產(chǎn)品屬性:
中文名稱:SUMOylation抑制劑(Ginkgolic Acid)
英文名稱:Ginkgolic Acid
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
Ginkgolic Acid是一種天然化合物,能夠抑制體內(nèi)/體外蛋白類泛素化(SUMOylation),但不影響體內(nèi)泛素化(ubiquitination)。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):22910-60-7 別名:Ginkgolic acid (15:1);Ginkgolic acid I;Romanicardic acid 純度:95.07% 分子量:346.5 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
木霉真核翻譯起始因子4E抗體Human RAMP3 ELISA Kit脂肪甘油三酯脂(ATGL)
壁節(jié)桿菌核蛋白4抗體(Ran結(jié)合蛋白4)Human ABCC6(Multidrug resistance-associated protein 6) ELISA Kit脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)
展示接霉免疫球蛋白重鏈可變區(qū)抗體Human RANBP10 ELISA Kit脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)
彩色豆馬勃胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白7抗體Human RARG ELISA Kit脂多糖/內(nèi)(LPS)
谷棒桿菌胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白6抗體Human RANBP3L ELISA Kit脂多糖(LPS)
蘇云金芽孢桿菌庫(kù)爾斯塔克亞種KB抑制蛋白激εHuman RARRES3 ELISA Kit脂蛋白脂(LPL)
平菇(雪蓮菇)整合β4抗體Human RAD9A ELISA Kit脂蛋白脂肪(LPL)
乳桿菌屬磷化白介-7受體a抗體Human RAD51B(DNA repair protein RAD51 homolog 2) ELISA Kit脂蛋白相關(guān)磷脂A2(Lp-PLA2)
梅林青霉磷化胰島受體底物-1抗體Human RADIL ELISA Kit脂蛋白磷脂A2(Lp-PL-A2)
副豬嗜血桿菌磷化胰島受體底物2抗體Human PTPRQ(Phosphotidylinositol phosphatase PTPRQ) ELISA Kit脂蛋白磷脂A2(Lp-PLA2)
枯草芽孢桿菌磷化KB抑制蛋白激β抗體Human Radixin ELISA Kit脂蛋白α(Lp-α)
魯氏不動(dòng)桿菌磷化KB抑制蛋白激β抗體Human RAF1 ELISA Kit脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)
賴芽胞桿菌屬磷化KB抑制蛋白激β抗體Human RAE1 ELISA Kit正常T表達(dá)和分泌因子(RANTES/CCL5)
小單孢菌磷化KB抑制蛋白激β抗體Human RAI1 ELISA Kit整合連接激1(ILK-1)
大腸埃希菌磷化KB抑制蛋白激β抗體Human RAI14 ELISA Kit整合β4結(jié)合蛋白(ITGB4BP)
pHY300PLK磷化整合連接激1抗體Human RALA ELISA Kit整合αM型(ITG αM/CD11b)
: HBUM71449資源名稱: 鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)山茱萸新苷
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)丁東莨菪堿
ATCC35564資源名稱: 棲麥假單胞菌 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷
SUMOylation抑制劑(Ginkgolic Acid)灰平鏈霉 N,N-二甲基丁Ⅰ型膠原N末端肽Elisa
孢囊放線 異丁基溴化鎂溶液病性腹瀉E2蛋白Elisa
立枯絲核 1-苯基哌肺炎支原體抗體Elisa
PET-22b 4-苯基嗎啉肺炎支原體Elisa
依利諾斯類芽胞桿 聯(lián)環(huán)己烷鼻氣管炎Elisa
枯草芽孢桿 2,3-二羥基萘胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-2Elisa
宇佐美曲霉 2-吩噻α1-微球蛋白Elisa
新型隱球酵母原變種 仲丁基溴化鎂中間α球蛋白抑制因子H3Elisa
金黃桿屬 鄰甲氧基-N-乙酰乙酰苯熱休克蛋白-70抗體Elisa
榛色假單胞 間三聯(lián)苯藍(lán)舌病Elisa
地衣芽胞桿 甲基烯酰成纖維生長(zhǎng)因子2Elisa
小孢根霉華變種 異基溴化鎂溶液傳染性鼻氣管炎病Elisa
綠色木霉 2-烯腺病5型Elisa
普通裂褶 (1S,2R,5S)-(+)-薄荷基(R)-對(duì)甲苯亞磺酸鹽呼吸道合胞體病Elisa
釀酒酵母 3,3-二甲基-1-丁炔皰疹性口腔炎病Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)