公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:PLK4抑制劑(CFI-400945 free base)
英文名稱:CFI-400945 free base
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
CFI400945是一個強的,有選擇性,能夠PLK4抑制劑,IC50是2.8±1.4nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1338806-73-7 純度:98.45% 分子量:534.65 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
綠色木霉人精加壓Anti-PAK1 Antibody人5核苷(5-NT)
普通裂褶菌大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白Anti-PANK2 Antibody人5核苷(5-NT)
釀酒酵母小鼠CXC趨化因子配體16Anti-Pannexin-1 Antibody人1,3-βD葡葡糖苷(1,3-βD-Glu)
假海源桿菌小鼠高敏狀腺原Anti-PAOX Antibody人1,3-βD葡葡糖苷(1,3-βD-Glu)
涎沫假絲酵母大鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgAAnti-PAQR5 Antibody人肌激(CK)
丁梭菌*(可換成10350)人垂體腺苷環(huán)化激活肽Anti-PAQR7 Antibody人肌激(CK)
Lonsdalea quercina subsp. iberica人微管相關(guān)蛋白2Anti-PARD3 Antibody人靶向核糖核(TR)
橄欖色毛殼小鼠B淋巴瘤因子2Anti-PAQR7 Antibody人靶向核糖核(TR)
短裙竹蓀1-3大鼠鐵蛋白Anti-PARK7 Antibody人蛋白激C(PKC)
粘帚霉屬大鼠補體片斷C1qAnti-PARD6B Antibody人蛋白激C(PKC)
谷棒桿菌Ⅲ型大鼠碳酐2Anti-PARP1 Antibody人縮(ALD)
腐皮鐮孢小鼠CXC趨化因子受體3Anti-PARP-1 Antibody人縮(ALD)
粉虱座殼孢人神經(jīng)絲蛋白Anti-PARP2 Antibody人L-乳脫氫(L-LDH)
楊生盾殼霉人尿肽Anti-Parvalbumin alpha Antibody人L-乳脫氫(L-LDH)
釀酒酵母大鼠色上皮衍生因子Anti-PC2 Antibody人性神經(jīng)鞘磷脂(ASM)
光黑腹菌小鼠腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子Anti-PAWR Antibody人性神經(jīng)鞘磷脂(ASM)
性核糖體磷蛋白P2抗體棗瘋病植原體人腸微血管內(nèi)皮細胞
環(huán)指蛋白185抗體茄爾氏菌1ug質(zhì)粒干粉
環(huán)指蛋白10抗體*黑芝(靈芝屬之一種)人雪旺細胞
RAN結(jié)合蛋白2/核孔蛋白抗體鮑魚菇外周血B細胞白血病細胞
PLK4抑制劑(CFI-400945 free base)尖孢鐮孢 4',6-二甲基-2-羥基苯乙酮
金孢寄生 水楊
酮假單胞 L-焦谷甲酯
澳型核果褐腐病 3-羥基-2-甲基-4-吡喃酮
球孢白僵 3-甲氧基
枯草芽孢桿 黃鐘花醌
Hydrogenophaga 皮脂酸
香菇 對羥基
紫蓋蜜環(huán) 3-(2,4-二羥基苯)酸
小青霉 乙酸維生E
白腐盾殼霉(可訂購) 四甲基酮
土曲霉 β-胸苷
ATCC 33217 p-Coumaric acid ethyl ester
pRSF Duet-1 2-甲氧基
發(fā)酵乳桿 5-甲基間苯二