產(chǎn)品屬性:
中文名稱:BiP抑制劑(HA15)
英文名稱:HA15
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
HA15是一個小分子BiP的抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1609402-14-3 純度:99.82% 分子量:466.58 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
釀酒酵母小鼠腎損傷分子1Anti-PEX5 Antibody人烏頭2(ACO-2)
Mesorhizobium人角蛋白20Anti-PEX3 Antibody人烏頭2(ACO-2)
中間檸檬桿菌大鼠骨粘連蛋白Anti-PEX7 Antibody人26S蛋白體(26S PSM)
密叢毛霉小鼠抗單核抗體Anti-PEX7 Antibody人26S蛋白體(26S PSM)
巴氏葡萄球菌小鼠脂蛋白αAnti-PFKFB1 Antibody人周期依賴性激4(CDK-4)
米根霉人β內(nèi)啡肽Anti-PFKFB2 Antibody人周期依賴性激4(CDK-4)
芋枝孢大鼠游離脂肪Anti-PFKP Antibody人胎盤堿性磷(PLAP)
耐久腸球菌人N端前腦鈉Anti-PFKM Antibody人胎盤堿性磷(PLAP)
靈芝大鼠葉Anti-PFKL Antibody人胎盤堿性磷(PLAP)
枯草芽孢桿菌小鼠大內(nèi)皮Anti-PFKFB1 Antibody人胎盤堿性磷(PLAP)
Bacillus atrophaeus小鼠Ⅷ相關(guān)抗原Anti-PFKP Antibody人受體酪激(RTKs)
細(xì)鏈格孢人前心鈉肽Anti-PGBD1 Antibody人受體酪激(RTKs)
Chrysonilia sitophila大鼠組蛋白H2bAnti-PGD Antibody人絲裂原激活的蛋白激/MAP激(MAPK)
海海芽孢桿菌小鼠ⅨAnti-PGF Antibody人絲裂原激活的蛋白激/MAP激(MAPK)
竹喙球菌人角蛋白13Anti-PGD Antibody人溶菌(LZM)
枯草芽孢桿菌大鼠N端前腦鈉Anti-PHACTR4 Antibody人溶菌(LZM)
腫瘤壞死因子配體超家族成員7抗體黑曲霉3.3928細(xì)胞*培養(yǎng)基:
結(jié)構(gòu)蛋白家族3抗體水霉人直腸腺癌細(xì)胞(低分化)
T淋巴細(xì)胞受體α抗體黑木耳(AU110)人肺小氣道上皮細(xì)胞
選擇性胸腺細(xì)胞相關(guān)蛋白抗體靈芝菌人膽管癌細(xì)胞
BiP抑制劑(HA15)惠亞德克斯酵母 蒽醌-2-磺酸鈉
玉蜀黍赤霉(麥類赤霉?。?/span> 氨基磺酸鎳
球孢白僵 1-氨基-8-萘-3,6-二磺酸鈉
雞腿菇 癸烷磺酸鈉
淺黃根須腹 丁烷磺酸鈉
Microvirga subterranea 辛烷磺酸鈉
根瘤 己烷磺酸鈉
類干酪乳桿類干酪亞種 戊烷磺酸鈉
穗狀平臍蠕孢 庚烷磺酸鈉
節(jié)桿屬 甲基磺酸乙酯
戊糖乳桿 2-萘-1-磺酸
青霉屬 1,5-萘二磺酸鈉
黃桿 甲苯-4-磺酸鈉
銅綠假單胞 甲苯-4-磺酸
盔狀畢赤酵母 硫代水楊酸
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)