抗體包裝5g
苦參新F英文名稱: Pulchinenoside B轉(zhuǎn)錄因子LBX1抗體包裝1g
苦地?。?biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: V神經(jīng)特異性轉(zhuǎn)錄因子LDB1抗體包裝25g
苦鬼臼英文名稱: Mogroside IVa 白化學(xué)吸引2抗體包裝5g