產(chǎn)品屬性:
中文名稱:JAK2和JAK3抑制劑(AT9283)
英文名稱:AT9283
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
AT9283是一種多靶點抑制劑,抑制JAK2和JAK3的活性,IC50值分別為1.2nM和1.1nM;對Aurora A,Aurora B和Abl(T315I)也有作用。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:896466-04-9 純度:99.13% 分子量:381.43 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
鹽古桿菌黑色瘤相關(guān)抗原B3抗體Human NUCB2(Nucleobindin-2) ELISA Kit人抗人絨毛膜促性腺激抗體(AhCGAb)
布魯氏菌 生物Ⅱ型鋅指蛋白801抗體Human RLN3(Relaxin-3) ELISA Kit人抗染色體抗體(anti-chromosome Ab)
中性彎曲嗜菌NDUFS2抗體Human IL5RA(Interleukin-5 receptor) ELISA Kit人抗浦肯野抗體/抗Yo抗體(PCA-1/Yo)
產(chǎn)朊假絲酵母NDUFAF4抗體Human S100A16(Protein S100-A16) ELISA Kit人抗平滑肌抗體(ASMA)
黑木耳分化相關(guān)基因NDRG1抗體Human ELANE(Neutrophil elastase) ELISA Kit人抗皮膚抗體(ASA)
中慢生華癸根瘤菌神經(jīng)降壓抗體Human RRM1(Ribonucleoside-diphosphate reductase large subunit) ELISA Kit人抗凝血抗體(aPT1/aPT2)
殺鮭氣單胞菌核受體輔助抑制因子2抗體Human PSG3(Pregnancy-specific beta-1-glycoprotein 3) ELISA Kit人抗凝血受體(ATR)
黃色短桿菌核仁磷蛋白抗體Human IL5RA(Interleukin-5 receptor) ELISA Kit人抗凝血III(AT III)
大腸埃希氏菌嗜中性粒胞漿因子4抗體Human NUCB2(Nucleobindin-2) ELISA Kit人抗凝血Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)
蘑菇輪枝孢磷化核因子NF-κB p65抗體Human S100A16(Protein S100-A16) ELISA Kit人抗凝血Ⅲ(ATⅢ)
*勝利油田熱微球菌磷化一氧化氮合成3(內(nèi)皮型)抗體Human RLN3(Relaxin-3) ELISA Kit人抗釀酒酵母抗體(ASCA)
黑曲霉核抑制蛋白磷1抗體Human FABP4(Fatty acid-binding protein, adipocyte) ELISA Kit人抗內(nèi)因子抗體(IFA)
異配囊接霉NCK銜接蛋白1抗體Human IL9(Interleukin-9) ELISA Kit人抗內(nèi)皮抗體(AECA)
熱帶鹽水孢菌α-中連蛋白抗體Human RRM1(Ribonucleoside-diphosphate reductase large subunit) ELISA Kit人抗腦組織抗體(ABAb)
大腸桿菌核受體Rev-Erbα抗體Human LAMA1(Laminin subunit alpha-1) ELISA Kit人抗苗勒管激(AMH)
Wautersiella falsenii性受體NK-p44抗體Human PDGFRA(Alpha-type plaet-derived growth factor receptor) ELISA Kit人抗麥膠蛋白/麥溶蛋白抗體(AGA)
副溶血弧菌Vibrio│parahaemolyticus 質(zhì)量規(guī)格:BR,4000u/g落新婦苷
假交替單胞菌Pseudoalteromonas│tetraodonis 質(zhì)量規(guī)格:BR,100 U/mg羅通定
鹽單胞菌Halomonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格:BR,75U/MG鹽基葡萄糖
JAK2和JAK3抑制劑(AT9283)大斑凸臍蠕孢 S-芐基-L-半胱氨酸白介1受體拮抗劑Elisa
枯草芽孢桿枯草亞種 2--6-甲基煙酸乳清蛋白Elisa
葡萄座腔 內(nèi)消旋-2,3-二巰基丁二酸結(jié)核病Elisa
短小芽孢桿 2-噻吩乙β2微球蛋白Elisa
菊池鏈格孢 1-(2-)β-乳球蛋白Elisa
鏈球(不定種) 2-溴噻唑環(huán)磷酸腺苷Elisa
大腸埃希氏桿 膽固油酸酯乳房鏈球Elisa
蠟樣芽孢桿 3,5-二苯腫瘤壞死因子γElisa
羅倫隱球酵母羅倫變種 3-溴-4-甲基噻吩β干擾Elisa
谷氨酸棒桿 N,N,N',N'',N''-五甲基二乙烯基三細粒棘球絳蟲抗體Elisa
癭青霉 3,4-二苯甲酰β內(nèi)酰Elisa
釀酒酵母 哌-2-羧酸牛血清白蛋白Elisa
頂青霉 油酸酰神經(jīng)元烯化Elisa
白靈側(cè)耳 3,5-二甲基異噁唑皮質(zhì)酮;腎上腺酮Elisa
干酪乳桿 烯苯S100B蛋白Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)