詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:SRB細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒
英文名稱:
產品規(guī)格:500T|1000T
發(fā)貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
產品價格:詢價磺酰羅丹明 B 細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒(Sμlforhodamine B,SRB)是一種替代MTT 法的細胞活性檢測方法。SRB可與生物大分子中的堿性氨基酸結合,在490nm~520nm波長處其OD值與活細胞數成良好的直線關系。在515nm的OD 讀數,可用做細胞數的定量。 儲存條件:2-8℃避光保存。 有效期:一年。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Medroxyprogesterone(標準品)英文名稱: Famciclovir磷化CD19抗體包裝250mg
Megestrol Acetate(標準品)英文名稱: Fludarabine Phosphate 淋巴趨化因子CCL21抗體包裝1g
Megestrol(標準品)英文名稱: Penciclovir表面趨化因子受體2A抗體包裝10g
Meprednisone(標準品)英文名稱: Itraconazole表面趨化因子受體2B抗體包裝25g
Methylprednisolone(標準品)英文名稱: Itraconazole表面趨化因子受體2抗體包裝100mg
Mevastatin(標準品)英文名稱: Fluconazole金屬肽鏈內切抗體包裝100mg
Mifepristone(標準品)英文名稱: Fluconazole鈣介質抗體包裝1g
Milnacipran HCl(標準品)英文名稱: Ziprasidone HCl表面趨化因子受體6抗體包裝5g
Minoxidil(標準品)英文名稱: Ziprasidone HCl胸腺活化調節(jié)趨化因子抗體包裝100mg
Mirtazapine(標準品)英文名稱: Escitalopram Oxalate半胱蛋白蛋白-6抗體(N端)包裝100mg
Mizolastine(標準品)英文名稱: Escitalopram OxalateCSMD1抗體包裝10mg
Mometasone furoate(標準品)英文名稱: Racecadotril煙堿型乙酰受體α4抗體包裝25g
N-(4-?;?酪(標準品)英文名稱: Racecadotril表面趨化因子受體9抗體包裝5g
N-基(標準品)英文名稱: Acetylspiramycin表面趨化因子受體5抗體包裝25g
N-基哌(標準品)英文名稱: Nilotinib胱抑C/半胱蛋白抑制劑C抗體包裝5g
: HC4資源名稱: 地衣形芽孢桿菌 質量規(guī)格:>6500 IU/mg,USP30血紅氧合1試劑盒纖細薯蕷皂苷;Gracillin
ATCC25526=CCRC14673=DSM20099資源名稱: 假長雙歧桿菌假長亞種 質量規(guī)格:含量測定血紅蛋白β亞基試劑盒香紫蘇 ;Sclareol
假單胞菌Pseudomonas│sp. 質量規(guī)格:純度≥98.0% 血紅蛋白α亞基試劑盒西瑞香 ; Daphnoretin
SRB細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒*銀耳、白木耳 Boc-D-3-基苯氨酸血管內皮生長因子165bElisa
羽扇豆根瘤 對甲基肉桂酸乙酯Rab-11AElisa
香菇 2,4-二溴-1-萘酚塵螨IgG4Elisa
阿爾及利亞擬盤多毛孢 正戊酸異戊酯TSHα亞單位Elisa
孟氏假單胞 4-溴-2,6-二氯甲苯FAT1Elisa
新月彎孢霉 2-甲氧基苯乙精氨酸Elisa
矮棒曲霉 (S)-3-氨基四鹽酸鹽睪酮受體Elisa
栗疫 FMOC-4-酮梅螺旋體Elisa
丁香鏈霉 Fmoc-D-4-氨酸核受體相關蛋白1Elisa
大腸埃希氏 2-溴-6-氟1型組織纖溶原激活物抑制劑Elisa
腸沙門氏腸炎亞種 2-溴-6-氯蘋果酸脫氫Elisa
脫葉鏈霉 3-乙?;痞赂事短擒誆lisa
運動發(fā)酵單胞 (2S,4S)-N-Boc-順式-4-氟-L-脯氨酸β甘露糖苷Elisa
亞美尼亞固氮 3-氯-6-苯基噠多聚體球蛋白受體Elisa
戊糖乳桿 5-甲基嘧啶Netrin-4Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)