PFKFB3抑制劑(PFK-158)公司正在出售的產(chǎn)品：Bak/FITC 熒光標(biāo)記Bcl-2同源拮抗劑Bak抗體IgG硅 99.9% metals basis
Phospho-BAP1 (p-Ser592)(human) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人化癌易感因1抗體(人)IgG硝銀 99.999% metals basis
Bassoon/BSN /FITC 熒光標(biāo)記鋅指蛋白231抗體Ig

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

豌豆根瘤菌流感病A抗原Anti-CNOT2(Ab-101) Antibody人血小板衍生生長(zhǎng)因子BB(PDGF-BB)

雞傷寒沙門氏菌組蛋白H2AX多肽抗原Anti-CNOT2 Antibody人血小板衍生生長(zhǎng)因子BB(PDGF-BB)

大豆莖潰瘍菌流感病A抗原Anti-CNOT7 Antibody人CXC趨化因子配體16(CXCL16)

泛養(yǎng)副球菌流感病A抗原Anti-CNP Antibody人CXC趨化因子配體16(CXCL16)

百脈根中間根瘤菌透明質(zhì)/玻璃抗原Anti-CNP Antibody人CXC趨化因子受體3(CXCR3)

赭色擲孢酵母HA tag標(biāo)簽多肽Anti-CNOT7(CAF1) pAb人CXC趨化因子受體3(CXCR3)

球形阜孢HA tag標(biāo)簽（分支多肽）Anti-CNR2 Antibody人γ干擾誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)

枯草芽孢桿菌肝生長(zhǎng)因子激活物抑制因子抗原Anti-CNTN2 Antibody人γ干擾誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)

地衣芽孢桿菌人類血紅蛋白α1抗原Anti-CNTN2 Antibody人基質(zhì)衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)

類干酪乳桿菌類干酪亞種乙型肝炎病X蛋白(HBxAg)抗原Anti-CNTFR Antibody人基質(zhì)衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)

嗜鹽喜鹽芽胞桿菌乙型肝炎病X蛋白(HBxAg)抗原Anti-CNTN5 Antibody人淋巴趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)

窄食單胞菌肝炎病X蛋白(HBxAg)C端抗原Anti-CNTD2 Antibody人淋巴趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)

串珠鐮孢人α亞基人絨毛膜促性腺激多肽抗原Anti-CNTN6 Antibody人α干擾(IFN-α)

約氏不動(dòng)桿菌膀胱腫瘤抗原Anti-COL11A1 Antibody人α干擾(IFN-α)

固氮菌c-erbB-2受體抗體(N端)Anti-COL13A1 Antibody人可溶性CD86(B7-2/sCD86)

韓國游動(dòng)微菌c-erbB-2受體抗原(N端)Anti-CNTROB Antibody人可溶性CD86(B7-2/sCD86)

NADPH氧化活化蛋白p47抗體酪丁梭菌人甲狀腺癌細(xì)胞

成對(duì)樣同源結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)錄因子2抗體長(zhǎng)雙歧桿菌人胃腺癌細(xì)胞（低分化）

多腺苷二磷多聚16抗體白色葡萄球菌小鼠垂體瘤細(xì)胞

G蛋白偶聯(lián)受體p2y10抗體威爾氏李斯特菌大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞
PFKFB3抑制劑(PFK-158)三棱孢小囊 N-乙?；?4-酮

枯草芽孢桿 鞘磷脂

塔斯曼尼亞弧 間羥基聯(lián)苯

米曲霉 2-羰基丁酸鈉鹽

渾圓鏈霉 辣椒堿（合成）

Bacillus aryabhattai 苯甲脒

黏液威克斯氏 吡啶乙酸鹽酸鹽

外外安德倫茨氏 9-氨基吖啶鹽酸鹽一水合物

土壤桿 3-甲基

硬結(jié)節(jié)桿 乙二四乙酸三鈉

枯草芽孢桿 香草乙酮

澳型核果褐腐病 聚乳酸

綠木霉 12-Deoxo-12α-acetoxyelliptone

單胞 12-Hydroxy-8(17),13-labdadien-16

釀酒酵母 13-Epijhanol