產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Vps34抑制劑(Vps34-IN-1)
英文名稱:Vps34-IN-1
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
英文名稱:Vps34-IN-1 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg Vps34-IN-1是Vps34的抑制劑,來自WO/2012085815A1,化合物實(shí)例16a;IC50值為4nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1383716-33-3 純度:99.64% 分子式:C??H??ClN?O 分子量:425.91 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
松樹土類芽孢桿菌核基質(zhì)p84蛋白抗體Human Sprr2i ELISA Kit大鼠蛋白激C(PKC)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌組蛋白H3樣抗體Human SPR ELISA Kit大鼠蛋白激C epsilon(PKCε)免疫試劑盒
博斯氏菌屬組蛋白H3樣抗體Human SRBD1 ELISA Kit大鼠蛋白激B(PKB)免疫試劑盒
芽孢桿菌屬聚組抗體標(biāo)簽抗體Human SPRR3 ELISA Kit大鼠彈性蛋白(ELN)免疫試劑盒
剛毛絲毛伏革菌艾滋病病抗體Human SPRY2 ELISA Kit大鼠彈力蛋白免疫試劑盒
吉氏根瘤菌艾滋病病-1包膜糖蛋白抗體Human SPRY3 ELISA Kit大鼠膽囊收縮/腸促胰肽(CCK)免疫試劑盒
微球菌屬艾滋病病抗體Human SPATS2L ELISA Kit大鼠乙酰轉(zhuǎn)移(ChAT)免疫試劑盒
小托柄鵝膏菌艾滋病病-1包膜糖蛋白抗體Human SPRY4 ELISA Kit大鼠膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)免疫試劑盒
阿魏側(cè)耳磷化組蛋白H3抗體Human SPRYD5 ELISA Kit大鼠膽固24S-羥化(CYP46)免疫試劑盒
大腸桿菌短鏈L-3羥烷基脫氫抗體(小鼠,大鼠)Human MYOG(Myogenin) ELISA Kit大鼠膽固(CH)免疫試劑盒
巴斯德酵母同源盒蛋白HOXD10抗體Human SPTLC2 ELISA Kit大鼠單核趨化蛋白4(MCP-4)免疫試劑盒
彎曲高溫單孢菌HHIP樣蛋白1抗體Human SPCS1 ELISA Kit大鼠單核趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)免疫試劑盒
桑莖點(diǎn)霉HOXA10抗體Human SPRED2 ELISA Kit大鼠單核趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)免疫試劑盒
南方異擔(dān)子菌促黃體生成受體抗體Human SPRR1B ELISA Kit大鼠單核趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫試劑盒
煙曲霉HER2受體抗體(N端)Human SPZ1 ELISA Kit大鼠單氧化(MAO)免疫試劑盒
灰平鏈霉菌HER2受體抗體Human SPRR2D ELISA Kit大鼠大內(nèi)皮1免疫試劑盒
青霉菌屬菌種Penicillium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品路路通
毛木耳Auricularia│polytricha 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品胡麻屬苷
鹽單胞菌Halomonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5%(GC)次野鳶尾黃
Vps34抑制劑(Vps34-IN-1)緊密毛霉 納米鋇鐵氧體球蛋白GElisa
固氮螺屬 五酸銨 四水合物球蛋白MElisa
谷氨酸棒狀桿 化鋯可溶性CD4分子Elisa
鞘氨盒屬 化鈦可溶性CD8分子Elisa
堅(jiān)硬芽孢桿 砷化鋅β干擾Elisa
蘇云金芽孢桿庫爾斯塔克亞種 二化鋁β-內(nèi)啡肽Elisa
葡萄座腔 二硅化鎢γ干擾Elisa
枯草芽孢桿 二硅化鉭白介1βElisa
粉紅單端孢霉 氧化鐠白介4Elisa
檸檬黃色農(nóng)球 聯(lián)苯-2-甲白介6Elisa
油菜核病 氧化銩白介8Elisa
溶桿 鋯酸鍶球蛋白GElisa
Erwinia amylovora 無水氧化銠鐵蛋白Elisa
運(yùn)動(dòng)節(jié)桿 氧化鐠(III)脂蛋白脂Elisa
金龜子綠僵 二氧化鎢(IV)腫瘤壞死因子αElisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)