ROCK-I和ROCK-II抑制劑公司*的產(chǎn)品：SUMO/FITC 熒光標(biāo)記類泛蛋白抗體IgGBOC-D-纈氨 98%
Survivin/FITC 綠色熒光標(biāo)記Survivin蛋白抗體IgGBOC-D-脯氨 98%
Survivin/PE 熒光PE標(biāo)記凋亡抑制因子抗體IgGBOC-L-環(huán)己甘氨 98%
SUR1/FITC 熒光標(biāo)記磺酰脲類藥物受體1抗體IgGBOC-D-絲氨酯 98

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：ROCK-I和ROCK-II抑制劑

英文名稱：Y-27632 dihydrochloride

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

密蘇里游動(dòng)放線菌中心體肌動(dòng)蛋白γ1/增強(qiáng)型PI3K蛋白抗體Human CPN2(Carboxypeptidase N2) ELISA Kit人胰島樣生長因子結(jié)合蛋白5(IGFBP-5)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌分裂周期相關(guān)蛋白JPO2抗體Human CDKN1B(Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 1B) ELISA Kit人胰島樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)免疫試劑盒

類干酪乳桿菌半胱蛋白-2抗體Human IL-17 F(Interleukin 17F) ELISA Kit人胰島樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)免疫試劑盒

管毛殼7號染色體開放閱讀框63抗體Human Cr(Creatinine) ELISA Kit人胰島樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)免疫試劑盒

鏈霉菌屬CD2結(jié)合蛋白3抗體Human TITF1(thyroid transcription factor 1) ELISA Kit人胰島樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)免疫試劑盒

淡紫紫霉膠原三股螺旋重復(fù)蛋白1抗體Human α-Endorphin(alpha Endorphin) ELISA Kit人胰島樣生長因子2受體(IGF-2R)免疫試劑盒

黃色直絲鏈霉菌20號染色體開放閱讀框72抗體Human TCEB2(Transcription elongation factor B polypeptide 2) ELISA Kit人胰島樣生長因子2(IGF-2)免疫試劑盒

黑木耳2號染色體開放閱讀框6抗體Human ACY1(aminoacylase-1) ELISA Kit人胰島樣生長因子2 mRNA結(jié)合蛋白2(IGF2BP2)免疫試劑盒

假單胞菌CD318抗體Human SAT1(Diamine acetyltransferase 1) ELISA Kit人胰島樣生長因子1受體(IGF-1R)免疫試劑盒

短小芽孢桿菌著絲粒蛋白B抗體Human SH3BP2(SH3 Domain Binding Protein 2) ELISA Kit人胰島樣生長因子1(IGF-1)免疫試劑盒

秦氏蜜環(huán)菌1號染色體開放閱讀框111抗體Human IFNA2(Inteferon alpha 2a) ELISA Kit人胰島受體底物2(IRS-2)免疫試劑盒

Paraconiothyrium sp.19號染色體開放閱讀框80抗體Human NENF(Neudesin) ELISA Kit人胰島受體底物1(IRS1)免疫試劑盒

火木層孔菌半胱雙加氧1抗體Human SCUBE2(Signal peptide, CUB and EGF-like domain-containing protein 2) ELISA Kit人胰島受體β(ISR-β)免疫試劑盒

異常漢遜酵母膠原蛋白11A2抗體Human beta 1-ARA(beta 1 adrenergic receptor autoantibody) ELISA Kit人胰島受體α(INSRA)免疫試劑盒

鍺栓孔菌 (淡黃褐栓菌)CUL4B蛋白抗體Human Wnt6(Protein Wnt-6) ELISA Kit人胰島降解(IDE)免疫試劑盒

德氏乳桿菌保加利亞亞種1號染色體開放閱讀框103抗體Human NEXN(Nexilin) ELISA Kit人胰島(INS)免疫試劑盒

平滑假絲酵母Candida│parapsilosis 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRG蛋白偶聯(lián)膽汁受體1試劑盒2-金剛烷

葉點(diǎn)霉Phyllosticta│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRG蛋白偶聯(lián)雌激受體1試劑盒金剛烷

斯氏土地桿菌Pedobacter│steynii 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRG蛋白偶合受體44試劑盒己烯雌酚
ROCK-I和ROCK-II抑制劑大腸埃希氏桿 2,5-二煙酸無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員3aElisa

變金黃節(jié)桿 Boc-L-天冬氨酸-4-甲酯無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員5aElisa

球孢白僵 10-(2-萘基)蒽-9-酸無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員6Elisa

煙色紅曲霉 三乙基硅烷五聚3Elisa

異型德克酵母 2,2-二甲基琥珀酸性T相關(guān)抗原4Elisa

鐮孢霉 氫西酞胱硫γ裂解Elisa

肉座屬 4-乙基-2,3-二氧-1-哌甲酰間粘附分子1Elisa

樟疫霉 碳酸鈉,一水色CElisa

弗雷德里克斯堡假單胞 2,4-雙(三氟甲基)苯甲色C氧化Elisa

谷氨酸棒桿 草酸鈷,二水色P450Elisa

阮繼生氏圣格奧爾根 甘羅溴銨色P4501A2Elisa

喜海水鹽單胞 3-膦酸基酸色P4502E1Elisa

門多薩假單胞 2-乙酰基菲外信號調(diào)節(jié)激Elisa

庫爾勒鹽單胞 α-萘酚酞周期AElisa

粘質(zhì)沙雷氏 2-乙酰-4-周期D1Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)