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莢膜染色液(Hiss法)

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更新時(shí)間:2022-04-24 12:25:42瀏覽次數(shù):401

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 2×20ml|2×50ml
貨號(hào) GOY-01X10109 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
莢膜染色液(Hiss法)公司*的產(chǎn)品:IL-1 Beta/FITC 熒光標(biāo)記白介1β抗體IgG二 standard for GC, ≥99.5% (GC)
IL-1ra/FITC 熒光標(biāo)記白介-1受體拮抗劑抗體IgG二丁 GCS, ≥99.5% (GC)
IL-1RA (Interleukin-1 receptor antagonist) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠、豬、牛、

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

中文名稱:莢膜染色液(Hiss法)

英文名稱:

產(chǎn)品規(guī)格:2×20ml|2×50ml

發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹:

用途:

觀察細(xì)菌莢膜

儲(chǔ)存條件:室溫,避光,12個(gè)月

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;

②生物膜與細(xì)胞器的研究;

③細(xì)胞骨架體系的研究;

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

奈帕芬英文名稱: Osteostatin (human)原鈣粘附蛋白α2抗體包裝1g

萘普生英文名稱: Osteostatin (1-5) amide(human, bovine, dog, horse,mouse, rabbit, rat)配對(duì)盒同源基因4抗體包裝5g

萘普生鈉英文名稱: Osteostatin amide (human)白蛋白3抗體包裝1ml

尼卡巴英文名稱: p60 v-src (137-157)PRELP蛋白抗體包裝1g

尼美舒利英文名稱: p60c-src Substrate ILys(Biotin)原鈣粘附蛋白10抗體包裝5g

帕米磷二鈉英文名稱: PACAP-27 (human, mouse,ovine, porcine, rat)原鈣粘附蛋白β1抗體包裝10g

帕米膦英文名稱: PACAP-27 (6-27) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)原鈣粘附蛋白β10抗體包裝1g

帕潘立英文名稱: PACAP-38 (16-38) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)原鈣粘附蛋白β6抗體包裝100g

泮托拉唑鈉1.5合物英文名稱: PACAP-Related Peptide (1-29)(rat)原鈣粘附蛋白β14抗體包裝500g

泮托拉唑鈉一物英文名稱: Pancreatic Polypeptide,human鈣粘蛋白LKC抗體包裝5mg

替佐米中間體I英文名稱: Pancreatic Polypeptide, ratPLEKHA7蛋白抗體包裝5g

匹多莫德英文名稱: Parathyroid Hormone (1-38),human鈣粘蛋白21抗體包裝100g

匹卡米英文名稱: Pentagastrin鈣粘蛋白β12抗體包裝10g

匹可硫鈉;匹克硫鈉英文名稱: Peptide YY, Human磷化磷脂酰肌激調(diào)節(jié)亞單位gamma抗體包裝25g

撲熱息痛/對(duì)乙?;佑⑽拿Q: Peptide YY (canine, mouse,porcine, rat)狀旁腺激相關(guān)蛋白抗體包裝25mg

黑木耳Auricularia│auricula 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品核因子κB抑制物激α試劑盒澳茄新堿;Solasurine

地中海馬特爾氏菌Martelella│mediterranea 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR核因子κB試劑盒7-基-4-基;7-aMino

毛莖點(diǎn)霉Chaetophoma│sp. 質(zhì)量規(guī)格:0.8%內(nèi)酯含量,BR核心結(jié)合因子α1,CBFA1/RUNX2 9-基;9-Aminocampt
莢膜染色液(Hiss法)黃孢紫紅菇 4-氟-3-基苯酸尼克酰磷酸核糖轉(zhuǎn)移Elisa

齊藤隱球酵母 三吡啶鈉環(huán)氧二十碳三烯酸Elisa

寡氧單胞 1,1,1-三氟異C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白4Elisa

蠟樣芽孢桿 三氟化-甲溶液KI67抗原Elisa

金針菇F39 3-吡啶去乙?;疎lisa

根瘤 偏磷酸異檸檬酸脫氫2Elisa

紅色鹽顆粒形 環(huán)戊烷四羧酸巨病IgG抗體Elisa

籬邊粘褶 3-氨基-4,4,4-三氟巴豆酸乙酯白血病抑制因子Elisa

松鼠葡萄球松鼠亞種 2-氨基嘧啶鹽酸鹽賴氫酸吡啶啉Elisa

酮丁梭(酮丁桿) 鹽酸黃酮哌酯17α羥化Elisa

釀酒酵母 3,5-二-4-氨基苯乙酮20α羥化Elisa

黃綠木霉 5-(磺酰基)-2-氟P21蛋白Elisa

蘇云金芽孢桿 2-甲基丁酸酯膽固24S-羥化Elisa

蝙蝠蛾擬青霉 Cbz-L-谷氨酸 1-芐酯CD47分子Elisa

5#---3號(hào)(梨形灰包) 4-三氟甲硫基-1,2-苯二肌糖Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

 


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