以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
RS102895鹽酸鹽是高效特異性CCR2抑制劑,IC50值為360nM,對(duì)CCR1無(wú)明顯抑制作用(IC50值大于17uM)。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1173022-16-6 別名:RS-102895 hydrochloride 純度:98.98% 分子量:426.86 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
嗜根考克氏菌轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白BACH2抗體Human GBE1 ELISA Kit小鼠DNA(胞嘧啶-5)甲基轉(zhuǎn)移1(DNMT1)免疫試劑盒
大豆慢生根瘤菌炭疽桿菌致死因子LF抗體Human GBP1 ELISA Kit小鼠DAB2互作蛋白(DAB2IP)免疫試劑盒
枝狀枝孢菌蛋白BOC抗體Human GBF1 ELISA Kit小鼠C型鈉尿肽(CNP)免疫試劑盒
南印度站游動(dòng)球菌肽A抗體Human GAS7 ELISA Kit小鼠C肽(C-Peptide)免疫試劑盒
產(chǎn)氣莢膜梭菌 C型腦鈉/利鈉肽抗體Human GALNT4 ELISA Kit小鼠C反應(yīng)蛋白(CRP)免疫試劑盒
棉花枯萎Bcl2 beta蛋白抗體Human GALNT9 ELISA Kit小鼠CXC趨化因子受體4(CXCR4)免疫試劑盒
榛色鏈霉菌骨涎蛋白抗體Human GALNT7(N-acetylgalactosaminyltransferase 7) ELISA Kit小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)免疫試劑盒
熱帶假絲酵母死亡調(diào)解子抗體Human GAMT ELISA Kit小鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌Apollon凋亡抑制蛋白抗體Human GALNTL2 ELISA Kit小鼠CXC趨化因子配體1(CXCL1)免疫試劑盒
固氮菌表面趨化因子受體6抗體Human GALNTL5 ELISA Kit小鼠CXC趨化因子13(Cxcl13/Blc/Scyb13)免疫試劑盒
緊縮花褶傘β-內(nèi)啡肽/β endorphin抗體Human GAN ELISA Kit小鼠Cramp 免疫試劑盒
束梗鏈格孢骨成型蛋白受體1A抗體Human GAL3ST4 ELISA Kit小鼠c-jun 免疫試劑盒
分枝節(jié)桿菌Bcl-xL蛋白抗體Human GALE ELISA Kit小鼠c-fos 免疫試劑盒
香蕉磷化Bcl-xL(Ser62)抗體Human GALK1(Galactokinase) ELISA Kit小鼠CD8分子(CD8)免疫試劑盒
梭狀芽孢桿菌相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗體Human GAPDHS ELISA Kit小鼠CD4分子(CD4)免疫試劑盒
菊異莖點(diǎn)霉紅2,3 - 二磷甘油合成抗體Human GALNT14 ELISA Kit小鼠CD45分子(CD45)免疫試劑盒
: ATCC25870資源名稱: O1群霍亂弧菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRα乳清蛋白試劑盒七葉膽苷IX
膠紅酵母Rhodotorula│mucilaginosa 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BRα葡萄糖苷試劑盒去檳榔次堿
紅游動(dòng)菌Rhodoplanes│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRα平滑肌肌動(dòng)蛋白試劑盒青蒿乙
CCR2抑制劑(RS102895 hydrochloride)遠(yuǎn)志-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷英文名稱: Tiapride hydrochloride鼻咽癌相關(guān)蛋白6抗體包裝5g
遠(yuǎn)志(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Methyl hesperidin神經(jīng)4抗體包裝25g
遠(yuǎn)志皂苷B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: MolsidomineN-乙?;咸烟羌た贵w包裝5g
遠(yuǎn)志皂苷B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Molsidomine核因子1B抗體包裝100g
遠(yuǎn)志皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Mitotane;O,P'-DDD維誘導(dǎo)神經(jīng)母瘤蛋白1抗體包裝25g
月桂烯(香葉烯)英文名稱: Uracil 轉(zhuǎn)錄延伸因子NELF抗體包裝500g
月見(jiàn)草油(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Uracil 蛋白激C結(jié)合蛋白NELL1抗體包裝100g
云實(shí)皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Propantheline bromide蛋白激C結(jié)合蛋白NELL2抗體包裝25g
蕓香草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tulobuterol hydrochloride腦特異性跨膜蛋白抗體包裝5g
蕓香柚皮苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: N-(Isoxazol-5-yl)sulphanilamide核因子1A抗體包裝25g
皂角(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Labetalol hydrochloride環(huán)一螺旋蛋白1抗體包裝5g
澤瀉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Salicylamide腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因H4抗體包裝1g
澤瀉A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Feprazone神經(jīng)元衍生孤兒受體1抗體包裝5g
澤瀉A醋酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Anethole trithione軸突生長(zhǎng)誘向因子4抗體包裝100g
澤瀉B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Anethole trithione脊髓灰質(zhì)炎病受體相關(guān)蛋白4抗體包裝25g