p110α抑制劑(MLN1117)公司*的產(chǎn)品：NOS (Rabbit nitric oxide synthase) ELISA Kit 兔一氧化氮合成酚酞 Ph Eur., BP, 98-101%
eNOS (Rabbit Endothelial nitric oxide synthase) ELISA Kit 兔內(nèi)皮型一氧化氮合成碳?xì)?AR,99.5%
PLAUR/uPAR (Ra

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

橄欖色青霉生物標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-A1BG Antibody巢蛋白(NID)

南方樹舌Alexa Fluor 555標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-Mouse Serum Albumin Antibody超氧化物歧化1(SOD1)

釀酒酵母Alexa Fluor 647標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-LRATD2 Antibody常染色體隱性遺傳性耳聾59蛋白(DFNB59)

紅淡紫灰鏈霉菌PE-Cy5.5標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-SYNCRIP(HNRNPQ)(Human) pAb腸型脂肪結(jié)合蛋白(FABP2)

黑曲霉PE-Cy7標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-LRAT Antibody腸堿性磷(ALPI)

金黃殼囊孢菌Cy3標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-AARSD1 Antibody叉頭框蛋白P3(FOXP3)

日本曲霉Cy5標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-AAAS Antibody叉頭框蛋白P1(FOXP1)

肺炎克雷伯氏菌Cy5.5標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-ABCA8 Antibody叉頭框蛋白O3(FOXO3)

枝孢霉Cy7標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-AASDHPPT Antibody叉頭框蛋白O1(FOXO1)

栗色牛肝菌PE標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-AASS Antibody叉頭框蛋白C1(FOXC1)

豬丹絲菌PE-Cy3標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-ABCB5 Antibody層粘連蛋白γ3(LAMγ3)

香蕉PE-CY5標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-ABCB1 Antibody層粘連蛋白γ2(LAMγ2)

褐球固氮菌APC標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-AASDHPPT Antibody層粘連蛋白γ1(LAMγ1)

法氏沃氏黃桿菌Alexa Fluor 350標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-ABCA13 Antibody層粘連蛋白β4(LAMβ4)

土曲霉PE-Cy5.5標(biāo)記的驢抗兔IgGAnti-ABCB7 Antibody層粘連蛋白β3(LAMβ3)

毛木耳PE-Cy7標(biāo)記的驢抗兔IgGAnti-ABCB8 Antibody層粘連蛋白β2(LAMβ2)

原鈣粘蛋白1抗體彎曲芽孢桿菌大鼠食管組織提取物

缺陷性分配同源物α抗體副凝聚短狀桿菌大鼠小腸組織提取物

表觀抑制因子Polycomb家族成員PCGFl蛋白抗體瓊氏不動桿菌大鼠直腸組織提取物

原鈣粘蛋白介導(dǎo)的PCDHαC2受體抗體尿腸球菌大鼠腸組織提取物
p110α抑制劑(MLN1117)海桑小單孢 Bis-5,5-nortrachelogenin

釀酒酵母 Antidesmone

忠清南道鹽單胞 Alstolenine

嗜礦泉?dú)鈫伟?/span> Abiesinol F

海洋桿 9-O-Methyl-4-hydroxyboeravinone

粗毛纖孔 7β-Hydroxyrutaecarpine

彎孢 6α-Hydroxycleroda-3,13-dien- 16,

芽孢桿 5-Allyl-3-methoxy-6-methyl-7-(3,

漢遜德巴利酵母 2-(4-Hydroxyphenyl)-6-methyl- 2,

笠原考克娃酵母 16-Epikoumidine

叢毛紅曲 15-Methoxymkapwanin

疣梗曲霉 14-Benzoylneoline

裂褶 13-鄰去乙?；t豆杉 Z

多主葡萄殼 (E)-Aldosecologanin

紅酵母屬 黃花香茶菜甲