公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:DNA甲基轉移酶抑制劑(RG108)
英文名稱:DNA methyltransferase inhibitor
產品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
RG108是一種非核苷的DNA甲基轉移酶(DNA methyltransferase)抑制劑,IC50值為115nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:48208-26-0 別名:N-Phthalyl-L-tryptophan 純度:99.75% 分子量:334.33 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
泡菜大洋芽胞桿菌白介3抗體Human RASIP1 ELISA Kit腫瘤壞死因子α(TNF-α)
假單胞菌白介3受體a鏈抗體Human RASAL2 ELISA Kit腫瘤壞死因子α(TNFα)
秀珍菇白介-5受體α鏈抗體IL-5RαHuman RASSF4 ELISA Kit腫瘤關聯(lián)鈣信號轉導因子2(TACSTD2)
黑曲霉白介-10受體β抗體Human RBBP6 ELISA Kit腫瘤蛋白p53(TP53)
氣微菌白介-12受體β1抗體Human RASEF ELISA Kit腫瘤標志物(CA724)
枯草芽孢桿菌白介-12受體β2抗體Human RASGEF1A ELISA Kit中性內肽/腦啡肽(NEP)
綠粘帚霉白介15受體α抗體Human RBBP8 ELISA Kit中性粒趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)
*匍枝根霉白介17受體抗體Human RBBP9 ELISA Kit中性粒明膠相關脂質運載蛋白(NGAL)
黃玫瑰色諾卡氏菌白介-17B受體抗體Human RBM10 ELISA Kit中性粒明膠相關脂質運載蛋白(Lipocalin-2/NGAL)
冷海水黃桿菌白介-18受體β鏈抗體Human RBM14 ELISA Kit中性粒顆??贵w(ANGA)
洋蔥伯克霍爾德菌白介21抗體Human RASGRF1 ELISA Kit中性??贵w(ANA)
扶桑本森頓酵母白介21受體抗體Human RASGEF1B ELISA Kit中性粒堿性磷(NAP)
粗糙脈孢菌白介-22抗體Human RBM11 ELISA Kit中性粒防御3(DEFA3)
解脂亞羅酵母白介29抗體Human RASIP1 ELISA Kit中性粒防御1-3(HNP1-3)
草菇白介22受體結合蛋白抗體Human RASSF4 ELISA Kit中性粒彈性蛋白(NE)
鹽水球形菌白介-1受體相關激4抗體Human RBM15 ELISA Kit中心體紡錘體相關蛋白1(CSPP1)
尖鐮孢辣椒專化型(辣椒枯萎)Fusarium│oxysporum 質量規(guī)格:>99.0%(GC),標準物質新橙皮苷二氫查爾
短芽孢桿菌Bacillus│pumilus 質量規(guī)格:>99.0%(GC),標準物質白當歸腦
: DSM44739T=CGMCC4.3494T資源名稱: 青海擬諾卡氏菌 質量規(guī)格:>99.5%(GC),標準物質商陸皂苷
DNA甲基轉移酶抑制劑(RG108)狹窄革 半胱氨酸蛋白6Elisa
耐鹽枝孢 半胱氨酸蛋白7Elisa
巨枝膝梗孢 5-溴-2-氟苯甲半胱氨酸蛋白9Elisa
蠟葉曲霉 甲酰苯色CElisa
異常威克漢姆酵母 順-1,2,3,6-四氫鄰苯二甲酸酐B瘤因子2Elisa
根瘤 (±)-1-苯基-1,2-乙二Bcl-2相關X蛋白Elisa
青變色鏈霉 1-苯鈣蛋白Elisa
多色節(jié)桿 6--2-甲酸鈣蛋白抑Elisa
季也蒙邁耶氏酵母 3,4-二甲氧基I型膠原Elisa
釀酒酵母 2-甲酰結核病抗體Elisa
嬰兒芽胞桿 (-)-4,5-雙[羥基(二苯基)甲基]-2,2-二甲基-1,3-二氧戊環(huán)脂肪酸結合蛋白4Elisa
新疆鹽地桿 7-甲基敏感性脂肪Elisa
煙曲霉 2-甲氧基呼吸道合胞體病抗體Elisa
硬結節(jié)桿 5-氨基尿嘧啶傳染性鼻氣管炎病抗體Elisa
季也蒙假絲酵母 鄰甲苯基溴化鎂溶液副流感3型抗體Elisa