商品介紹:
Propyphenazone是一種吡唑啉酮衍生物,具有消炎、止痛和解熱活性的。Propyphenazone為基礎(chǔ)的類(lèi)似物通常作為前藥,選擇性抑制環(huán)氧合酶-2(COX-2)。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):479-92-5 別名:4-Isopropylantipyrine;Isopropylphenazone 分子量:230.31 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
腸沙門(mén)氏菌腸亞種波那雷恩血清型G蛋白偶聯(lián)受體GPR37樣蛋白1抗體Human XRCC2 ELISA Kit雞α戊二脫氫(α-KGDHC)免疫試劑盒
大腸埃希氏桿菌G蛋白偶聯(lián)受體GPR105蛋白抗體Human YOD1 ELISA Kit雞α葡萄糖苷(α-glucosidase)免疫試劑盒
熒光假單胞菌G蛋白偶聯(lián)受體GPR12蛋白抗體Human PDE1C(Calcium/calmodulin-dependent 3′,5′-cyclic nucleotide phosphodiesterase 1C) ELISA Kit雞α干擾(IFN-α)免疫試劑盒
稻平臍蠕孢G蛋白偶聯(lián)受體GPR110蛋白抗體Human XRCC5/Ku80(X-ray repair cross-complementing protein 5) ELISA Kit雞α1性糖蛋白(OGCHI)免疫試劑盒
北京擲孢酵母G蛋白偶聯(lián)受體GPR125蛋白抗體Human XRCC4 ELISA Kit雞α/β水解域包含蛋白5(ABHD5)免疫試劑盒
杏鮑菇G蛋白偶聯(lián)受體RTA蛋白抗體Human WIPI1 ELISA Kit雞Toll樣受體4(TLR4)免疫試劑盒
根瘤菌G蛋白偶聯(lián)受體GPR155蛋白抗體Human XAB2 ELISA Kit雞N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷(NAG)免疫試劑盒
柔嫩艾美耳球蟲(chóng)G蛋白偶聯(lián)受體GPR30蛋白抗體Human MTX2(Metaxin-2) ELISA Kit雞L解(PAL)免疫試劑盒
Chitinophaga sp.G蛋白偶聯(lián)受體GPR86蛋白抗體Human WIPI2 ELISA Kit雞HSP90抗體(IgM)免疫試劑盒
停滯棒桿菌G蛋白偶聯(lián)受體HM74蛋白抗體Human WIT1 ELISA Kit雞HSP90抗體(IgG)免疫試劑盒
小單孢菌樣蛋白1樣蛋白抗體Human WNK4 ELISA Kit雞HSP72抗體(IgM)免疫試劑盒
細(xì)鏈格孢菌磷化接頭蛋白Gab 2抗體Human WNT3(Proto-oncogene Wnt-3) ELISA Kit雞HSP72抗體(IgG)免疫試劑盒
釀酒酵母磷化接頭蛋白Gab2抗體Human WRAP53 ELISA Kit雞HSP60抗體(IgM)免疫試劑盒
婁徹鏈霉菌干擾/維甲誘導(dǎo)凋亡相關(guān)基因抗體Human WDR81 ELISA Kit雞HSP60抗體(IgG)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌磷化接頭蛋白Gab 2抗體Human WRN ELISA Kit雞HSP27抗體(IgG)ELISA ki
甘薯長(zhǎng)喙殼多肽N-乙?;肴樘寝D(zhuǎn)移13抗體Human WRNIP1 ELISA Kit雞HSP27 IgM 抗體免疫試劑盒
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品紫檀芪
小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品97.5%通關(guān)藤苷G
康寧木霉Trichoderma│koningii 質(zhì)量規(guī)格:0.98通關(guān)藤苷I
COX-2抑制劑(Propyphenazone)鹽伊托必利(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Oleanolic acid電子轉(zhuǎn)移黃蛋白脫氫抗體包裝25g
鹽依匹斯汀(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Oleanolic acidEGF受體7跨膜結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體包裝5g
鹽乙丁(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Oleanolic acid乙激2抗體包裝25g
鹽乙立松(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Shikimic acid磷化Ets轉(zhuǎn)錄因子家族e(cuò)ts1抗體包裝5g
鹽異(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Shikimic acid磷化上皮癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體包裝100g
鹽異腎上腺(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Riociguat嗜性粒過(guò)氧化物抗體包裝10g
鹽左西替利(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pheniramine Maleate核內(nèi)切G抗體包裝25g
鹽咪唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: FTase Substrate, Fluorogenic酪蛋白激受體A10抗體包裝500g
鹽左氧沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Linaclotide 胞吐囊復(fù)合體蛋白2抗體包裝100ml
氧沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: benzoylpaeoniflorin 磷化4E結(jié)合蛋白1抗體包裝25ml
氧(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 3,4,5-Tricaffeoylquinic acid磷化絲裂原活化蛋白激1/2抗體包裝1g
葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Alisol A 24-acetate泛交聯(lián)抗體包裝250mg
伊潘立(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Alisol C monoacetate EB病核抗原-3B抗體包裝100g
伊曲康唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sclareolide磷化驅(qū)動(dòng)蛋白樣蛋白1抗體包裝25g
伊索拉定(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sclareolide乙?;D(zhuǎn)移EID1抗體包裝5g