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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-21 11:14:14瀏覽次數(shù)：248
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 20T|50T|100T |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X9573 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 公司產(chǎn)品僅供科研 | 英文名稱 | Caspase-2 Fluorescence Metric Assay |
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；
②生物膜與細(xì)胞器的研究；
③細(xì)胞骨架體系的研究；
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性：
中文名稱：Caspase 2熒光法檢測(cè)試劑盒(AFC)
英文名稱：Caspase-2 Fluorescence Metric Assay
產(chǎn)品規(guī)格：20T|50T|100T
發(fā)貨周期：1～3天
商品介紹：
本試劑盒適用于培養(yǎng)細(xì)胞及新鮮組織Caspase-2 檢測(cè)。Caspase 家族在介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的過(guò)程中起著非常重要的作用，其中Caspase-2 為關(guān)鍵的執(zhí)行分子，與DNA 斷裂、染色質(zhì)凝聚和凋亡小體形成有關(guān)。Caspase-2 在正常狀態(tài)下以酶原的形式存在于胞漿中，沒(méi)有活性；但在細(xì)胞發(fā)生凋亡階段，它被激活，活化的Caspase-2 由兩個(gè)大亞基和兩個(gè)小亞基組成，裂解相應(yīng)的胞漿胞核底物，終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。Caspase-2 熒光檢測(cè)試劑盒就是將Caspase-2 序列特異性的多肽偶聯(lián)至發(fā)色基團(tuán)。當(dāng)?shù)孜锉籆aspase-2 剪切后，發(fā)色基團(tuán)即游離出來(lái)，可通過(guò)熒光酶標(biāo)儀測(cè)定其熒光強(qiáng)度（激發(fā)波長(zhǎng)=485nm,發(fā)射波長(zhǎng)=535nm）。 注意事項(xiàng) 1. Caspase-2 Substrate 避光保存及使用。 2. 對(duì)某些凋亡誘導(dǎo)劑引起的細(xì)胞凋亡可能存在非依賴于Caspase-2 活化的機(jī)制，這種情況時(shí)利用本試劑盒檢測(cè)Caspase-2 活性無(wú)明顯改變，需要考慮凋亡機(jī)制中的其他信號(hào)通路。 3. 細(xì)胞數(shù)量需達(dá)到3~5×106 個(gè)或新鮮組織50~100mg，以便能達(dá)到測(cè)定需要的100~200μg 蛋白的要求，因?yàn)镃aspase-2 的活性與細(xì)胞裂解液的蛋白含量有關(guān)，如測(cè)定的RFU 值偏低，可以通過(guò)適當(dāng)延長(zhǎng)反應(yīng)的時(shí)間，如果值還是不高，可通過(guò)增加細(xì)胞數(shù)量或組織量的方法來(lái)提高蛋白量。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
大內(nèi)皮(Big ET)英文名稱：Big ET ELISA Kit溶血磷脂?；D(zhuǎn)移D抗體包裝1g
大動(dòng)脈平滑肌肌動(dòng)蛋白α2(Acta2/Actsa/Actvs)英文名稱：Acta2/Actsa/Actvs ELISA Kit載脂蛋白E3抗體包裝250mg
催乳抑制激(PIH)英文名稱：PIH ELISA KitABI基因家族2抗體包裝1g
催乳釋放激(PRH)英文名稱：PRH ELISA Kit氧化蛋白質(zhì)解包裝5g
催乳(PRL)英文名稱：PRL ELISA Kit鐵調(diào)節(jié)蛋白2抗體包裝500mg
催產(chǎn)(OT)英文名稱：OT ELISA Kit乙脫氫1型抗體包裝50mg
促有絲分裂因子(MF/MPF)英文名稱：MF/MPF ELISA KitAFP4a蛋白抗體包裝1g
促性腺激釋放激(GnRH)英文名稱：GnRH ELISA KitRho GTP激活蛋白32抗體包裝250mg
促生長(zhǎng)激釋放激(GHRH)英文名稱：GHRH ELISA Kit能量平衡相關(guān)蛋白抗體包裝5g
促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子(CRF)英文名稱：CRF ELISA Kit禽腦脊髓炎病AEV抗體包裝5mg
促腎上腺皮質(zhì)激(ACTH)英文名稱：ACTH ELISA Kit腺苷環(huán)化7抗體包裝25g
促腎上皮質(zhì)激釋放激(CRH)英文名稱：CRH ELISA Kit腺苷環(huán)化4抗體包裝5g
促卵泡(FSH)英文名稱：FSH ELISA Kit腺苷活化蛋白激γ1抗體包裝1g
促狀腺釋放激(TRH)英文名稱：TRH ELISA Kit芳香N-乙?；D(zhuǎn)移抗體包裝1g
促狀腺(TSH)英文名稱：TSH ELISA Kit腺苷環(huán)化8抗體包裝1g
三磷腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員2抗體結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)AR-A014418 is an ATP-competitive, and selective GSK3β inhibitor with IC50 and Ki
Caspase 2熒光法檢測(cè)試劑盒(AFC)丁香假單胞 4-羥基-6-氯喹唑啉基質(zhì)金屬蛋白酶8檢測(cè)試劑盒
異常威克漢姆酵母 6--4-羥基喹唑啉基質(zhì)金屬蛋白酶9檢測(cè)試劑盒
假交替單胞屬 2-甲氧基-3-硝基-4-甲基吡啶基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1檢測(cè)試劑盒
棲土曲霉 1-乙酰-4-基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2檢測(cè)試劑盒
蜥蜴纖細(xì)芽孢桿 2-(1H-吡唑-1-基)乙酸基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3檢測(cè)試劑盒
釀酒酵母 5-氯-6-甲基尿嘧啶基質(zhì)裂解蛋白;基質(zhì)溶素檢測(cè)試劑盒
*櫻桃鏈格孢 1-(3-甲氧基苯基)哌基質(zhì)裂解素檢測(cè)試劑盒
金龜子綠僵 N,N-二甲基1,4-丁烷二基質(zhì)衍生因子1檢測(cè)試劑盒
釀酒酵母 4-甲基-2-戊基-1,3-二氧戊環(huán)基質(zhì)衍生因子1α檢測(cè)試劑盒
Sphingobium rhizovicinum 2-氯-5-甲氧基苯并咪唑基質(zhì)衍生因子1β檢測(cè)試劑盒
大腸埃希氏 3,4-二甲氧基甲酯基質(zhì)相互作用分子1檢測(cè)試劑盒
小孢擬盤多毛孢 N-Boc-4-亞甲基激活素A檢測(cè)試劑盒
盤長(zhǎng)孢狀盤孢 2'-F-Ac-dC亞磷酰單體敏感性脂肪酶檢測(cè)試劑盒
玫煙色棒束孢 N-乙?；?5'-O-[雙(4-甲氧基苯基)苯基]-2'-脫氧-2'-氟胞苷激肽釋放酶10檢測(cè)試劑盒
豬鏈球分型血清參考品 血清型 SS3 3-氟-2-甲基吡啶激肽釋放酶11檢測(cè)試劑盒
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