Ro31-8220甲磺酸鹽是廣譜PKC抑制劑公司*的產(chǎn)品：KLK 6(Human Kallikrein 6) ELISA Kit 人激肽釋放6Boc-3-(2-萘)-D-氨 99%
FDA(Human Fructose-1,6-bisphosphate aldolase) ELISA Kit 人果糖1,6二縮BOC-N--D-氨 98%
cath-D(Human cathepsin D)

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱(chēng)：Ro31-8220甲磺酸鹽是廣譜PKC抑制劑

英文名稱(chēng)：Ro 31-8220 mesylate

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

哈茨木霉青霉G抗體Anti-CCKBR AntibodyGTP活化蛋白(GAP)

松鼠葡萄球菌松鼠亞種磷酯Cβ1抗體Anti-CCL1 AntibodyGTPNRas(NRAS)

紅色紅曲霉富含脯/絲卷曲螺旋蛋白1抗體Anti-CCL1 AntibodyGremlin-1蛋白(GREM1)

根瘤菌NADPH氧化活化蛋白p47抗體Anti-CCL11 AntibodyGDP解離抑制因子2(GdI2)

大豆慢生根瘤菌蛋白體PRS7抗體Anti-CCL11 AntibodyG1/S特異性周期蛋白E1(CCNE1)

黑腐皮殼菌蛋白體PSMα1抗體Anti-CCL11 AntibodyF-肌動(dòng)蛋白(F-actin)

中華根瘤菌蛋白體PSMα2抗體Anti-CCL11 AntibodyFOS 樣抗原2(FOSL2)

解淀粉芽孢桿菌解淀粉亞種蛋白體PSMα6抗體Anti-CCL13 AntibodyFMS樣酪激3配體(Flt-3L)

竹喙球菌蛋白體PSMα7抗體Anti-CCL17 AntibodyFMS樣酪激3(Flt3)

猴頭菇孕誘導(dǎo)阻斷因子1抗體Anti-CCL19 AntibodyFc受體樣蛋白3(FCRL3)

鏈格孢多腺苷二磷多聚16抗體Anti-CCL18 AntibodyFAS配體(Fas L)

釀酒酵母成對(duì)樣同源結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)錄因子2抗體Anti-CCL16 AntibodyFAM172A蛋白(FAM172A)

微紅帚霉RNA聚合II抗體Anti-CCL2 AntibodyE選擇(E-Selectin/CD62E)

加利利鏈霉菌T淋巴凋亡相關(guān)蛋白TDAG51抗體Anti-CCL2 AntibodyE選擇(E-Sel)

德假單胞菌蛋白調(diào)解因子9抗體Anti-CCL21 AntibodyE鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)

大腸埃希氏菌胰腺激抗體Anti-CCL20 AntibodyEphrin-B2(EFNB2)

地衣芽孢桿菌Bacillus│licheniformis 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

巨大芽孢桿菌Bacillus megaterium 質(zhì)量規(guī)格：>98%,進(jìn)分

鹽漬鹽單胞菌Halomonas│salaria 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
Ro31-8220甲磺酸鹽是廣譜PKC抑制劑矩圓黑盤(pán)孢 豌豆浸粉超氧化物歧化Elisa

雅致放射毛霉 頭孢紙片（30ug/片）Elisa

塔賓曲霉 萘啶酮酸紙片（30ug/片）乙酰酯Elisa

Sphingobacteriaceae CC瓊脂添加劑酪氨酸Elisa

解酯假絲酵母解酯變種 纖維二糖-多粘E（CC）瓊脂胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3Elisa

布魯氏 生物Ⅱ型 大腸桿/大腸群液體顯色培養(yǎng)基球蛋白AElisa

枯草芽胞桿枯草亞種 MMO-MUG培養(yǎng)基粘蛋白5ACElisa

糙孢曲霉 MUGal肉湯晝夜自發(fā)輸出周期蛋白kaputElisa

畢赤酵母 霉、酵母快檢紙片食欲肽Elisa

膠孢 山梨麥康凱瓊脂基礎(chǔ)（SMAC）CD4分子Elisa

鏈霉 改良麥康凱肉湯（CT-MAC）粘蛋白;粘液5BElisa

變異鏈球 Cary-Blair氏運(yùn)送培養(yǎng)基可溶性球蛋白AElisa

嗜中溫寒冷桿 茜-β-半乳糖苷肉湯（Aliz-gal肉湯）白三烯C4Elisa

木拉克酵母屬 半胱氨酸稀釋液半胱氨酰白三烯受體2Elisa

馬里努斯咸海鮮球 溴甲酚紫蛋白胨培養(yǎng)液半胱氨酸白三烯受體1Elisa