以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
SMYD2抑制劑(LLY-507) | LLY-507 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg | 1~3天 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
LLY-507是一種SMYD2抑制劑,IC50<15nM,比抑制其他甲基轉(zhuǎn)移酶和非甲基轉(zhuǎn)移酶靶點(diǎn)選擇性高100多倍。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1793053-37-8 純度:99.09% 分子量:574.76 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
芽孢桿菌屬胃動(dòng)抗體Human CAV1(Caveolin-1) ELISA Kit人抗糖蛋白抗體(GP)
釀酒酵母甘露聚糖結(jié)合凝集抗體Human MYH9(Myosin-9) ELISA Kit人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAG Ab)
雙孢菇膜相關(guān)環(huán)指蛋白11抗體Human AMSH(alpha-MSH) ELISA Kit人抗髓磷脂抗體IgA(anti-myelin Ab)
異常威克漢姆酵母結(jié)核分枝桿菌Ag85B抗體Human SERPINA6(Corticosteroid-binding globulin) ELISA Kit人抗髓磷脂抗體IgA(AMA IgA)
大腸埃希菌磷化微管相關(guān)蛋白4抗體Human IL17RB(Interleukin-17 receptor B) ELISA Kit人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)
球孢白僵菌磷化微管相關(guān)蛋白4抗體Human NR1H2(Oxysterols receptor LXR-beta) ELISA Kit人抗鼠抗體(HAMA)
類(lèi)布氏乳桿菌人水痘帶狀皰疹病gE蛋白抗體Human UBR4(E3 ubiquitin-protein ligase UBR4) ELISA Kit人抗嗜中性粒胞漿抗體(ANCA)
礦泉水 鈣、鎂、、鈉、鍶、硒、偏硅 黑色瘤相關(guān)抗原G1/肝癌相關(guān)蛋白4抗體Human CRYAB(Alpha-crystallin B chain) ELISA Kit人抗腎小球基底膜抗體(GBM)
栗疫菌黑色瘤相關(guān)抗原B6抗體Human GLB1(Beta-galactosidase) ELISA Kit人抗腎小管基底膜抗體(TBM)
巴氏醋桿菌黑色瘤相關(guān)抗原C2抗體Human CAV1(Caveolin-1) ELISA Kit人抗腎上腺皮質(zhì)抗體(AAA)
釀酒酵母黑色瘤抗原樣基因2抗體Human HPR(Haptoglobin-related protein) ELISA Kit人抗神經(jīng)元核抗體2型/抗Ri抗體(ANNA-2/Ri)
假交替單孢菌黑色瘤相關(guān)抗原C1抗體Human TALDO1(Transaldolase) ELISA Kit人抗神經(jīng)元核抗體1型/抗Hu抗體(ANNA-1/Hu)
日本慢生根瘤菌黑色瘤相關(guān)抗原B2抗體Human PSG3(Pregnancy-specific beta-1-glycoprotein 3) ELISA Kit人抗神經(jīng)節(jié)苷脂抗體(GM1)
運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌黑色瘤相關(guān)抗原B4抗體Human FABP4(Fatty acid-binding protein, adipocyte) ELISA Kit人抗殺菌通透性增高蛋白抗體(BPI-Ab)
鄉(xiāng)間布丘氏菌組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移抗體(腦膜瘤表達(dá)抗原5)Human ELANE(Neutrophil elastase) ELISA Kit人抗腮腺管抗體(anti-parotid duct Ab)
葉點(diǎn)霉屬磷化微管相關(guān)蛋白4抗體Human COL4A1(Collagen alpha-1(IV) chain) ELISA Kit人抗軟骨抗體(anti-cartilage-Ab)
假單胞菌Pseudomonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格:BR,70萬(wàn)u/ml液體雷公藤乙
柑橘綠霉病Penicillium│digitatum (Pers.) Sacc. 質(zhì)量規(guī)格:BR,活5萬(wàn),粉末雷公藤
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:≥2000KU/mg protein,(牛胰)蘆丁
SMYD2抑制劑(LLY-507)灰黃青霉 3,5-二(三氟甲基)苯甲結(jié)合蛋白Elisa
嗜水氣單胞 (S)-(-)-2-酪蛋白Elisa
金黃殼囊孢 (+)-二對(duì)甲苯酰-D-a-s1-酪蛋白Elisa
植物乳桿 L-(-)-二(對(duì)甲酰)葉黃Elisa
深綠木霉 4-氟-4'-羥基聯(lián)苯酪蛋白磷酸肽Elisa
蘆竹節(jié)菱孢 2,5-呋喃二羧酸亞I型口蹄疫抗體Elisa
Hyphomicrobium zavarzinii 苯二乙酯小反芻獸疫病抗體Elisa
釀酒酵母 雙酚芴低氧誘導(dǎo)因子1Elisa
完州郡金黃桿 甲基烯酸十八烷基酯血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子Elisa
檸檬兩面神 化釤(II)口瘡病Elisa
西班牙糖絲 6-甲基煙酸堿性成纖維生長(zhǎng)因子Elisa
腸沙門(mén)氏腸炎亞種 2,6-二苯乙血小板衍化生長(zhǎng)因子Elisa
Gillisia sp. 甲基烯酸異基乙酯β羥丁酸Elisa
酒香酵母 氨酰-L-酪氨酸和肽Elisa
米根霉 對(duì)苯糖聚糖Elisa