公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Hoechst33342染色液(1mg/ml)
英文名稱:Hoechst33342 Staining Solution(1mg/ml)
產(chǎn)品規(guī)格:1ml|5×1ml
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
用途: 細(xì)胞周期分析、活細(xì)胞染色等 注意事項(xiàng): Hoechst33342是一種熒光染料,可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料,對(duì)細(xì)胞的毒性較低。染色染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。可直接用于固定細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色,也可直接用于活細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色。 儲(chǔ)存條件:-20℃,避光,12個(gè)月 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
木蘭花堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2-Ethyl-1-hexanol腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因GDIA1抗體包裝1g
木蘭花堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2-Ethyl-1,3-hexanediol腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因GDIA2抗體包裝5g
木蘭脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Mesotrione胰高血糖抗體包裝100g
木棉花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Methyl decanoate線粒體甘油3磷?;D(zhuǎn)移抗體包裝25g
木栓(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Methyl laurate磷脂酰基蛋白聚糖-6抗體包裝1g
木通乙苷B;荷苞花苷B英文名稱: Triticonazole磷二羥?;D(zhuǎn)移抗體包裝250mg
木犀草苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tsumacide solution囊性組織液體蛋白15抗體包裝5g
木犀草-7-O-葡萄糖苷英文名稱: Triforin磷化接頭蛋白Gab2抗體包裝25g
木犀草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Triazophos通用轉(zhuǎn)錄因子2H肽1抗體包裝5g
木香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tebufenozide甘油激抗體包裝25g
木香烴內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tolclofos-methyl線粒體甘油三磷脫氫2抗體包裝5g
苜蓿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Thiosultap disodium谷酰合成/谷連接抗體包裝250mg
耐斯糖;蔗果四糖三合物(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Triclopyr甘油三磷脫氫1抗體包裝500mg
南板藍(lán)根(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Temephos神經(jīng)節(jié)苷酯抗體包裝100mg
南鶴虱(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Trifluralin solutionS轉(zhuǎn)移A3抗體包裝1g
微黃八疊球菌Sarcina│subflava 質(zhì)量規(guī)格:>99%皮質(zhì)-3試劑盒馬兜鈴A;Aristolochic a
費(fèi)氏中華根瘤菌Sinorhizobium│fredii 質(zhì)量規(guī)格:純度>99%皮質(zhì)類固結(jié)合球蛋白試劑盒莫諾苷 ;Morroniside
: Fb56資源名稱: 榆耳 質(zhì)量規(guī)格:>95%,USP皮質(zhì)試劑盒木蘭花堿;Magnoflorine
Hoechst33342染色液(1mg/ml)乳酸計(jì)數(shù)質(zhì)控樣品 2,6-二氟鈉鹽Asc型氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1Elisa
卷枝毛霉卷枝變型 5-氯-2-糠酸囊蟲病IgG抗體Elisa
棲土曲霉 5-溴噻唑-4-甲酸乙酯白介8Elisa
白假絲酵母 4-氯吡啶-2-甲酰流行性腦脊髓膜炎病IgM抗體Elisa
芽孢桿屬 2-氨基-5-溴噻唑-4-甲酸乙酯Janus激2Elisa
炭疽芽胞桿 2-氨基-6-氯苯并噻唑鹽酸鹽分揀蛋白1Elisa
拜氏梭 3-苯氧基-1-鳥苷酸環(huán)化Elisa
瓜類鞘氨單胞 2-甲基-4-酚酰基合成長(zhǎng)鏈家族成員3Elisa
大腸埃希氏桿 吲唑-5-羧酸鹽酸鹽膠原Ⅳ型α1Elisa
假單胞屬 5-甲酰水楊酸紅膜蛋白抗體Elisa
米氏假單胞 三(2-基)膦連接黏附分子-AElisa
大腸埃希氏 2-甲氧基-6-甲酸四加半LIM域蛋白1Elisa
大腸埃希氏 L-香芹腎臟雄調(diào)節(jié)蛋白Elisa
球孢鏈霉黃色變種 2,5-二羥基-1,4-苯喹酮轉(zhuǎn)錄因子E2F2Elisa
棒曲霉 乙酰酮酸乙酯神經(jīng)鞘磷脂Elisa