以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
公司產品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
Mivebresib是BET家族的抑制劑,能夠擾亂關鍵的轉錄程序在體內或者體外推動前列腺癌增長引起強的抗腫瘤特性,也是MYC和TMPRSS2-ETS的抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1445993-26-9 別名:ABBV-075 純度:99.28% 分子量:459.47 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
枯草芽孢桿菌干擾調節(jié)因子4抗體Human RBM15B ELISA Kit中心體蛋白350kDa(CEP350)
鏈霉菌胰島樣生長因子1受體β/IGF-IRβ 抗體Human RASSF6 ELISA Kit中期因子(MK)
根瘤桿菌屬ING4抗體Human RASSF8 ELISA Kit制瘤M受體(OSMR)
米曲霉大鼠血清型IgA抗體Human RBM16 ELISA Kit酯酰甘油激ζ(DGKZ)
薩氏艾美耳球蟲白介-17F抗體Human RB1CC1 ELISA Kit脂質運載蛋白2(LCN2)
平菇胰島生長因子樣家族成員1抗體Human RASSF7 ELISA Kit脂氧A4(LXA4)
不解糖鞘單胞菌白介-17C抗體Human RANBP6 ELISA Kit脂磷壁(LTA)
擴展青霉中介抗體Human RAP2B ELISA Kit脂聯(lián)受體2(ADIPOR2)
斐濟球腔菌NF-kappa-B抑制子beta抗體Human RAP1B(Ras-related protein Rap-1b) ELISA Kit脂聯(lián)受體1(ADIPOR1)
鼠李糖乳桿菌干擾調節(jié)因子6抗體Human RAP2A ELISA Kit脂聯(lián)(ADT)
紅色紅曲Human RAP1GAP ELISA Kit脂聯(lián)(ADP)
阿穆爾斯克灣鹽地桿菌胰島生長因子樣家族成員4抗體Human RBM16 ELISA Kit脂肪脂肪結合蛋白(aFABP)
柴油食烷菌白介31抗體Human RAPGEF5 ELISA Kit脂肪型脂肪結合蛋白(aFABP)
金孢霉屬干擾誘導蛋白P78抗體Human RAPH1 ELISA Kit脂肪轉運蛋白5(FATP5)
淺紫灰直絲鏈霉菌抑制α/Inhibin α抗體Human RAPGEFL1 ELISA Kit脂肪結合蛋白4(FABP-4)
枯草芽孢桿菌枯草亞種白介18抗體Human RAPSN ELISA Kit脂肪結合蛋白(FABP)
: ivcas7.00857資源名稱: 凝結芽孢桿菌 質量規(guī)格:>99.5%(GC),標準物質(R型)人參皂苷Rg2
日本根霉Rhizopus│japonicus 質量規(guī)格:>99.5%(GC),標準物質莫諾苷
解纖維芽孢桿菌Bacillus│cellulosilyticus 質量規(guī)格:>99.5%(GC),標準物質山茱萸苷
BET家族抑制劑(Mivebresib)大腸埃希氏 環(huán)辛烯腹瀉病抗體Elisa
糙皮側耳 5-氮胞嘧啶血吸蟲抗體Elisa
美洲彎孢霉 (3,4-二甲氧苯基)乙膽固Elisa
產堿假單胞 環(huán)己基溴化鎂炭疽桿抗體Elisa
毛榛畢赤酵母 2-甲氧基萘炭疽桿Elisa
運動節(jié)桿 1-甲基吡唑腸激Elisa
芬氏鏈霉 Fmoc-L-酪氨酸巴氏桿抗原Elisa
香菇15 對三聯(lián)苯氣腫疽抗體Elisa
大腸埃希 4-苯基氣腫疽抗原Elisa
污泥根瘤 聯(lián)苯單乙酮血清白蛋白Elisa
枯草芽孢桿 1,5-戊二硫病性腹瀉病Elisa
立枯絲核 噻蒽呼腸孤病Elisa
腐皮殼 4--1-丁口蹄疫抗體Elisa
棘孢小單孢 3-丁炔-1-偽狂犬病抗體Elisa
Arenibacter sp. 2-溴乙基乙酸酯鈣衛(wèi)蛋白Elisa