詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
500T|1000T | 1~3天 |
商品介紹:
綠色熒光細胞活性檢測試劑盒是采用一種可對活細胞進行熒光標記的細胞染色試劑,檢測細胞增殖情況。當熒光染色試劑其進入到細胞質后,酯酶會將其水解并留在細胞內(nèi),發(fā)出強綠色熒光,它的細胞毒性很低,不會抑制任何的細胞功能如增殖或淋巴球的趨化性。 儲存條件:-20℃避光保存。 有效期:一年。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
N-乙酰基葡萄糖(標準品)英文名稱: NilotinibC-藻藍/藻藍蛋白/藻青蛋白抗體包裝25g
Nateglinide(標準品)英文名稱: Spiramycin色P450 1A1抗體包裝5g
Nifedipine(標準品)英文名稱: Spiramycin絲/蘇蛋白質激II α抗體包裝1mg
Norepinephrine Bitartrate(標...英文名稱: Spironolactone2號染色體開放閱讀框66抗體包裝5mg
Norethindrone(標準品)英文名稱: SpironolactoneCULLIN抗體包裝25mg
O,P-滴滴滴(標準品)英文名稱: Carbamazepine小牛胸腺DNA抗體包裝5mg
P-基異酯(標準品)英文名稱: Carbamazepine1號染色體開放閱讀框226抗體包裝25g
Phenformin hydrochloride(標準...英文名稱: Carboplatin組織蛋白L抗體包裝5g
Phenne hydrochloride...英文名稱: Carboplatin絲/蘇蛋白激II β抗體(casein kinase IIβ)包裝100g
Pioglitazone HCl(標準品)英文名稱: Vincristine Sulfate角蛋白18抗體包裝25g
Prednisolone acetate(標準品)英文名稱: Vincristine Sulfate轉化生長因子β1結合蛋白抗體包裝10g
Prednisolone(標準品)英文名稱: Pazopanib22號染色體開放閱讀框45抗體包裝50g
Prednisone Acetate(標準品)英文名稱: Felodipine22號染色體開放閱讀框32抗體包裝100g
Prednisone(標準品)英文名稱: FelodipineCD5L抗體包裝25g
Pregnenolone Acetate(標準品)英文名稱: 6-TG/ThioguanineCD6抗體包裝500g
靈芝菌Ganoderma│lucidum (Curtis) P. Karst. 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品血紅蛋白H試劑盒雪膽 ;Curcurbitacin
: ATCC51331資源名稱: 嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌 質量規(guī)格:>98%血紅蛋白C試劑盒纈草三酯;Valtrate
乳乳球菌Lactococcus│lactis 質量規(guī)格:>98.5%,USP/BP血紅蛋白試劑盒香荊芥酚;5-Isopropyl-2-m
Calcein AM細胞增殖與毒性檢測試劑盒根瘤 2-氨基-5-氟苯并噻唑抗父體性抗體Elisa
土壤桿屬 2H-吡啶并[3,2-b]-1,4-雜氧-3(4H)-酮漢坦病IgM抗體Elisa
加拿大帚霉 2,5-二溴肺衣原體IGMElisa
球毛殼 2H-吡啶并[3,2-b]-1,4-雜氧-3(4H)-酮黑色Elisa
茶樹菇 1,3-二氫-5,6-二甲基-2H-苯并咪唑-2-酮脫氧核糖核酸ⅠElisa
潰瘍棒狀桿 2,5-二溴SCAMP3Elisa
羅磷傘 N-基芐解偶聯(lián)蛋白 1Elisa
赭綠青霉 1-(3-氯基)-4-甲基哌her2-ecdElisa
癤葡萄座腔 5-并[C][1,2,5]惡二唑分泌型卷曲相關蛋白3Elisa
馬拉交替紅色桿 5-并[C][1,2,5]惡二唑鳥氨酸Elisa
黃綠木霉 4-氯-2-氟肉桂酸肽基精氨酸脫亞2Elisa
德氏乳桿保加利亞亞種 環(huán)己碳酸鹽肽基精氨酸脫亞4Elisa
喜溫愛達荷犁頭霉 4-氨基吡唑并[3,4-d]嘧啶結核桿抗體Elisa
異常威克漢姆酵母 3-甲基噻吩-2-羧酸神經(jīng)絲蛋白LElisa
熱葡糖苷地芽孢桿 對己基溴苯白介4受體Elisa