公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:野生型JAK2和突變型JAK2V617F抑制劑
英文名稱:Pacritinib
產(chǎn)品規(guī)格:2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
英文名稱:Pacritinib 產(chǎn)品規(guī)格:2mg|5mg|10mg|50mg|100mg Pacritinib是一種有效的野生型JAK2和JAK2V617F突變型抑制劑,IC50分別為23nM和19nM。Pacritinib也抑制FLT3及其突變型FLT3D835Y,IC50分別為22nM和6nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):937272-79-2 別名:SB1518 純度:99.66% 分子式:C??H??N?O? 分子量:472.58 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
球孢白僵菌硫乙酰肝蛋白多糖2Human SRX1(Sulfiredoxin-1) ELISA Kit大鼠二肽基肽Ⅳ(DPPⅣ)免疫試劑盒
金9401(金針菇)肝癌相關(guān)抗原h(huán)ca25aHuman SS18L2 ELISA Kit大鼠二級(jí)淋巴組織趨化因子(SLC/CCL21)免疫試劑盒
名稱己糖激3抗體Human FZD1(Frizzled-1) ELISA Kit大鼠二氧化(DAO)免疫試劑盒
黃柄曲霉人乙肝病pre S1/S2蛋白抗體Human SSH3 ELISA Kit大鼠兒茶酚抑免疫試劑盒
黑曲霉人乙肝病pre S1蛋白抗體Human SRFBP1 ELISA Kit大鼠兒茶酚(CA)免疫試劑盒
盾殼霉己糖激1抗體Human SSR4 ELISA Kit大鼠多藥耐藥蛋白1(ABCB1)免疫試劑盒
釀酒酵母己糖激2抗體Human SRGAP2 ELISA Kit大鼠多肽YY/酪酪肽(PYY)免疫試劑盒
斜臥青霉熱休克蛋白90α抗體Human SRGAP1 ELISA Kit大鼠多巴轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(DAT)免疫試劑盒
大腸埃希菌肝源性纖維蛋白原相關(guān)蛋白1抗體Human SSRP1 ELISA Kit大鼠多巴D2受體配體(D2RL)免疫試劑盒
果蔬汁 三唑磷、、磷、 乙酰磷紅分化相關(guān)基因蛋白抗體Human SSSCA1 ELISA Kit大鼠多巴D2受體(D2R)免疫試劑盒
細(xì)致交鏈孢同源異型盒基因HOXA13抗體Human SRGAP3 ELISA Kit大鼠多巴D1受體(D1R)免疫試劑盒
熱帶假絲酵母磷化組蛋白去乙酰化4(Ser246)抗體Human SSTR3 ELISA Kit大鼠多巴(DA)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌磷化組蛋白去乙?;?/span>7抗體Human SRI ELISA Kit大鼠對(duì)氧磷1(PON1)免疫試劑盒
木葡萄球菌磷化組蛋白去乙酰化4抗體Human FZD3(Frizzled-3) ELISA Kit大鼠端粒(TE)免疫試劑盒
滑菇磷化組蛋白去乙?;?/span>7抗體Human SSTR5 ELISA Kit大鼠蕈堿型乙酰受體(M-AChR)免疫試劑盒
淺綠黃假單胞菌HIRA相互作用蛋白3抗體Human ST6GALNAC5 ELISA Kit大鼠頂體蛋白(ACR)免疫試劑盒
天山中慢生根瘤菌Mesorhizobium│tianshanense 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品松蘿
發(fā)酵假絲酵母Candida│fermentati 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品漢黃芩
DSM 22959Akkermansia muciniphila 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品葫蘆B
野生型JAK2和突變型JAK2V617F抑制劑多形布勒擔(dān)子酵母 硅烷基 2,2-二氟-2-(氟磺酰)醋酸鹽媾疫錐蟲抗體Elisa
香菇(L988) 9-吖啶尼帕病抗體Elisa
地衣芽孢桿 2-氨基嘧啶-5-甲非酯化脂肪酸Elisa
盤長孢狀盤孢 5-降烯-2-羧酸馬心脂肪酸結(jié)合蛋白Elisa
蠟蚧 N-Boc-1-氨基環(huán)丁烷羧酸馬結(jié)合珠蛋白;觸珠蛋白Elisa
IBV M41 HAR/HI serum 陽性血清(荷蘭引進(jìn)) 4,6-二甲基二苯并噻吩輔肌動(dòng)蛋白α1Elisa
間型串珠鐮孢 納米碳化鋯輔肌動(dòng)蛋白α2Elisa
昆明鏈霉 碳化鎢轉(zhuǎn)錄激活因子-1Elisa
蘇云金芽孢桿蘇云金亞種 碳化鈦(粉末)轉(zhuǎn)錄激活因子-2Elisa
根瘤 碳化鉭磷脂酰肌蛋白聚糖1Elisa
唐菖蒲青霉 碳化鈮磷脂酰肌蛋白聚糖4Elisa
冷變紫薄層 碳化鉿絡(luò)絲蛋白Elisa
粉紅單端孢霉 堿式碳酸銅緊密連接蛋白Elisa
就地堆肥地芽孢桿 硒化鉍(III)組織因子Elisa
克魯維畢赤酵母克魯維變種 五氧化三鈦組織因子途徑抑制物Elisa