Notch抑制劑(IMR-1)公司正在出售的產(chǎn)品：Glycoprotein /FITC 熒光標(biāo)記風(fēng)疹病糖蛋白抗體IgG溴藍(lán)鈉 AR
glypican 1/FITC 熒光標(biāo)記脂酰蛋白聚糖-1抗體IgG剛果紅 AR
Glypican 4/FITC 熒光標(biāo)記脂酰蛋白聚糖-4抗體IgG偶氮膦Ⅲ 顯色劑
GlyR Alpha1/FITC 熒光標(biāo)記甘氨受體alpha1型抗體IgG變色2R AR
MMP

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
米川黃桿菌小鼠ⅩAnti-PHF1 Antibody人黏著斑激(FAK)

畢赤酵母屬人角蛋白17Anti-PHF3 Antibody人黏著斑激(FAK)

傳染性支氣管炎病大鼠糖皮質(zhì)類固受體Anti-PGLS Antibody人可溶性磷脂A2(sPL-A2)

解橡膠諾氏菌大鼠黃體生成釋放激Anti-PHAX Antibody人可溶性磷脂A2(sPL-A2)

糙皮側(cè)耳人制瘤M受體Anti-PHF3 Antibody人脫氧核糖核Ⅰ(DNase-Ⅰ)

乳酒假絲酵母小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉輔因子Anti-PHKB Antibody人脫氧核糖核Ⅰ(DNase-Ⅰ)

鞘脂菌小鼠前心鈉肽Anti-PHKA1 Antibody人精(Arg)

黃曲霉大鼠8異前列腺Anti-PHKG1 Antibody人精(Arg)

嗜湖短芽胞桿菌人B淋巴瘤因子3Anti-PHLDA1 Antibody人精(Arg)

香栓孔菌人癌蛋白誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄物3Anti-PHLPP1 Antibody人精(Arg)

Megamonas funiformis小鼠N端前腦鈉Anti-Phospho AATF (Ser477) Antibody堿性磷(NAP)

多粘類芽孢桿菌大鼠γ干擾誘導(dǎo)蛋白16/p16Anti-Phospho ABL1 (Tyr393/439) Antibody堿性磷(NAP)

中國(guó)臺(tái)灣根霉人P27蛋白Anti-Phospho ACO1 (Ser711) Antibody人間變性淋巴瘤激(ALK)

堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌小鼠纖溶抗纖溶復(fù)合物Anti-Phospho AKT1 (Thr342) Antibody人間變性淋巴瘤激(ALK)

嗜碳芽孢桿菌大鼠基質(zhì)衍生因子1aAnti-Phospho ALOX5 (Ser523) Antibody人激動(dòng)異構(gòu)/分裂MB(CKMB)

蝙蝠蛾擬青霉大鼠血漿α顆粒膜蛋白Anti-Phospho ANAPC1 (S355) Antibody人激動(dòng)異構(gòu)/分裂MB(CKMB)

環(huán)指蛋白94抗體蓋囊菇小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞

G蛋白偶聯(lián)誘導(dǎo)蛋白2受體抗體粘孢白僵菌大鼠回腸細(xì)胞

腺泡狀軟組織肉瘤結(jié)構(gòu)域蛋白ASPC抗體黃毛黎豆根瘤菌人子宮頸內(nèi)膜上皮細(xì)胞

轉(zhuǎn)錄共激活因子TAZ抗體藤黃檀根瘤菌人慢性髓樣白血病細(xì)胞
Notch抑制劑(IMR-1)米根霉 3,5-二硝基水楊酸

香菇 水楊酸苯酯

金針菇 5-水楊酸

枯草芽孢桿 5-氨基水楊酸

產(chǎn)黃青霉 無水四酸鈉

產(chǎn)黃青霉 龍膽酸

自養(yǎng)假諾氏 三異辛

 鹽酸三

巨獸芽孢桿 三異戊

暗孢節(jié)菱孢 甲苯-4-磺酰

季也蒙假絲酵母 對(duì)氨基苯磺酰

谷棒桿 丁二酰亞

高溫放線 水楊酰苯

異常威克漢姆酵母 水楊酰

球孢白僵 阿托品，顛茄堿