商品介紹:
Tunicamycin是一個(gè)同源核苷混合物的抗生素,也是糖基化的抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):11089-65-9 純度:98.00% 分子量:844.94 (n=10) 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:糖基化抑制劑(Tunicamycin)
英文名稱:Tunicamycin
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
黑色淺灰鏈霉菌血管生成樣蛋白4抗體Human KCNIP1 ELISA Kit小鼠葡萄糖6磷脫氫(G6PD)免疫試劑盒
弗吉尼亞鏈霉菌整合樣金屬蛋白與凝血10型抗體Human KCTD14 ELISA Kit小鼠破傷風(fēng)(Tetanus)抗體免疫試劑盒
鐮刀菌嘌呤嘧啶核內(nèi)切2抗體Human KCNIP3 ELISA Kit小鼠破骨分化因子(ODF)免疫試劑盒
根瘤菌神經(jīng)絲蛋白抗體Human KCNJ5 ELISA Kit小鼠蘋果脫氫(MDH)免疫試劑盒
污黑腐皮殼β淀粉樣肽(1-28)抗體Human KCNAB1 ELISA Kit小鼠嘌呤核苷磷化(PNP)免疫試劑盒
銹色桿孢囊菌有絲分裂激B抗體Human KCNAB2 ELISA Kit小鼠皮質(zhì)/腎上腺(CORT)免疫試劑盒
灰葡萄孢(灰霉病菌)軟骨蛋白聚糖抗體Human KCNC4 ELISA Kit小鼠皮質(zhì)(Cortisol)免疫試劑盒
毛榛畢赤酵母去整合樣金屬蛋白10抗體Human KCNB1 ELISA Kit小鼠牛小腸堿性磷(CIAP)免疫試劑盒
釀酒酵母含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族9抗體Human KCNE1 ELISA Kit小鼠XIII B(F13B)免疫試劑盒
蠟?zāi)俸^蛋白重復(fù)序列-因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族8抗體Human KCNE4 ELISA Kit小鼠XIII A1(F13A1)免疫試劑盒
釀酒酵母植物生長(zhǎng)激ABP1抗體Human KARS ELISA Kit小鼠VIIIa輕鏈(F8aLC)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白1抗體Human KCNF1 ELISA Kit小鼠Ⅻ(FⅫ)免疫試劑盒
金針菇(毛柄金錢菌、冬菇)α紅分化相關(guān)因子抗體Human KCNB1 ELISA Kit小鼠Ⅺ(FⅪ)免疫試劑盒
葡萄鏈格孢*血管緊張激活蛋白1抗體Human KCNG4 ELISA Kit小鼠Ⅹ(FⅩ)免疫試劑盒
焦曲霉Alpha清蛋白抗體Human KCNAB2 ELISA Kit小鼠Ⅸ(FⅨ)免疫試劑盒
粘質(zhì)沙雷氏菌AFAP1L2抗體Human KCNC4 ELISA Kit小鼠Ⅷ(FⅧ)免疫試劑盒
黃曲霉Aspergillus│flavus 質(zhì)量規(guī)格:分子生物學(xué)級(jí)白介28A試劑盒烏藥環(huán)戊烯二
球孢白僵菌Beauveria│bassiana 質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級(jí)白介26試劑盒烏藥環(huán)戊烯二
馬杜拉放線菌Actinomadura│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級(jí)白介25試劑盒無梗五加苷B
糖基化抑制劑(Tunicamycin)去氧基麻醉椒英文名稱: Astragaloside I減數(shù)分裂缺陷蛋白1抗體包裝1g
去異波爾定(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Astragaloside II增殖誘導(dǎo)蛋白60(早老相關(guān)蛋白)包裝1g
去澤拉木(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Astragaloside III線粒體載體同源蛋白2抗體包裝1g
去芹菜糖桔梗皂苷D(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Astragaloside線粒體裂變調(diào)節(jié)蛋白1抗體包裝5g
去芹糖桔梗皂苷D3英文名稱: Engeletin線粒體蛋白18抗體包裝5g
去氫厄弗酚英文名稱: Baicalin生長(zhǎng)誘導(dǎo)跨膜蛋白抗體(源性蛋白2)包裝250mg
去氫二異丁香酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Baicalin線粒體裂變因子MFF抗體包裝50MG
去氫茯苓英文名稱: Baicalin小鼠血清白蛋白抗體包裝1g
去氫鉤藤堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Baicalein黑皮質(zhì)4受體抗體包裝5g
去氫毛鉤藤堿英文名稱: Baicalein黑皮質(zhì)受體5抗體包裝25g
去氫木香內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cyclovirobuxine狀腺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白/單羧轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白7/8抗體包裝5g
去氫土莫英文名稱: Macranthoidin B絲/蘇蛋白激MARK2抗體包裝1g
去亞基小檗堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pimpinellin磷化絲/蘇蛋白激MARK2抗體包裝25g
去氧紫草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Asiaticoside基質(zhì)金屬蛋白9抗體包裝5g
去乙酰車葉草酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Germacrone磷化蛋白激MST2抗體包裝1g