商品介紹:
666-15是有效選擇性的CREB抑制劑,IC50值為81nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1433286-70-4 純度:98.65% 分子量:620.52 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:CREB抑制劑(666-15)
英文名稱:666-15
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
克雷伯氏菌屬鋅指蛋白772抗體Anti-NADH2/Mtnd2 Antibody皮膚橋蛋白(DPT)
枯草芽胞桿菌鋅指蛋白740抗體Anti-NADH2/Mtnd2 Antibody皮膚T-虜獲趨化因子(CTACK)
馬鏈球菌鋅指蛋白843抗體Anti-NAMPT Antibody皮膚T-淋巴關(guān)聯(lián)抗原(CTAGE)
蘇云金芽孢桿菌鋅指蛋白619抗體Anti-NAE1 Antibody皮敵菌(DCD)
枯草芽孢桿菌鋅指蛋白131抗體Anti-NANOG Antibody皮層肌動蛋白(CTTN)
普瑞林格考克娃酵母鋅指蛋白131抗體Anti-NAT1 Antibody配子發(fā)育蛋白(GGN)
Escherichia鋅指蛋白449抗體Anti-NCAM1 Antibody配對框基因9(PAX9)
枯草芽孢桿菌鋅指蛋白346抗體Anti-NCAN Antibody胚胎植入前蛋白3(PREI3)
根瘤菌鋅指蛋白532抗體Anti-NCAN Antibody旁血小板溶蛋白(PPL)
馬賽菌鋅指蛋白516抗體Anti-NAT8L Antibody排卵蛋白(LAYN)
白淺灰鏈霉菌鋅指蛋白750抗體Anti-NBN Antibody(PB0651)帕金森氏病蛋白2(PARK2)
小雙孢菌鋅指蛋白744抗體Anti-NCF1 Antibody耦合因子6(CF6)
香菇鋅轉(zhuǎn)運體8蛋白抗體Anti-NCKAP1 Antibody偶對蛋白(SYMPK)
大腸埃希氏菌鋅指蛋白852抗體Anti-NCL Antibody扭轉(zhuǎn)原腸胚形成同源物1(TWSG1)
葉下珠生擬莖點霉鋅指蛋白503抗體Anti-NCOA1 Antibody牛磺轉(zhuǎn)運蛋白(TAUT)
耐冷冷桿菌鋅指蛋白672抗體Anti-NCOA4 Antibody牛痘相關(guān)激1(VRK1)
癌基因蛋白抑瘤M抗體棘孢小單胞菌人小腸平滑肌細胞提取物
OS-9蛋白抗體大孢鏈霉菌人直腸平滑肌細胞提取物
氧化應(yīng)激反應(yīng)蛋白1抗體紫紅鏈霉菌人支氣管平滑肌細胞提取物
氧氣調(diào)節(jié)蛋白150抗體法國蜜環(huán)菌人肺成纖維細胞提取物
CREB抑制劑(666-15)化妝品 二惡烷 DL-亮氨酸巰基轉(zhuǎn)移Elisa
粉紅單端孢 月桂酸乙酯谷氨酰合成Elisa
蘇云金芽胞桿加拿大亞種 乙酰乙酸乙酯酮酸脫氫Elisa
三側(cè)毛殼 癸二酸二正辛酯肌動蛋白Elisa
雞傷寒沙門氏 鄰苯二甲酸二正辛酯原肌球蛋白Elisa
谷氨酸棒桿 鄰苯二甲酸二壬酯肌球蛋白Elisa
圓弧青霉 二酸二甲酯肌鈣蛋白Elisa
橄欖色毛殼 順二酸二甲酯蘭尼定受體Elisa
釀酒酵母 丁二酸二乙酯鈉離子通道蛋白Elisa
漆柄小孔 鄰苯二甲酸二乙酯肌紅蛋白Elisa
謝瓦曲霉 正丁酯蛻皮Elisa
乳粉孢 芐酯皮質(zhì)酮;腎上腺酮Elisa
鐘器腐霉 乙酸芐酯游離狀腺原氨酸Elisa
微白類諾卡氏 磷酸三正丁酯游離甲狀腺Elisa
蜜色球形孢囊 乙酰乙酸甲酯乙酰羧化1Elisa