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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-21 10:05:34瀏覽次數(shù)：252
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 20次|50次 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X9533 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 公司產(chǎn)品僅供科研 | 英文名稱 | Annexin?V-FITC?Apoptosis?Detection?Kit |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Annexin V-FITC細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒
| Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit | 20次|50次 | 1～3天 |
商品介紹：
本試劑盒是用FITC標(biāo)記的重組人Annexin V來檢測(cè)細(xì)胞凋亡時(shí)出現(xiàn)在細(xì)胞膜表面的磷脂酰絲氨酸的一種細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒。可以使用流式細(xì)胞儀、熒光顯微鏡或其它熒光檢測(cè)設(shè)備進(jìn)行檢測(cè)。一個(gè)包裝的本試劑盒共可以檢測(cè)20個(gè)細(xì)胞樣品。 試劑盒組份： Annexin V-FITC——————100μl Annexin V-FITC結(jié)合液———12ml 碘化丙啶染色液——————220μl Annexin是一類廣泛分布于真核細(xì)胞細(xì)胞漿內(nèi)鈣離子依賴的磷脂結(jié)合蛋白，參與細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。但僅Annexin V被報(bào)道可以調(diào)控一些PKC的活性。 Annexin V選擇性結(jié)合磷脂酰絲氨酸(phosphatidylserine，簡(jiǎn)稱PS)。磷脂酰絲氨酸主要分布在細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)，即與細(xì)胞漿相鄰的一側(cè)。在細(xì)胞發(fā)生凋亡的早期，不同類型的細(xì)胞都會(huì)把磷脂酰絲氨酸外翻到細(xì)胞表面，即細(xì)胞膜外側(cè)。磷脂酰絲氨酸暴露到細(xì)胞表面后會(huì)促進(jìn)凝血和炎癥反應(yīng)。而Annexin V和外翻到細(xì)胞表面的磷脂酰絲氨酸結(jié)合后可以阻斷磷脂酰絲氨酸的促凝血和促炎癥反應(yīng)活性。 用帶有綠色熒光的熒光探針FITC標(biāo)記的Annexin V，即Annexin V-FITC，就可以用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡非常簡(jiǎn)單而直接地檢測(cè)到磷脂酰絲氨酸的外翻這一細(xì)胞凋亡的重要特征。 本試劑盒還提供了碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)染色液，碘化丙啶可以染色壞死細(xì)胞或凋亡晚期喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，呈現(xiàn)紅色熒光。對(duì)于壞死細(xì)胞，由于細(xì)胞膜的完整性已經(jīng)喪失，Annexin V-FITC可以進(jìn)入到細(xì)胞漿內(nèi)，與位于細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)的磷脂酰絲氨酸結(jié)合，從而也使壞死細(xì)胞呈現(xiàn)綠色熒光。 本試劑盒的流式檢測(cè)效果參考圖1和圖2，熒光顯微鏡檢測(cè)效果參考圖3。 1.細(xì)胞用本試劑盒染色后流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡的效果圖。Jurkat細(xì)胞未經(jīng)處理(A)或用10μM喜樹堿(Camptothecin)作用4小時(shí)(B)后，用本試劑盒染色，然后用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞的散射和熒光檢測(cè)。從圖中可以看出，經(jīng)過凋亡誘導(dǎo)劑喜樹堿處理后的細(xì)胞，其Annexin V-FITC染色陽(yáng)性并且PI染色陰性的細(xì)胞，即凋亡細(xì)胞，明顯增加(B圖的右下象限)，Annexin V-FITC和PI染色雙陽(yáng)性的細(xì)胞，即壞死細(xì)胞，也有所增加(B圖的右上象限)。圖中Annexin V-FITC染色陰性PI染色陽(yáng)性(Annexin V-/PI+)所在象限(A和B圖的左上象限)出現(xiàn)的細(xì)胞點(diǎn)是許可范圍內(nèi)的檢測(cè)誤差。實(shí)測(cè)數(shù)據(jù)可能會(huì)因細(xì)胞類型、細(xì)胞凋亡情況、檢測(cè)儀器等的不同而存在差異，圖中數(shù)據(jù)僅供參考。 2.細(xì)胞用本試劑盒染色后流式細(xì)胞儀檢測(cè)效果驗(yàn)證圖。Jurkat細(xì)胞用10μM喜樹堿(Camptothecin)作用4小時(shí)后，未經(jīng)染色(A)、僅用本試劑盒中的PI進(jìn)行染色(B)、僅用本試劑盒中的Annexin V-FITC進(jìn)行染色(C)、用本試劑盒中的Annexin V-FITC和PI進(jìn)行雙染(D)。