公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:TrpA1通道激動(dòng)劑(PF-4840154)
英文名稱:PF-4840154
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
PF-4840154是一種有效的選擇性大鼠和人TrpA1通道激動(dòng)劑,作用于小鼠,引發(fā)TrpA1介導(dǎo)的急性疼痛行為,EC50分別為97nM(rTrpA1)和23nM(hTrpA1)。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1332708-14-1 純度:99.92% 分子量:466.62 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
巨大芽胞桿菌錨定蛋白G抗體Human LRRC52 ELISA Kit豬Ⅶ(FⅦ)免疫試劑盒
杰丁塞伯林德納氏酵母肌動(dòng)蛋白α/α-SMA/α Actin抗體Human LRWD1(Leucine-rich repeat and WD repeat-containing protein 1) ELISA Kit豬Ⅱ(FⅡ)免疫試劑盒
淡黃濕傘整合樣金屬蛋白與凝血1型抗體Human LRSAM1 ELISA Kit豬凝血抗凝血復(fù)合物(TAT)免疫試劑盒
Streptomyces setonensis Shomura整合樣金屬蛋白與凝血1型-7抗體 (N端抗體)Human LSAMP ELISA Kit豬腦鈉(BNP)免疫試劑盒
單核增生李斯特氏菌整合樣金屬蛋白與凝血1型-7抗體Human LSG1 ELISA Kit豬鈉-葡萄糖共轉(zhuǎn)運(yùn)載體1(SGLT1)免疫試劑盒
黑曲霉內(nèi)收蛋白抗體Human LRRC29 ELISA Kit豬內(nèi)皮型一氧化氮合成(eNOS)免疫試劑盒
梨形卷枝霉脂肪組織分化相關(guān)蛋白抗體Human LSM1 ELISA Kit豬內(nèi)皮1(ET-1)免疫試劑盒
假絲酵母屬脂聯(lián)受體1抗體Human LRRC4C ELISA Kit豬末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)免疫試劑盒
鼠李糖小短桿菌腎上腺髓質(zhì)受體抗體Human LRRC18 ELISA Kit豬繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激(AMH)免疫試劑盒
釀酒酵母脂聯(lián)抗體Human LSG1 ELISA Kit豬免疫球蛋白M(IgM)免疫試劑盒
分枝桿菌腎上腺髓質(zhì)抗體Human LRRC52 ELISA Kit豬免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒
蒙古口蘑腺苷受體A3抗體Human LRRC20 ELISA Kit豬免疫球蛋白E(IgE)免疫試劑盒
產(chǎn)氣莢膜梭菌 C型ADRA2腎上腺能受體2抗體Human LRCH3 ELISA Kit豬免疫球蛋白A(IgA)免疫試劑盒
鏈霉菌腎上腺能受體β1抗體Human LRCH2 ELISA Kit豬糜蛋白免疫試劑盒
凍土毛霉腎上腺能受體β2/β2-AR抗體Human LRPPRC ELISA Kit豬流行性乙型腦炎抗體(IgG)免疫試劑盒
樟疫霉晚期糖基化終末產(chǎn)物抗體Human LRP2BP ELISA Kit豬磷脂A2(PLA2G1B)免疫試劑盒
#金針菇Flammulina│velutipes var. velutipes (Curtis) Singer 質(zhì)量規(guī)格:BR補(bǔ)體片斷3b試劑盒竹紅菌
費(fèi)希新薩托菌Neosartorya│fischeri 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR補(bǔ)體片斷3a試劑盒藏紅花
匍枝根霉(黑根霉)Rhizopus│stolonifer 質(zhì)量規(guī)格:BR補(bǔ)體片段4d試劑盒cis-紫莖女貞苷B
TrpA1通道激動(dòng)劑(PF-4840154)組織蛋白B抗原派可林(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
組織蛋白L抗原泮托拉唑鈉1.5水合物(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Rat
成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子(多肽)泮托拉唑鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
CREB結(jié)合蛋白抗原培哚普利叔丁鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
染色盒同源物3抗原培哚普利雜質(zhì)S9780(培哚普利拉)(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
CBX5(多肽)培美曲塞二鈉D-異構(gòu)體(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
克拉拉蛋白(Clara分泌蛋白)抗原培美曲塞二鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
CC趨化因子受體2/5抗原培美曲塞(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
嗜粒趨化蛋白CCL1抗原噴昔洛韋(標(biāo)準(zhǔn)品)Human