公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Akt1/Akt2變構(gòu)抑制劑(BAY1125976)
英文名稱:BAY1125976
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
BAY1125976是Akt1/Akt2選擇性的變構(gòu)抑制劑;在10μM ATP時(shí)抑制Akt1和Akt2活性的IC50值分別為5.2nM和18nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1402608-02-9 純度:99.63% 分子量:383.45 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
寡鞘單胞菌小鼠羥脯Anti-PBOV1 Antibody人花生四烯5脂加氧(ALOX-5)
Arthrobacter人神經(jīng)降壓Anti-PCDH11Y Antibody人花生四烯5脂加氧(ALOX-5)
普茅斯沙雷氏菌大鼠解整合樣金屬蛋白8Anti-PDE10A Antibody人5脂加氧(5-LO/LOX)
痢疾志賀氏菌大鼠抗Anti-PDE4C Antibody人5脂加氧(5-LO/LOX)
赭鱗蘑菇人神經(jīng)激肽BAnti-PDGFC Antibody人腺苷環(huán)化1(AC-1)
俄勒岡靈芝小鼠骨保護(hù)配體Anti-PDE4C Antibody人腺苷環(huán)化1(AC-1)
苜蓿中華根瘤菌大鼠胰島抗體Anti-PDGFD Antibody人可溶性腺苷環(huán)化(sAC)
扣囊復(fù)膜孢酵母小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白Anti-PDGFRA Antibody人可溶性腺苷環(huán)化(sAC)
小馬勃人強(qiáng)啡肽Anti-PDHA1 Antibody人鳥(niǎo)脫羧(ODC)
灰黃淺黃酵母小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgAAnti-PDIA4 Antibody人鳥(niǎo)脫羧(ODC)
貝氏葡萄座腔菌大鼠腎損傷分子1Anti-PDHA1 Antibody人蛋白酪激(PTK/CD115)
擬鷲峰假絲酵母人腦啡肽Anti-PDIK1L Antibody人蛋白酪激(PTK/CD115)
枯草芽孢桿菌大鼠抗單核抗體Anti-PDLIM1 Antibody人蛋白酪磷(PTP/PTPase/CD148)
紅色蠟?zāi)⑷?/span>γ肽Anti-PDP2 Antibody人蛋白酪磷(PTP/PTPase/CD148)
粘質(zhì)沙雷氏菌小鼠鐵蛋白Anti-PDK1 Antibody人腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化(TACE)
食砜節(jié)桿菌小鼠碳酐2Anti-PDPK1 Antibody人腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化(TACE)
RPS27A抗體栗疫菌大鼠膀胱成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基:
RHOG抗體矩圓黑盤孢大鼠海綿體內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基:
髓系細(xì)胞觸發(fā)受體1抗體樟疫霉人胃癌阿霉耐藥株
癌/睪丸抗原113抗體*被孢霉屬人腎囊腫襯里上皮細(xì)胞
Akt1/Akt2變構(gòu)抑制劑(BAY1125976)杏鮑菇 4-羥基肉桂酸甲酯
厄氏 3-甲酸
條紋雞樅 3-苯酸
臘狀芽胞桿 3-
棱柱散尾中華變型 赤蘚糖
反曲毛殼 鄰苯二甲酸二甲酯
谷棒桿 D(+)-阿伯糖
腸膜明串珠 (-)-莰
賴氏毛殼 鄰苯二甲酸二辛酯
枯草芽孢桿 苯甲酰
球毛殼 對(duì)羥基
盤長(zhǎng)孢狀盤孢 4-氟
Dermacoccaceae 鄰乙氧基
那提瓦小單孢 3,4-二甲氧基
淺白隱球酵母 原兒茶酸