從圖中可以看出，未經(jīng)染色的是雙陰性細(xì)胞(A)，僅PI染色后出現(xiàn)了預(yù)期的PI染色陽(yáng)性的細(xì)胞，僅Annexin V-FITC染色出現(xiàn)了預(yù)期的Annexin V-FITC染色陽(yáng)性的細(xì)胞，Annexin V-FITC和PI雙染出現(xiàn)了預(yù)期的僅Annexin V-FITC染色陽(yáng)性的凋亡細(xì)胞和雙陽(yáng)性的壞死細(xì)胞。出現(xiàn)的非預(yù)期的細(xì)胞點(diǎn)*在許可的誤差范圍內(nèi)。實(shí)測(cè)數(shù)據(jù)可能會(huì)因細(xì)胞類型、細(xì)胞凋亡情況、檢測(cè)儀器等的不同而存在差異，圖中數(shù)據(jù)僅供參考。 儲(chǔ)存條件：4℃避光，有效期6個(gè)月。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
血管生長(zhǎng)(ANG)英文名稱：ANG ELISA KitAIMP2抗體包裝25g
血管生成樣蛋白4(ANGPTL4)英文名稱：ANGPTL4 ELISA Kit乙酰膽堿抗體包裝5g
血管生成Ⅱ(ANGⅡ)英文名稱：ANGⅡ ELISA Kit5-基乙酰合1抗體包裝10g
血管生成4(ANG-4)英文名稱：ANG-4 ELISA Kit防御α1/3抗體包裝50g
血管生成2(ANG-2)英文名稱：ANG-2 ELISA KitABC膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體包裝1g
血管生成1(ANG-1)英文名稱：ANG-1 ELISA Kit植物延長(zhǎng)蛋白（擬南芥）包裝5g
血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)英文名稱：VCAM-1/CD106 ELISA KitA-Raf抗體包裝1g
血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)英文名稱：VEGFR-3/Flt-4 ELISA Kit磷化A-Raf抗體包裝1g
血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)英文名稱：VEGFR-3/Flt-4 ELISA Kit紅腺苷脫3抗體包裝5g
血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)英文名稱：VEGFR-2/Flk-1 ELISA Kit雄激結(jié)合蛋白抗體包裝10g
血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1/Flt1)英文名稱：VEGFR-1/Flt1 ELISA Kit肝再生增強(qiáng)因子抗體包裝50g
血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D(VEGF-D)英文名稱：VEGF-D ELISA KitAPP/ABPP淀粉樣肽前體蛋白抗體包裝25g
血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)英文名稱：VEGF-C ELISA Kit胎蛋白單克抗體（包被）包裝5g
血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B(VEGF-B)英文名稱：VEGF-B ELISA Kit胎蛋白單克抗體(檢測(cè))包裝1g
血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)英文名稱：VEGF ELISA KitADP核糖基化因子結(jié)合蛋白1抗體包裝250mg
粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體白介4(IL4)KU-55933 (ATM Kinase Inhibitor) is a potent and specific ATM inhibitor with IC50
Annexin V-FITC細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒梨形卷枝霉 N-Boc-4-甲酸乙酯IκB激酶-α檢測(cè)試劑盒
假絲酵母屬 4-溴-2-氟三氟甲苯IκB激酶-β檢測(cè)試劑盒
鼠李糖小短桿 N,N,N-基乙二I型膠原蛋白檢測(cè)試劑盒
釀酒酵母 2-溴-4-氟甲苯I型膠原羥基端肽β降解產(chǎn)物檢測(cè)試劑盒
分枝桿 3,5-二叔丁基-4-羥基I型原膠原N端前肽檢測(cè)試劑盒
蒙古口蘑 2,5-二氟-4-硝苯Jo1抗體;抗組氨酰tRNA合成酶抗體檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)氣莢膜梭 素C型 3,6-二氯噠KIT Ligand檢測(cè)試劑盒
鏈霉 馬來酸二乙酯Klotho蛋白檢測(cè)試劑盒
凍土毛霉 丁二酸二丁酯Klotho蛋白檢測(cè)試劑盒
樟疫霉 1-氯甲基-4-氟-1,4-二氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛烷二(四氟酸)鹽L1粘附分子檢測(cè)試劑盒
印度芽孢桿 對(duì)氯苯乙Laminin-5;Epiligrin檢測(cè)試劑盒
釀酒酵母 醋硝唑L-精氨酸檢測(cè)試劑盒
斑玉蕈 乙酸-4-酚酯L-乳酸檢測(cè)試劑盒
木蹄層孔 乙酰酮氧鈦(IV)L選擇素檢測(cè)試劑盒
枯草芽孢桿枯草亞種 4-氟-3-酸Mac-2結(jié)合蛋白檢測(cè)試劑盒
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