產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):USP1抑制劑(SJB3-019A)
英文名稱(chēng):SJB3-019A
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
SJB3-019A是一種新穎的,有效的USP1抑制劑,在K562細(xì)胞中,IC50值為0.0781μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 純度:99.00% 分子量:276.25 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
三葉草根瘤菌神經(jīng)元突觸膜結(jié)合蛋白2抗體Anti-ENO1 Antibody乙脫氫4(ADH4)
芽孢桿菌屬神經(jīng)元突觸膜胞外分泌調(diào)節(jié)蛋白3抗體Anti-ENO2 Antibody乙脫氫3(ADH3)
香菇神經(jīng)元突觸膜胞外分泌調(diào)節(jié)蛋白4抗體Anti-ENO2 Antibody乙脫氫2(ADH2)
*紫晶蠟?zāi)⒄J(rèn)知缺陷突觸相關(guān)蛋白SynGAP抗體Anti-EP300 Antibody(PB0163)乙脫氫1(ADH1)
白曲霉Kartagener綜合征相關(guān)蛋白R(shí)SHL3抗體Anti-EOMES Antibody乙磷轉(zhuǎn)移1(EPT1)
小麥莖點(diǎn)霉反義導(dǎo)向分子RGMA抗體Anti-Epac1/RAPGEF3 Antibody乙激2(ETNK2)
地衣芽胞桿菌反義導(dǎo)向分子RGMB抗體Anti-EPAS1 Antibody乙激1(ETNK1)
膠孢反義導(dǎo)向分子RGMC抗體Anti-EPB41L1 Antibody胰腺再生蛋白Iα(REG1α)
四季腐霉軸突導(dǎo)向受體蛋白3抗體Anti-EPB41L1 Antibody胰腺再生蛋白Ⅳ(REG4)
膠質(zhì)芽孢桿菌(沒(méi)有可以提供的)G蛋白相關(guān)RABX5抗體Anti-EPAS1 Antibody胰腺特異轉(zhuǎn)錄因子1α(PTF1α)
香菇環(huán)指蛋白157抗體Anti-EPB41L5 Antibody胰高血糖樣肽1(GLP1)
米根霉核糖核抑制因子1抗體Anti-EPCAM Antibody(PB1115)胰高血糖受體(GCGR)
尖孢鐮孢Notch轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白R(shí)BPJK抗體Anti-EPHA1 Antibody胰輔脂(CLPS)
Cupriavidus鈣調(diào)神經(jīng)磷調(diào)節(jié)蛋白2抗體(唐氏綜合征候選區(qū)域蛋白1樣蛋白2)Anti-EPGN Antibody胰多肽2(PPY2)
棲土梭孢殼環(huán)指蛋白5抗體(E3泛蛋白連接RNF5)Anti-EPGN Antibody胰淀(IAPP)
蘇云金芽孢桿菌松躅亞種核糖體蛋白L15抗體Anti-EPHA2 Antibody胰淀粉α2(AMY2)
嗜氣單胞菌Aeromonas│hydrophila 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
白靈菇Pleurotus│nebrodensis 質(zhì)量規(guī)格:0.99
假單孢菌屬菌種Pseudomonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格:0.98
USP1抑制劑(SJB3-019A)枯草芽胞桿 衛(wèi)矛半固體碳酸酐IIIElisa
洛斯里被毛孢 MR-VP大腸桿抗體Elisa
微桿 Korser氏肉湯低分子肝抗XaElisa
枯草芽孢桿 乳糖發(fā)酵管低分子肝抗IIa Elisa
米曲霉 色氨酸肉湯糖原磷酸化Elisa
海洋桿 半固體瓊脂2,6-二磷酸果糖Elisa
黃硬皮馬勃 甘露發(fā)酵管磷酸化腺苷酸活化蛋白激Elisa
豌豆根瘤 尿膽囊收縮Elisa
球形賴(lài)氨酸芽孢桿 氨基酸脫羧對(duì)照胃饑餓Elisa
雅氏艾美耳球蟲(chóng) 乳糖發(fā)酵管促腎上腺皮質(zhì)釋放因子Elisa
芽孢桿 賴(lài)氨酸脫羧肉湯去甲腎上腺Elisa
血紅密孔 Elek氏培養(yǎng)基甘油-3-磷酸脫氫Elisa
淺黃褐濕傘 木糖發(fā)酵管α半乳糖基抗原Elisa
犬種布魯氏病陽(yáng)性血清 蛋白胨水(色氨酸肉湯)乳糖Elisa
豬鼻支原體 弧顯色培養(yǎng)基乳脂Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)