商品介紹:
TD139是半乳凝素-3(galectin-3)糖結(jié)合結(jié)構(gòu)域的新型高親和力抑制劑,其Kd值為14nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1450824-22-2 純度:99.39% 分子量:648.64 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
草木樨中華根瘤菌促腎上腺皮質(zhì)激(1-39)抗體Human KIF3A ELISA Kit小鼠神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白4(NRG4)免疫試劑盒
克雷伯氏桿菌促腎上腺皮質(zhì)激ACTH(18-39)抗體Human KIAA0125 ELISA Kit小鼠神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白3(NRG3)免疫試劑盒
彎頭曲霉促腎上腺皮質(zhì)激ACTH (7-23)抗體Human KIAA0087 ELISA Kit小鼠神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白2(NRG2)免疫試劑盒
靈芝活性依賴的神經(jīng)保護(hù)肽抗體Human KIAA0141 ELISA Kit小鼠神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1(NRG1)免疫試劑盒
產(chǎn)紫青霉α1性糖蛋白1/類粘蛋白1抗體Human KIAA0182 ELISA Kit小鼠上皮中性?;罨?8(ENA-78/CXCL5)免疫試劑盒
東方伊薩酵母α1性糖蛋白2抗體(類粘蛋白2)Human KCTD5 ELISA Kit小鼠山梨脫氫(SDH)免疫試劑盒
大豆慢生根瘤菌磷化水通道蛋白2抗體Human KIAA0430 ELISA Kit小鼠沙眼衣原體抗體IgG(CT IgG)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌酪轉(zhuǎn)抗體Human KDM2A ELISA Kit小鼠殺傷凝集樣受體亞家族B, 成員1C(Klrb1c/Ly55c/Nkrp1c)免疫試劑盒
無殼異擔(dān)子菌抗利尿激/血管升壓/加壓/血管加壓抗體Human EFCAB14(EF-hand calcium-binding domain-containing protein 14) ELISA Kit小鼠色上皮衍生因子(PEDF)免疫試劑盒
黑曲霉ATP結(jié)合盒蛋白家族GCN20F家族1抗體Human KDM3A/JMJD1A ELISA Kit小鼠狀腺原(T3)免疫試劑盒
黃桿菌屬糖還原抗體Human KIAA0513 ELISA Kit小鼠癌標(biāo)志物-CA153免疫試劑盒
豌豆根瘤菌人血清白蛋白抗體Human KIF12 ELISA Kit小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)免疫試劑盒
河生腸桿菌生物Ⅰ型抗體(采用活疫苗制備)Human KIAA0528 ELISA Kit小鼠溶菌(LZM)免疫試劑盒
美澳型核果褐腐病菌活化轉(zhuǎn)錄因子4抗體Human KIAA0895 ELISA Kit小鼠絨毛膜促性腺激β(β-CG)免疫試劑盒
白乳菇腺苷激-1抗體Human KIAA1033 ELISA Kit小鼠絨毛膜促性腺激(CG)免疫試劑盒
大腸埃希菌纖維狀肌動(dòng)蛋白抗體Human KDM5D ELISA Kit小鼠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)免疫試劑盒
: =ATCC33492=NCIMB1893資源名稱: 藤黃紫假交替單胞菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR白介32試劑盒Α-香樹脂
: CICC1596資源名稱: 釀酒酵母 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR白介31試劑盒相思豆
彼爾姆短桿菌Brevibacterium│permense 質(zhì)量規(guī)格:BC白介3試劑盒新藤黃
半乳凝素-3抑制劑(TD139)茜雙酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Phlorizin絲裂原活化蛋白激相互作用蛋白1抗體包裝100g
羌活(寬葉羌活)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: PhlorizinMPP2蛋白抗體包裝25g
羌活(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Phloretin發(fā)育相關(guān)蛋白抗體包裝5g
羌活(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: PhloretinMS4A15蛋白抗體包裝1g
羥基紅花黃色A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Rhyncholphylline四度跨膜蛋白3抗體包裝250mg
羥基積雪草苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: β-Sitosterol黑色瘤相關(guān)抗原12抗體包裝5g
羥基積雪草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Glabridin黑色瘤相關(guān)抗原2抗體包裝100MG
羥基酪;3,4-二羥基乙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Podophyllotoxin黑色瘤相關(guān)抗原5抗體包裝10MG
羥基茜草/紅紫(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Podophyllotoxin同源盒基因Msx2抗體包裝1g
喬松(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Podophyllotoxin磷化雙微體2癌基因抗體包裝5g
茄尼(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: D-Fructose磷化雙微體2癌基因抗體包裝100ml
芹菜苷; 芹黃苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fructose三聚單克抗體包裝25ml
芹菜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Harpagoside黑色瘤相關(guān)抗原B1抗體包裝1ml
芹菜-6-C-α-L-吡喃阿拉伯糖-8-C-β-D-...英文名稱: Harpagide微小染色體維持缺陷蛋白5抗體包裝25g
芹菜-7-O-(2G-鼠李糖)龍膽糖苷英文名稱: Sec-O-Glucosylhamaudol結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白1抗體包裝5g